EGFR Pyro Kit
基于序列定量分析EGFR基因中的突变
基于序列定量分析EGFR基因中的突变
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EGFR Pyro Kit是用于检测EGFR基因中突变和缺失的分子检测试剂盒。该试剂盒包含扩增EGFR基因所需的引物和试剂,以及外加缓冲液、引物和试剂,用于在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上采用焦磷酸测序技术实时定量检测突变。
EGFR Pyro Kit用于实时定量检测人EGFR基因编码子719、768、790、858和861的突变,以及外显子19的缺失和复杂突变,在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上采用焦磷酸测序技术进行分析。EGFR基因可编码表皮生长因子受体(EGFR)蛋白。EGFR基因酪氨酸激酶结构域的突变能够促进肿瘤的生长和增殖。在美国有近10%的非小细胞肺癌患者发现了EGFR基因突变,在东亚该比例达到35%。除此之外,6%的脑瘤患者也发现了EGFR突变。
可检测以下种类的突变:
使用针对外显子18、19、20和21的引物对4个片段PCR扩增后,将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上设置程序和运行程序对样品进行分析。推荐使用EGFR Plug-in Report进行分析。该报告确保使用正确的LODs和分析的不同序列可自动检测所有突变和缺失。也可在PyroMark Q24实时定量焦磷酸序列分析仪上使用其他分析工具进行分析(参见" Pyrogram trace of a normal genotype in codon 719"," Pyrogram trace of a normal genotype in codon 768"," Pyrogram trace of a normal genotype in exon 19"和" Pyrogram trace of a GGAATTAAGAGAAGC deletion in exon 19")。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测外显子19的各种缺失和其他外显子的稀有突变。
可检测以下种类的突变: