Wählen Sie das richtige Enzym für sauberere Proben und schnellere Bearbeitung
Reagenzien- und Reaktantenrückstände können nachgeschaltete Prozesse beeinträchtigen. Verwenden Sie die richtige Enzymvorbereitung, um Ihre Proben vor dem nächsten Schritt aufzureinigen. Beschleunigen und optimieren Sie Amplifikation und Transkription mit einigen nicht ganz so geheimen Zusatzstoffen.
Enzyme für die Spaltung und Entfernung von Reagenzrückständen
Die enzymatische Aufreinigung von DNA-Proben mit Exonuklease I, DNase I, RNase A, Proteinase K und anderen Nukleasen und Proteasen entfernt Rückstände von Primern, Nukleotiden und Enzymen als Vorbereitung für SNP-Analyse, Next Generation Sequencing, Sanger-DNA-Sequenzierung, Bioprozessierung und andere nachgelagerten Verfahren.
Proteinase K ist eine Endopeptidase mit breitem Einsatzspektrum, die häufig für den Verdau von Proteinen, einschließlich DNasen und RNasen, eingesetzt wird. Ein Verdauschritt mit dem Enzym kommt routinemäßig bei der Nukleinsäurepräparation zum Einsatz. Die Integrität der isolierten DNA oder RNA wird dabei nicht beeinträchtigt. Proteinase K ist unter einer Vielzahl an Reaktionsbedingungen aktiv, unter anderem bei erhöhten Temperaturen und in Anwesenheit von SDS.
Proteinase K NGS Grade eignet sich selbst für anspruchsvollste Applikationen wie die Vorbereitung von Nukleinsäuren für das Next Generation Sequencing. Die umfassende Aufreinigung liefert ein hochqualitatives Enzymprodukt mit gesteigerter spezifischer Aktivität, signifikant erhöhter Löslichkeit (2,5-fach) und bemerkenswerter Reinheit mit einem DNA-Gehalt ≤ 0,1 pg/mg. Proteinase K NGS Grade ist frei von Exonukleasen, Endonukleasen und Ribonukleasen.
Das TAGZyme DAPase-Enzym und das TAGZyme-System werden für die Entfernung von His-Tags bei Proteinen, die einen intrinsischen DAPase-Stopppunkt enthalten (exprimiert mit dem TAGZyme pQE-2-Vektor), sowie bei Proteinen mit eingefügtem Glutamin-Stopppunkt verwendet.
Für die Spaltung und Entfernung von Reagenzrückständen ist ein umfassendes Angebot an Housekeeping-Enzymen verfügbar.
Enzyme zur Verbesserung der Ausbeute
Eine Verbesserung von PCR-Ausbeute und Template-Qualität kann durch den Einsatz von Proteinen, die PCR-Inhibitoren neutralisieren, sowie durch Zugabe spezialisierter DNA-bindender Proteine zu Amplifikations- und Sequenzierungsreaktionen erreicht werden. Das DNA-bindende Protein, Gen-32-Protein des Bakteriophagen T4 (T4gp32), steigert die PCR-Amplifikationseffizienz bei einer Reihe verschiedener Templates. Darüber hinaus erhöht das single stranded DNA-binding protein aus E. coli (SSB) in DNA-Sequenzierungsreaktionen die Auflösung der Sequenzierungsläufe.
Eine gesteigerte Rate der In-vitro-Transkription wird durch Behandlung mit anorganischen Pyrophosphaten ermöglicht, einer essenziellen Komponente von Reaktionen für die RNA-Präparation. Dieses Enzym spaltet Pyrophosphat in zwei Phosphatmoleküle und verhindert, dass Pyrophosphat mit Magnesium ausfällt.
* Diese hochgradig exergone Reaktion kann an ungünstige biochemische Transformationen gekoppelt werden, um diese Transformationen zum Abschluss zu bringen.
† Verschiebt das chemische Gleichgewicht in Richtung DNA-Synthese, indem es der Reaktion Pyrophosphat entzieht. Dieses Enzym kann nicht hitzeinaktiviert werden und behält selbst nach Inkubation bei 100 °C über mehrere Stunden seine volle Aktivität.
UDG-Strangspaltung
Die UDG-vermittelte Strangspaltung ist ein wichtiges Instrument in der molekularen Biotechnologie, das eine kontrollierte und ortsspezifische Spaltung von Einzel- und Doppelstrang-DNA ermöglicht, die chemisch oder enzymatisch mit einfachem oder mehrfachem Einbau von Desoxyuridin synthetisiert wurde.
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Häufig gestellte Fragen zur Reduzierung von Artefakten und Aufreinigung von Reaktionen
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