QIAGEN OneStep RT-PCR Kit
用于灵敏、特异性的一步法RT-PCR
用于灵敏、特异性的一步法RT-PCR
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit可对多种RNA模板进行简单、灵敏的一步式RT-PCR。
QIAGEN OneStep RT-PCR Enzyme Mix含有为逆转录和PCR反应特别设计的酶。独特组合的Omniscript和Sensiscrip逆转录酶对RNA模板有高度亲和性,确保RNA逆转录的灵敏度达到1 pg到2 µg。逆转录完成后,升温至95°C,15分钟,活化HotStarTaq DNA Polymerase同时使逆转录酶失活。这种方法可减少引物二聚体等非特异性扩增产物的生成,并减少背景的影响,确保RT-PCR的高灵敏度和可重复性。
引物的最佳退火温度取决于碱基对的组成(如A、T、G、C核苷酸的比例)、引物的浓度和反应的离子环境。QIAGEN PCR Buffers含有K+和NH4+,使用该缓冲液可在很宽的温度范围内增加特异性PCR产物的产量(参见" Increased specific primer annealing")。其原理是破坏非特异性结合的引物对,提供更加可靠的反应环境,减少繁琐的温度优化过程。相反,如使用仅含K+的PCR或一步式RT-PCR缓冲液,PCR最佳退火温度的范围较窄,可靠性较差。
QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer专为提高逆转录和PCR扩增的效率而设计。该缓冲液含有新型辅助剂,可防止逆转录酶对PCR扩增的抑制,而这是一步式RT-PCR中常见的问题。该缓冲液确保在较大的温度范围和Mg2+浓度范围内,引物与模板特异性结合,可对多种RNA模板进行高效的RT-PCR扩增。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有Q-Solution,这是可修饰核酸熔解行为的新型辅助剂。Q-Solution可促进高GC含量或含较多二级结构的模板的逆转录和扩增。 使用Q-Solution可简化复杂模板RT-PCR的优化过程。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有您所需的所有试剂,可进行快速、简便的RT-PCR,用于多种灵敏的应用(见表)。
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit 组分 | 特点 |
---|---|
HotStarTaq DNA Polymerase | 高度特异性产物 |
Sensiscript and Omniscript Reverse Transcriptases | RNA初始量的范围大 (1 pg–2 µg) 高灵敏度 |
OneStep RT-PCR Buffer | 无需优化 反转录酶不会抑制PCR 抑制RNases |
Q-Solution | 促进GC含量高的模板的扩增 |
使用QIAGEN OneStep RT-PCR Kit可快速、简单的进行RT-PCR反应体系构建。无论是何种应用,即无论是病毒检测、分子诊断研究还是基因表达,您只需将所有试剂在一个离心管中混合即可开始PCR扩增(参见" OneStep RT-PCR procedure")。反应混合液含有逆转录和PCR反应所需的所有试剂,无需添加其他试剂即可开始反应(参见下表)。
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit适用于RT-PCR分析,包括:
The QIAGEN OneStep RT-PCR Kit allows fast and easy RT-PCR setup. Whatever the application — virus detection, molecular diagnostics research, or gene expression analysis— just mix all components together in one tube and start the thermal-cycler program. The reaction mixture contains all of the reagents required for both reverse transcription and PCR; nothing needs to be added once the reaction has been started.
Features | Specifications |
---|---|
Applications | Gene-expression analysis, virus detection |
Mastermix | No |
Enzyme activity | Reverse transcription, 5' -> 3' exonuclease activity |
Reaction type | One-step RT-PCR |
Real-time or endpoint | Endpoint |
Sample/target type | RNA template |
Single or multiplex | Single |
With/without hotstart | With hotstart |