PCR 领域中的全新绝对定量技术 – 数字 PCR

大海捞针 - 数字 PCR– 的威力

数字 PCR (Digital PCR, dPCR) 是一种将样本微分化为多个独立反应单元的技术，让每个反应中出现零个、一个或多个靶标分子。这种方法使得在强阴性信号背景下检测单个阳性信号这一典型的大海捞针问题变得异常容易。这类情况需要更低的检测下限，因而标准的实时定量 PCR (quantitative PCR, qPCR) 法不再可行。

数字 PCR 的决定性特征是核酸的绝对定量。分区后，对反应进行终点 PCR 循环，并分析微分区是存在（阳性反应）还是不存在（阴性反应）荧光信号。根据这些信息，我们可以计算出样本中存在的分子的绝对数量。与 qPCR 不同，dPCR 不依赖于标准曲线。因此，与 qPCR 相比，dPCR 的检测限更低，精度更高。

研究人员越来越多地将数字 PCR 用于敏感应用，如拷贝数变异分析、基因表达定量和稀有靶标检测。该方法有助于推进细胞和基因治疗研究、癌症研究、传染病监测、食品检测等工作。

揭示内在魔力

数字 PCR 中的样本分区方法包括微流控芯片、微阵列、旋转微流控圆盘和基于油水乳化液的微滴技术。为了保留用户熟悉的特性、使用起来更便利且具有更好的分辨率，我们开发出微流控纳米微孔板，以实现一流的微分化性能和改进的数字 PCR 数据。

非液滴。非晶体。非芯片。

在纳米微孔板中进行数字 PCR 的主要优点包括但不限于：

• 跟 qPCR 中一样的对用户友好且熟悉的孔板，便于移液
• 反应器是固定的，可防止出现大小不一和聚结
• 孔板可封闭，可防止出现孔间污染
• 可对样本的所有反应器进行同时读取，因而读板速度更快
• 集成的质量控制，即可在孔板图像上查看来自计数的各阳性反应器的单个荧光信号
• 可对孔板进行改适以用于前端自动化

与微滴数字 PCR (droplet digital PCR, ddPCR) 相比的优势

除了上述重点介绍的优势外，基于纳米微孔板的 QIAcuity Digital PCR System 与基于微滴数字 PCR 的系统相比具有显著优势。

整个数字 PCR 工作流程集成到一个系统中，大大提高了速度，减少了动手时间，并具有更高的可扩展性。

阅读更多关于 dPCR 与 ddPCR 对比的信息