サンプルの精製と処理の迅速化のための適切な酵素を選択する
試薬や反応物が残っていると、ダウンストリームプロセスの妨げになることがあります。次のステップに進む前に、適切な酵素調製物を用いてサンプルをクリーンアップしてください。あまり知られていない添加剤で増幅と転写をスピードアップし、強化します。
開裂用酵素と残留試薬のクリーンアップ
Exonuclease I、DNase I、RNase A、Proteinase K、その他ヌクレアーゼおよびプロテアーゼによるDNAサンプルの酵素クリーンアップ により、SNP解析、次世代シークエンシング、サンガーDNAシークエンシング、バイオプロセス、その他のダウンストリーム解析前に残存するプライマーやヌクレオチド、酵素を除去します。
Proteinase Kは、DNaseやRNaseを含む、タンパク質の消化に幅広く使用されるエンドペプチダーゼです。通常、酵素による消化ステップは核酸の調製中に行われて、分離したDNAやRNAの完全性には影響しません。Proteinase Kは高温下やSDS存在下などさまざまな反応条件下で活性を示します。
Proteinase K NGSグレードは次世代シークエンシングのための核酸調製など要求の極めて厳しいアプリケーションに使用できます。徹底した精製により比活性が向上し、溶解性が著しく向上(2.5倍)し、DNA含有量が0.1 pg/mg以下の優れた純度を示す高品質の酵素製品を実現しました。Proteinase K NGSグレードはエキソヌクレアーゼ、エンドヌクレアーゼ、およびリボヌクレアーゼ不含有です。
TAGZyme DAPase酵素 とTAGZymeシステムにて、固有のDAPaseストップポイントを含むタンパク質(TAGZyme pQE-2ベクターを用いて発現)、またはエンジニアリンググルタミンストップポイントを含むタンパク質からHis-tagを除去します。
残留試薬の分解とクリーンアップに使用できる、清掃係となる幅広い酵素をご用意しています。
収量改善のための酵素
増幅反応やシークエンシング反応に、PCR阻害物質の影響を打ち消すタンパク質を使用し、特殊なDNA結合タンパク質を付加すると、テンプレートのPCR収量と品質が向上する可能性があります。 バクテリオファージT4(T4gp32)由来のDNA結合タンパク質であるジーン32タンパク質は、数多くの多様なテンプレートでPCR増幅効率を高めます。また、E. coliの一本鎖DNA結合タンパク質(SSB)をDNAシークエンシング反応に用いると、シークエンシングランの分解能が向上します。
RNA調製物の反応に不可欠な無機ピロホスファターゼで処理すると、in vitro転写速度をあげることができます。この酵素はピロリン酸を2つのリン酸分子に開裂し、ピロリン酸がマグネシウムで沈殿するのを防ぎます。
UDG鎖の開裂
UDGを介した鎖開裂は、分子バイオテクノロジーの重要なツールであり、化学的または酵素的に合成した一本鎖および二本鎖DNAを、デオキシウリジンの1回または複数回の取り込みによって制御し、位置特異的に開裂することができます。
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アーチファクトの低減と反応クリーンアップに関してよくある質問
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