选择合适的酶产品以得到更纯净的样本和实现更快的处理
残留的试剂和反应物会阻碍下游过程。在进行下一步之前,首先使用正确的酶制剂清理样本。使用一些不算秘密的添加剂来加速并增强扩增和转录。
用于剪切和清理残留试剂的酶产品
在进行 SNP 分析、下一代测序、Sanger DNA 测序、生物加工或其他下游操作流程之前,使用 Exonuclease I、DNase I、RNase A、Proteinase K 以及其他核酸酶和蛋白酶对 DNA 样本进行酶法清理 ,以去除残留的引物、核苷酸和酶。
Proteinase K 是一种广谱性内肽酶,广泛用于包括 DNase 和 RNase 在内的蛋白质的消化。在核酸制备过程中会常规应用酶的消化步骤,而不影响提取的 DNA 或 RNA 的完整性。Proteinase K 在各种反应条件下都有活性,包括高温和存在 SDS 时。
NGS 级 Proteinase K 可用于要求最苛刻的应用,包括为下一代测序制备核酸。广泛纯化产生高品质的酶产物,具有提高的比活性、显著提高的溶解度(2.5 倍)和显著的纯度,DNA 含量 ≤0.1 pg/mg。NGS 级 Proteinase K 不含核酸外切酶、核酸内切酶和核糖核酸酶。
TAGZyme DAPase 酶 和 TAGZyme 系统用于从含有固有 DAPase 终止点的蛋白质(使用 TAGZyme pQE-2 载体表达)或含有工程化谷氨酰胺终止点的蛋白质中去除 His 标签。
可提供一系列全套的管家酶用于剪切和清理残留试剂。
用于提高产率的酶产品
通过使用抵消 PCR 抑制剂的蛋白质以及通过将专门的 DNA 结合蛋白添加到扩增和测序反应体系中,可以提高 PCR 产率和模板质量。 作为 DNA 结合蛋白,来自 T4 噬菌体的基因 32 编码蛋白 (T4gp32) 可以使用多种不同的模板提高 PCR 扩增效率。此外,在 DNA 测序反应中使用 E. coli 单链 DNA 结合蛋白 (SSB) 可以提高测序运行的分辨率。
通过使用无机焦磷酸酶(RNA 制备反应体系中的一种重要组分)处理可以提高体外转录速率。这种酶将焦磷酸盐分解成两个磷酸盐分子,防止焦磷酸盐与镁发生沉淀。
UDG 链剪切
UDG 介导的链剪切是分子生物技术领域的一种重要工具,允许通过脱氧尿苷的单次或多次掺入实现对化学或酶法合成的单链和双链 DNA 的受控和位点特异性剪切。
了解用于酶法清理和提高产率的重点酶产品
减少人为产物和反应清理常见问答
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