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miRCURY LNA RT Kit 可在一个反应步骤中快速、方便地进行 miRNA 多腺苷酸化和逆转录。与需要特异性 miRNA 第一链合成的系统相比,使用一个通用 RT 反应作为后续 PCR 扩增的模板大大简化了操作步骤,增加了便利性,节省了时间。该试剂盒专为与两套 miRCURY LNA miRNA PCR 系统配合使用而设计,使用 SYBR Green 或 LNA 增强水解探针作为检测方法。试剂盒包含两个独立的反应缓冲管,分别用于不同的 PCR 检测方法。
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每个 RNA 样品使用一个通用的逆转录反应,不仅能节省试剂和珍贵的样品,还能节省时间。miRCURY LNA RT Kit 用于 miRCURY LNA miRNA PCR 系统的第一链 cDNA 合成,采用 SYBR Green 进行检测(见 miRCURY LNA miRNA PCR 系统概览)或 LNA 增强的 miRNA 特异性水解探针(见 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统概览)。试剂盒包括每个系统专用的反应缓冲液。miRNA 检测试剂盒和组合是系统专用的。
通用逆转录结合 LNA 增强引物和 Tm 归一化 PCR 组分,可从低至 1 pg 的总 RNA 中准确可靠地定量单个 miRNA(见图从低至 1 pg 的总 RNA 初始材料中准确定量)。miRCURY LNA 具有极高的灵敏度和极低的背景,无需预扩增就能准确定量极低水平的 miRNA。因此,miRCURY LNA miRNA PCR 系统和 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统适用于所有类型的样品,尤其是 RNA 含量低的样品,如血清、血浆和其他生物流体。
miRCURY LNA RT Kit 是 miRCURY LNA miRNA PCR 系统的第一步,使用 SYBR Green 或水解探针进行检测。该试剂盒操作简单,只需 2 小时,省时省力。通过使用通用的逆转录和优化的 RT-PCR 方案,与其他解决方案相比,程序大大简化。此外,RT 步骤中生成的 cDNA 可用于您所选的系统,让您可以根据研究需要从面板无缝过渡到检测,并节省样品材料和时间。移液步骤减少到最低数量,还最大限度上减少了技术差异。这种简化的工作流程与符合 ISO 标准的化验生产相结合,可以实现极高的日间和现场间重现性。
miRCURY LNA RT Kit 适用于两种 miRCURY LNA miRNA PCR 系统,SYBR Green 或水解探针检测方法。该试剂盒包括两种系统专用的反应缓冲液和所有必要的试剂,可在单个反应步骤中快速方便地进行 miRNA 多腺苷酸化和逆转录。与需要特异性 miRNA 第一链合成的系统相比,使用单一的通用 RT 反应作为后续 PCR 扩增的模板大大简化了程序(见图通用逆转录步骤的好处)。此外,RT 步骤中生成的 cDNA 可用于您所选的系统,让您可以根据研究需要从面板无缝过渡到检测,并节省样品材料和时间。试剂盒中的 UniSp6 RNA尖峰可与对照检测 – UniSp6 miRCURY LNA miRNA PCR Assay – 一起使用,作为逆转录阳性对照和/或 miRNA PCR 组合中的板间校准物。
该系统的结构包括 SYBR Green 检测和两种 LNA 增强型 miRNA 特异引物,具有无与伦比的性能(见 miRCURY LNA miRNA PCR 系统概览)。
独特的 LNA 增强 miRNA 特异性水解探针与 LNA 增强型 miRNA 特异性正向引物相结合,可获得高度特异和灵敏的真实信号(见 miRCURY LNA miRNA Probe PCR 系统概览)。
逆转录反应作为单管反应很容易进行。总 RNA(包括 miRNA)用作起始材料,反应过程包括在 40–42°C 温度下孵育 1 小时,然后在 95°C 温度下短暂孵育,进行灭活步骤。
miRCURY LNA RT Kit 是 miRCURY LNA miRNA PCR 和 Probe PCR 系统的一部分,用于: