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Cat. No. / ID: 210220
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Q-Solution Kit 专为优化具有挑战性的 qPCR 和 dPCR 反应条件而设计。试剂盒中包含 5 倍 Q-Solution 和 25 mM MgCl2,可单独使用,也可组合使用。如有必要,您可以滴定两种溶液的浓度范围。
尽量降低 PCR 抑制剂的影响
Q-Solution 是一种创新的多功能 PCR 添加剂,可与任何 QIAcuity 预混液一起使用。Q-Solution 的特殊特性可减轻残留酒精、肝素、腐植酸等抑制剂或其他可能影响 PCR 反应的关键试剂的携带污染(图 1)。
增强引物结合亲和力
如果您怀疑引物或探针结合力弱导致 PCR 性能不佳,可尝试在 PCR 反应中加入 MgCl2。
与多种 dPCR 和 qPCR 预混液兼容
在任何 dPCR、终点 PCR 或 qPCR 反应中都可能存在困难的 PCR 条件,从而实现通量、可重复性和灵敏度。无论您的应用是什么,数据都表明 Q-Solution Kit 可以增强 dPCR、终点 PCR 和 qPCR 反应,在某些情况下,只需简单滴定两种组分即可。
通过降低 DNA 的熔化温度,Q-Solution 可以克服高 GC 含量或二级结构复杂的 DNA 带来的困难,如腺相关病毒(Adeno-Associated Virus,AAV)基因组中的 DNA。该试剂盒还能提高存在抑制剂时的 PCR 效率。可选择添加 MgCl2,以防止 EDTA 等螯合剂导致的 PCR 失败。作为 DNA 聚合酶的必需辅助因子,MgCl2 可以稳定双链 DNA 结构,包括引物和模板之间形成的结构。有关纳米微孔板中 dPCR 反应的原理说明,请参见此处。
该方案简单,可在任何使用 QIAcuity Digital PCR System 的实验室中进行。根据用户手册中的说明,用户可以照常准备反应混合液,并按照“快速启动方案”中所述加入 Q-Solution 和 MgCl2。用移液器将混合液移入纳米微孔板。我们建议在首次使用前滴定 Q-Solution 和 MgCl2,以找到特定反应设置的最佳浓度。
Q-Solution Kit 非常适合 QIAcuity 上的各种 dPCR 反应以及终点 PCR 和 qPCR 反应。有关更多应用示例,请查看“资源”部分中的应用说明。
当反应中含有 3.5% 或 5% 的乙醇时,用 dPCR Mutation Assay BRAF 476 Human 定量野生型 BRAF 基因座的 QIAacuity Probe PCR Kit 反应会受到抑制,如 1D 散点图中的 U 形和相对于不含乙醇的对照反应的定量所示。