IDH1/2 RGQ PCR Kit

利用IDH1/2 RGQ PCR Kit中的试剂可完成9个独立的扩增反应，检测12种突变：

• IDH1基因的132和100密码子及IDH2基因的172密码子的3次总扩增反应
• IDH1基因的132和100密码子及IDH2基因的172密码子的3次突变扩增反应
• IDH1 R132H、IDH1 R132C和IDH2 R172K突变的3次突变特异性扩增反应

总反应混合物

Total Primers and Probe Mixes（PPM-Total）使用引物和探针扩增突变型和野生型目标序列。

突变检测反应混合物

突变检测引物和探针混合物将引物与探针相结合，同时扩增突变型和野生型目标序列，此为还有一个核苷酸，3'端添加了磷酸基团，以防止延伸（PCR发夹技术），它可以特异性地结合野生型目标序列。

当PCR模板包含野生型序列时，因具有更高的亲合力，3'-磷酸寡核苷酸相比PCR引物的结合更具优势。DNA聚合酶几乎无延伸，且几乎未观察到扩增。

当存在突变序列时，PCR引物结合相比3'-磷酸寡核苷酸结合更具优势，扩增将继续。

突变鉴定反应混合物

ARMS（Amplification Refractory Mutation System）利用DNA聚合酶鉴别PCR引物的3'端是否匹配，实现等位基因特异性的扩增。

当PCR引物完全匹配时，扩增效率最高。当3'碱基不匹配时，仅出现低水平的背景扩增。