dPCR LNA Mutation Assays

用于检测与癌和肿瘤发生有关的特定 DNA 序列突变

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专家定制检测设计
所有困难工作交给我们来完成。获得专家设计的定制单一或多重 dPCR 和 PCR 检测。

dPCR LNA Mutation Assay (200)

Cat. No. / ID:   250200

单管装即用型 30x 浓缩检测,可选 FAM + HEX 或 Atto 550 + ROX 检测染料;可运行200 个 40 µL的 dPCR 反应
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检测方案Kit
dPCR LNA Mutation Assay
QIAcuity MasterMix (2x1mL)
反应
200
1000
dPCR LNA Mutation Assays 旨在用于分子生物学应用。这些产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。
专家定制检测设计
所有困难工作交给我们来完成。获得专家设计的定制单一或多重 dPCR 和 PCR 检测。

特点

  • 双重检测设计,可检测突变型及野生型序列
  • 可选 FAM + HEX 或 Atto 550 + ROX 荧光染料组合
  • LNA 增强的引物和探针,可提高检测的特异性和灵敏度
  • 经过湿性实验室测试的 dPCR 检测,有 200 多个靶标供选
  • 适合与循环肿瘤 DNA、液体活检、FFPE 和其他组织样本一起使用
  • 旨在与 QIAcuity MasterMix 一起使用

产品详情

dPCR LNA Mutation Assays 可让您检测从综合采编数据库(如 COSMIC)中选出的个体序列突变。检测设计经过 dPCR 湿性实验室测试,可提供相关结果数据。在 QIAcuity Nanoplate 的一个孔中,靶突变在野生型背景中的检测灵敏度为 0.1%。通过将反应分入到多个孔中并进行合并分析,您可获得甚至更高的灵敏度。有两种不同的荧光染料组合供选,从而可让您在一个孔中检测突变和野生型序列以及对两个靶突变进行多重分析。

这些检测以管装形式提供,为 30x 浓缩检测试剂,由两个针对突变和野生型的引物和探针组成。dPCR LNA Mutation Assays 旨在与 QIAcuity MasterMix 一起使用。

 

绩效

对于罕见事件/序列变体的检测和绝对定量,dPCR 可提供更高的灵敏度,从而可检出以 0.1% 存在于野生型基因组 DNA 背景中的突变。分散化使得特定于靶标的浓度得到提高。终点扩增和超噪声检测及二元性阳性/阴性靶标判读可让您实现精确定量,且不依赖于扩增性能(例如由 PCR 抑制物引起)。

原理

dPCR LNA Mutation Assays 是双重、基于水解探针的检测,可鉴定是否存在特定突变序列。一个探针检测的是突变型等位基因,另一个探针检测的是野生型等位基因。在检测野生型背景中的突变 DNA 序列方面,数字 PCR 是最灵敏和最可靠的方法。dPCR LNA Mutation Assays 使用了 LNA 增强型引物和探针,可提高检测特异性和灵敏度,从而能够在单个纳米板孔中检测到以 0.1% 存在于野生型基因组 DNA 背景中的突变。

两种荧光检测选项可让您在一个孔中对两个突变靶标进行多重分析。在产品配置期间,可选择 FAM + HEX 或 Atto 550 + ROX 进行突变 + 野生型检测。

程序

要构建 dPCR 实验,将一份(从新鲜、冰冻或固定样本中分离出来的)基因组 DNA 样本等分试样添加到 QIAcuity MasterMix 预混液和相关 dPCR LNA Mutation PCR Assay 中。每个反应在一个或多个 QIAcuity Nanoplate 孔中进行分析。

加载并密封纳米板后,在 QIAcuity 仪器上选择推荐的循环程序。以每微升拷贝数表示的结果显示在 QIAcuity Software Suite 的绝对定量分析类型中。计算出的突变靶标分数丰度及相应的数据图表可在分析类型突变分析中获得。

应用

dPCR LNA Mutation PCR Assays 非常适合用于快速、准确地鉴定从新鲜、冰冻或固定样本中分离的 DNA 中是否存在单个特定序列突变。

辅助数据和图表

资源

用户使用手册 (1)
快速启动实验方案 (1)
安全数据表 (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
应用说明 (1)
Digital PCR (dPCR) is a powerful technique that detects and quantifies ultra-rare mutations in a high background of wild-type cfDNA down to 0.1% variant allele frequency. Here, we describe end-to-end manual and automated workflows that enable accurate detection and absolute quantification of ultra-rare PIK3CA variants in cfDNA using the QIAcuity Digital PCR System.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)