Cat. No. / ID: 63181
DyeEx Kit 提供了离心柱或 96 孔板,使用凝胶过滤技术去除测序反应(包括用于 Sanger 测序的反应)中的染料终止物。测序反应被加载到预先水化的凝胶过滤材料上。经过短暂的离心步骤后,即可将反应装入毛细管测序仪。未结合的染料终止物会保留在凝胶基质中。
DyeEx Kit 可清除 10–20µl 测序反应中任何类型的染料终止物,包括 BigDye、dRhodamine 染料、Rhodamine、DYEnamic ET 和 WellRED 终止物。纯化后,测序反应可在任何毛细管测序仪上进行分离。我们推荐使用优化方案的 DyeEx 96 Kit。
高质量测序
DyeEx Kit 经过优化,可快速方便地去除染料终止物,从而获得高质量的测序结果。相比之下,用乙醇沉淀法纯化测序反应非常耗时(见表“DyeEx 程序与乙醇沉淀法的比较”)且效率低下。如果不能有效去除染料终止物,往往会导致测序数据中出现染料斑点,使序列片段无法读取。使用 DyeEx Kit 进行测序反应纯化可确保加载到测序仪器上的反应不含染料终止物。由于没有染料斑点,整个序列都能轻松读取(见图 “卓越的测序结果”)。信号强度高,因此读数很长(见图 “长读数序列”)。
DyeEx 程序与乙醇沉淀法的比较
程序 | DyeEx 2.0 Spin | DyeEx 96 | 乙醇 沉淀法 |
---|---|---|---|
所需时间* (12 个样本,离心规格) | 10 分钟 | 不适用 | >45 分钟 |
所需时间*† (微孔板格式适用于 96 个样本) | 不适用 | 18 分钟 | >60 分钟 |
处理 | 即用型 离心规格 | 即用型 | 多个 移液步骤 |
序列质量 | ++ | ++ | + |
N.A.:不适用
* 不包括凝胶加载前干燥样本所需的时间(如适用)。
†使用标准方案。
DyeEx 程序使用凝胶过滤法快速有效地去除测序反应中未结合的终止物。去除染料终止物对于防止未结合的染料终止物干扰测序结果分析非常重要。DyeEx 凝胶过滤材料由具有均匀孔隙的球体组成,可根据分子量分离分子。当测序反应混合物进入 DyeEx 柱时,染料终止物会扩散到孔中,并留存在凝胶过滤材料中,而标记的 DNA 片段则会被排除,并在流川液中回收(见图 “DyeEx 分离原理”)。
使用 DyeEx Kit 可以快速去除染料终止物,因为操作步骤非常简单(见流程图 “DyeEx 2.0 Spin 程序”和 ”DyeEx 96 Kit 程序”)。快速离心步骤可去除离心柱或孔中存储的缓冲液,然后加载测序样本,再进行第二次离心步骤去除未结合的染料终止物。然后样本就可以直接加载到毛细管测序仪上,也可以烘干、重新溶解并加载到测序凝胶上。
DyeEx Kit 可清除 10–20µl 测序反应中任何类型的染料终止物,包括 BigDye、dRhodamine 染料、Rhodamine、DYEnamic ET 和 WellRED 终止物。纯化后,测序反应可在任何毛细管测序仪上进行分离。信号强度高,因此读数很长。
DyeEx 特点
特点 | DyeEx 2.0 Spin Kit 和 DyeEx 96 Kit |
---|---|
结合能力 | 10–20 µl |
洗脱体积 | 10–20 µl |
对于 DyeEx Kit: | 终止物去除,ABI PRISM 377、373、310、3100 或 3700、MegaBACE 1000 或 CEQ 2000 测序仪 |
格式 | 试管 (DyeEx 2.0 Spin Kit)、96 孔板 (DyeEx 96 Kit) |
处理 | 手动 |
去除 <10mer 17–40mer 染料终止物蛋白质 | 染料终止物 |
样本类型 | 测序反应 |
技术 | 凝胶过滤 |
DyeEx Kit 旨在用于分子生物学应用。这些产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。