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PCR

Cuantificación de miARN

Examine de forma detallada y exacta cualquier tipo de miARN

La cuantificación de miARN es un proceso utilizado para medir los niveles de expresión de los microARN (miARN), que son pequeñas moléculas de ARN no codificante involucradas en la regulación genética. Proporciona información sobre diversos procesos biológicos y enfermedades.

La PCR cuantitativa (qPCR) es la herramienta predilecta para analizar las dianas conocidas de miARN y ofrece varias ventajas en comparación con la NGS. La qPCR es rápida, sencilla y económica y proporciona análisis extremadamente sensibles a partir de bajas cantidades de ARN de partida. También se adapta fácilmente desde la detección y la caracterización de perfiles hasta la validación de los estudios de NGS y la verificación de resultados de los estudios funcionales.

No obstante, las qPCR de miARN plantean desafíos especiales debido a su baja abundancia, secuencias cortas, gran variación en el contenido de GC y familias altamente homólogas, lo que dificulta el diseño de sondas y cebadores muy específicos. Hemos diseñado nuestros sistemas miRCURY LNA miRNA PCR y Probe PCR para superar estas dificultades, garantizando perfiles de miARN robustos y de alta sensibilidad, incluso para las aplicaciones más exigentes. Confíe en nuestras soluciones para lograr una cuantificación precisa de miARN y experimente la fiabilidad y la sensibilidad que necesita para sus investigaciones.

Cómo puede beneficiarse

Analyze any miRNA biomarker with ease

Analice cualquier biomarcador de miARN con facilidad

Los miARN muestran un alto potencial como biomarcadores de enfermedades y procesos biológicos, como el cáncer, las cardiopatías, la actividad del sistema nervioso, la hemostasia y la reparación del ADN, entre otros.

Nuestra oferta de ensayos PCR de miARN prediseñados es la más completa del mercado, de modo que podrá encontrar con facilidad los ensayos que necesita para sus dianas de interés. Cada uno de nuestros catálogos incluye más de 31.000 ensayos únicos para 271 especies diferentes y proporciona una cobertura completa de dianas en miRBase 22.

¿Está estudiando un miARN novedoso o un ARN pequeño? Utilice nuestro práctico asistente en línea para solicitar ensayos personalizados si no hay ningún ensayo prediseñado disponible.

Study the relevant targets for relevant results

Estudie las dianas pertinentes para obtener resultados relevantes

Nuestros paneles específicos prediseñados cubren diversas especies y proporcionan una forma práctica y rápida de detectar miARN relevantes desde el punto de vista biológico. Las dianas de cada panel se seleccionaron cuidadosamente a partir de una combinación de búsquedas bibliográficas, NGS y otros estudios, así como del asesoramiento de expertos destacados.

Los paneles específicos de suero/plasma se desarrollaron minuciosamente a partir de nuestros amplios análisis de la expresión de miARN en muestras de sangre, suero y plasma, así como de un número limitado de artículos publicados y revisados por colegas disponibles. Se usó más de 1 millón de puntos de datos internos y de colaboradores de muestras de suero/plasma de individuos sanos y enfermos para seleccionar los miARN relevantes, incluidos datos de expresión de miARN de diferentes fases de cánceres diversos, trastornos neurológicos, enfermedades neurodegenerativas, alergias, inflamaciones, etc.

Todos los paneles se pueden solicitar fácilmente en línea a través de GeneGlobe.

qPCR

Ensayos diseñados óptimamente para cualquier diana de miARN

Las longitudes de secuencia corta y las grandes similitudes complican el diseño de los ensayos de miARN. Superamos la dificultad gracias a la optimización de nuestros ensayos con ácidos nucleicos bloqueados (ANB)

Las bases de ANB aumentan la afinidad de unión del cebador, lo que nos permite diseñar sondas y cebadores muy cortos, que pueden colocarse directamente en la diana de miARN para crear dos puntos de hibridación específicos para miARN que no se superponen. Esto no es posible con los oligonucleótidos estándares. El resultado es un diseño óptimo del ensayo que detecta con precisión el miARN de interés con una especificidad que hasta puede distinguir diferencias de un solo nucleótido.

Además, los ANB permiten normalizar la Tm (temperatura de desnaturalización) del cebador para que todos los cebadores tengan la Tm óptima para una amplificación uniforme. Esto le permite detectar simultáneamente dianas de alta y baja abundancia con contenido heterogéneo de GC.

Quantify low-abundance miRNAs without preamplification

Cuantifique miARN de baja abundancia sin amplificación previa

La cuantificación de miARN poco abundantes con qPCR requiere, normalmente, una amplificación previa. Sin embargo, gracias a los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR, obtendrá resultados precisos sin necesidad de llevar a cabo este paso adicional.

