Ultrapure 100 Buffer Set
用于配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合
用于配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合
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Ultrapure 100 Buffer Set是配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合,可轻松高效纯化至多100 mg不含内毒素(<0.1 EU/µg DNA)的质粒DNA。其使用QIAGEN阴离子交换技术,并具有内毒素去除技术,产物DNA纯度很高。
Ultrapure 100 Buffer Set提供的用于交换树脂的缓冲液,经验证其所含内毒素含量均低于10 EU/ml(BioWhittaker Kinetic-QCLTest验证)。
纯化的质粒DNA中的内毒素污染水平取决于纯化方式。硅胶纯化的DNA表现出极高的内毒素污染水平。使用QIAGEN、QIAfilter和HiSpeed的质粒DNA纯化试剂盒,以及通过两次CsCl超速离心所制备的DNA纯度很高,内毒素污染水平相对较低。QIAGEN Ultrapure 100 system含有内置的内毒素去除步骤,纯化得到的质粒DNA的内毒素含量低于0.1 EU/µg。
内毒素,也被称为脂多糖或LPS,是大肠杆菌等革兰氏阴性菌细胞膜的组成成分之一(参见" Bacterial cell wall")。在质粒纯化的裂解过程中,内毒素释放出来,对于内毒素敏感的细胞系,可严重降低其转染效率。另外内毒素会与DNA竞争转染试剂,影响质粒DNA的摄取量。内毒素还会诱导巨噬细胞和B细胞等免疫细胞发生非特异性免疫活化反应,导致对转染结果的错误解读,包括诱导合成蛋白质和脂质,如IL-1和前列腺素。总的来说,内毒素在转染反应中是不可控变量,影响反应结果及结果的重复性,使结果难以比较和分析。在基因治疗研究中,内毒素会导致内毒素休克综合症和补体级联反应,影响研究结果。
Ultrapure 100 Buffer Set配合Ultrapure 500 Resin纯化的质粒DNA,其纯度相当于两次CsCl梯度离心所纯化的DNA的纯度。简单的内毒素去除步骤可确保纯化的DNA所含内毒素不超过0.1 EU/µg DNA。纯化的DNA适用于多种敏感的应用,包括: