Qproteome FFPE Tissue Kit – Protein Extraction
从福尔马林固定、石蜡包埋组织中高效抽提全长蛋白
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Qproteome FFPE Tissue Kit采用创新的专有试剂,逆转福尔马林固定导致的交联,并提供全长蛋白用于后续分析。
作为组织学样本制备的标准方法,每年都有几百万的福尔马林固定、石蜡包埋样品被分类并存档。以前,受到组织化学技术的限制,对其研究有限。Qproteome FFPE Tissue Kit打破了这一瓶颈,可高效提取适用于Western印迹、蛋白芯片和质谱分析的全长蛋白,为蛋白质组研究和蛋白表达分析提供了珍贵的资源。第一次,研究人员可在存档福尔马林固定、石蜡包埋组织中研究蛋白和表达路径。可同时应用Probing blots或包含多个抗体的芯片研究蛋白,获得多个蛋白表达谱的详细信息,如信号传导通路。
福尔马林固定会产生化学交联,稳定用于组织研究的样本,但会使后续的蛋白分离(如:通过SDS-PAGE)无法进行。Qproteome FFPE Tissue Kit应用创新的专有化学试剂反转交联过程,确保全长蛋白可应用western印迹或蛋白芯片以及后续的免疫学检测进行分析(参见" Compare FFPE Tissue Samples at the Protein Level")。
将切片脱蜡并在Extraction Buffer孵育中,离心后收集上清获得蛋白质。回收所得的蛋白质和常规蛋白质一样,可直接与样本缓冲液混合,并上样到SDS-PAGE胶上。无需其他昂贵的仪器或处理过程。
Qproteome FFPE Tissue Kit提供了特殊的分析方法,以分析病理学状态已确定的样本,但对其精确的蛋白修饰还未完全了解。这些从一系列处理和不同研究组先代那里传下来的样品,为比较蛋白质组学和生物标记研究提供了丰富的资源。
Protein extraction enables comparison of histological samples on the protein level. Two breast cancer biopsy samples, both scored 2+ for the receptor tyrosine kinase HER2 by immunohistochemistry, were processed using the Qproteome FFPE Tissue Kit and analyzed by protein lysate array and western blotting. In sample B, HER2 gene amplification was confirmed by FISH (data not shown). The housekeeping gene β-actin was analyzed as a control. Data kindly provided by Karl-Friedrich Becker and Christina Schott, Technical University of Munich, Germany.
Features | Specifications |
---|---|
Applications | SDS-PAGE, Western-Blot, mass spectrometry |
Binding capacity/yield | 20–80 µg |
Start material | Formalin-fixed tissues |
Sample size | 2–3 x 100 mm2 per prep |
Fractions isolated | One fraction |