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miRCURY Probe PCR Kit 含有高性能 PCR Mastermix,专门设计用于使用 miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assay 和组合进行基于探针的 miRNA 定量。使用 miRCURY LNA RT Kit 执行逆转录酶。miRCURY Probe PCR Kit 经过优化,可与任何实时循环仪配合使用。
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miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统是一种突破性的 miRNA 检测和定量系统,它利用 LNA 技术实现了新的引物和探针设计,大大提高了检测的特异性和灵敏度。一方面,LNA 增强引物和探针具有更高的 Tm,从而提高了反应的严格性,并能区分只有一个核苷酸差异的 miRNA,而不受 AU 含量的影响。另一方面,前向引物和探针具有 miRNA 特异性,比其他检测系统更短(见 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统概览)。因此,检测设计更加灵活,LNA 的巧妙放置大大提高了检测的特异性和灵敏度。事实上,该系统无需预扩增就能对目标 miRNA 进行低至 1 个拷贝的定量分析。此外,该系统的工作流程快速而简单,从检测 RNA 到获得数据只需 2 个小时,而且其卓越的检测稳健性允许室温设置和延迟运行,从而提高了灵活性和自动化使用率(见 反应稳定性和设置稳健性)。QuantiNova 酶可确保技术和生物重复品之间的首次尝试结果具有高度的可重复性(见 新型 QuantiNova 热启动机制的原理)。
该试剂盒操作简单,只需 2 小时,省时省力。通过使用通用转录和优化的 RT-PCR 方案,与其他解决方案相比,程序大大简化。此外,RT 步骤中生成的 cDNA 可用于整个 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统,让您可以根据研究需要从面板无缝过渡到检测,节省样品材料和时间。移液步骤减少到最低数量,还最大限度上减少了技术差异。这种简化的工作流程与符合 ISO 标准的化验生产相结合(见 批量间高度一致性),可以实现极高的日间和现场间重复性。
miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统可通过 real-time PCR 进行灵敏、特异的 miRNA 定量和分析。检测基于淬灭基团标记的水解探针。该系统涵盖了将 miRNA 转化为 cDNA 以及随后对 miRNA 进行 qPCR 检测的所有步骤。miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assay 和组合已使用 QuantiNova Probe Master Mix 进行了验证;使用其他试剂进行 qPCR 会影响结果。
RNA Spike-In Kit 可对 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 实验的 RNA 分离、cDNA 合成和 PCR 扩增步骤进行质量控制,这样您就能在实验过程的早期发现任何劣质样品,从而节省时间和试剂。该试剂盒包括 UniSp2、UniSp4 和 UniSp5 Spike-in Template Mix、以及 cel-miR-39-3p RNA Spike-in Template。
适用于两种检测系统的通用逆转录试剂盒。miRCURY LNA RT Kit 既适用于使用 SYBR® Green 进行检测的 miRCURY LNA miRNA PCR 系统,也适用于基于探针的 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统。该试剂盒包括两种系统专用的反应缓冲液和所有必要的试剂,可在单个反应步骤中快速方便地进行 miRNA 多腺苷酸化和逆转录。
该试剂盒包含高性能 QuantiNova Probe Master Mix 和 miRCURY Probe PCR 通用反向引物。该化学品与 miRCURY LNA miRNA Probe {CR Assay 或 miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panel 结合使用,可通过定量 real-time PCR 检测 miRNA。
这些引物和探针检测试剂盒使用 miRNA 特异性水解探针和 miRNA 特异性正向引物,利用 miRBase 提供的最新序列信息检测成熟的 miRNA。miRCURY Probe Universal Reverse Primer 包含在 miRCURY Probe PCR Kit 中。
即用、预先设计、一次性 PCR 组合,用于快速分析成熟的 miRNA,侧重于 miRNome、特定途径、血清/血浆等特定样本类型,或用户设计的定制组合。
这款免费、直观的网络分析工具通过简易向导逐步指导您对数据进行归一化和分析,并生成可供发表的数据。
第一步是逆转录反应,这是一个易于操作的单管反应。包括 miRNA 在内的总 RNA 用作起始材料,得到的 cDNA 用 LNA 增强探针和引物进行 real-time PCR 扩增,以检测成熟的 miRNA。这样就能直接进行 miRNA 定量和分析,任何拥有 real-time PCR 循环器的实验室都能使用。
miRCURY Probe PCR Kit 是 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统的一部分,用于:
QuantiNova DNA 聚合酶被 QuantiNova Antibody 和 QuantiNova Guard 保持在非活性状态,直到最初的热激活步骤。