¿Cuál es el secreto? Es la optimización mediante ANB. La mayor afinidad de unión de los oligonucleótidos de ANB nos permite diseñar ensayos que pueden detectar cualquier miARN biológicamente relevante con la máxima especificidad y sensibilidad, sin necesidad de amplificación previa.

Elección de la sustancia química de detección

Le ofrecemos la posibilidad de elegir entre la detección de miARN basada en SYBR Green y la basada en sondas de hidrólisis, ambas proporcionan alta sensibilidad y detección específica.

¿Cuál es la química de detección adecuada para usted?
Cada método ofrece ventajas únicas cuando se trata de costes, facilidad de uso, especificidad, solidez, flexibilidad de diseño y capacidad de multiplexado.

Flujo de trabajo rápido y sencillo

Los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR combinan la comodidad y la velocidad de una reacción de transcripción inversa (RT) universal con la sensibilidad y la especificidad de los cebadores de qPCR optimizados con ANB. El flujo de trabajo sencillo proporciona resultados rápidos y precisos para todo tipo de muestras, incluidos tejidos, células, exosomas y biopsias líquidas.

Qué necesita para comenzar

Un kit universal de transcripción inversa (1) contiene los productos químicos necesarios para la detección basada en sondas y en SYBR Green. Las mezclas maestras específicas para PCR (3) de cada sistema se combinan con los ensayos o paneles prediseñados o de diseño propio de su elección (4). El RNA Spike-In Kit opcional (2) permite llevar a cabo los pasos de control de calidad del aislamiento de ARN, la síntesis de ADNc y la amplificación por PCR para que pueda identificar muestras de baja calidad en una fase temprana, eliminarlas del estudio y ahorrar tiempo y reactivos.

  Sistema de detección SYBR Green Sonda de hidrólisis optimizada con ANB
1 Transcripción inversa miRCURY LNA RT Kit miRCURY LNA RT Kit
2 Puntas opcionales RNA Spike-In Kit, para RT RNA Spike-In Kit, para RT
3 Mezcla maestra para qPCR miRCURY LNA SYBR Green PCR Kits miRCURY LNA Probe PCR Kits
4 Ensayo o panel miRCURY LNA miRNA PCR Assays
• miRCURY LNA miRNA Custom PCR Assays
• miRCURY LNA miRNA Focus PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA Custom PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA miRNome PCR Panels

• miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays
• miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Assays

Próximamente:
• miRCURY LNA miRNA Focus Probe PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA Custom Probe PCR Panels
• miRCURY LNA miRNA miRNome Probe PCR Panels

¿Qué ensayo o panel es mejor para su estudio?

Los sistemas miRCURY LNA miRNA PCR le permiten diseñar a medida la configuración experimental de diversos tipos de estudios con ensayos individuales o paneles personalizados totalmente flexibles. Puede utilizar la misma reacción de ADNc y cambiar sin problemas entre cebadores individuales, paneles prediseñados miRNome y Focus o paneles personalizados.

Tipo de producto Ventaja Tipo de estudio
Kit de iniciación* Unos cuantos ensayos con un número bajo de muestras Inicio
Ensayos individuales Opción económica para la detección a pequeña escala de unos pocos
miARN o para la cuantificación de un alto número de muestras
Experimento de validación con unos pocos miARN
(experimento piloto/preliminar)
Paneles personalizados Los ensayos seleccionados personalizados y previamente pipeteados garantizan una alta reproducibilidad Detección específica o experimento de validación
Paneles específicos Selecciones predefinidas de ensayos dirigidos a determinadas áreas de investigación Detección específica             
Paneles miRNome Cubra todos los miARN importantes Detección de todo el genoma

Productos

Explore a fondo los seminarios web y otros recursos

Get great results, even from difficult sample types

Consiga los mejores resultados, incluso de muestras complejas

Los miARN circulantes en muestras de biopsias líquidas como suero/plasma, orina y exosomas tienen un gran potencial como biomarcadores de enfermedades. No obstante, estas muestras contienen cantidades pequeñas de ARN, altos niveles de inhibidores y son susceptibles a muchas variables preanalíticas, lo que dificulta la caracterización de miARN.

Nuestras guías de miARN de biofluidos ofrecen información y consejos de expertos para la detección y validación de biomarcadores en muestras de biofluidos. Conozca más sobre la preparación y manipulación optimizada de muestras, los métodos de control de calidad y las técnicas de detección de miARN para garantizar los mejores resultados en la caracterización de miARN de biofluidos.

miRCURY LNA funciona mejor en los estudios de miRQC

En el mayor análisis comparativo de miARN realizado hasta la fecha, Pieter Mestdagh y sus colegas compararon el rendimiento en áreas clave de las plataformas de caracterización de miARN disponibles en el mercado. La plataforma miRCURY LNA fue la única con rendimiento superior en todas las áreas, combinando tanto alta sensibilidad como especificidad. Acceda al artículo aquí.

miRCURY LNA performs best in miRQC study
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