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AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit可从同一细胞或组织样本中同时纯化DNA、RNA和蛋白质。该试剂盒可与Allprotect Tissue Reagent配合使用,此试剂可迅速稳定组织样本中的DNA、RNA和蛋白质,无需冷冻即可长期保存。可使用TissueRuptor或TissueLyser高效破碎样本。
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit使系统生物学研究中样本的制备过程标准化。DNA、RNA和蛋白质为同一来源,减少了从不同样本中制备这些分析物时引起的差异。使用此试剂盒无需在纯化前将样本分为三份,因此DNA、RNA和蛋白质的产量较高。此外,纯化过程无需使用苯酚和丙酮等有机溶剂。
细胞或组织样本首先在Buffer RLT中裂解并匀浆,使得DNA酶、RNA酶和蛋白酶立刻失活,确保可纯化得到完整的DNA、RNA和蛋白质。用AllPrep DNA离心柱过滤裂解液。高盐缓冲液流过离心柱,基因组DNA可高效的选择性结合到柱上。洗脱之后即可得到纯化的即用型DNA。
在AllPrep DNA离心柱的流出液中加入乙醇,形成适宜RNA结合的条件。样本上样到RNeasy离心柱,总RNA与膜结合,污染物被去除。然后用不含RNA酶的纯水进行洗脱,得到高品质RNA。
Buffer APP是新型的水溶性蛋白沉淀溶液。将其加入到RNeasy离心柱的流出液中,然后离心得到蛋白质沉淀。用适合的溶液溶解完整的总蛋白质,可即用于下游应用。此试剂盒包含Buffer ALO,该缓冲液用于溶解蛋白沉淀,不影响SDS-PAGE操作(参见" AllPrep DNA/RNA/Protein procedure")。
AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit可从同一细胞或组织样本中同时纯化基因组DNA、总RNA和总蛋白质,因此使样本制备流程更加高效。该试剂盒纯化得到的总蛋白适用于SDS-PAGE和Western印迹。使用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit纯化得到的基因组DNA和总RNA在多种下游应用中表现出色,包括:
Features | Specifications |
---|---|
Applications | PCR, RT-PCR,real-time PCR, real-time RT-PCR, Southern-,Northern-,Western Blotting, Microarrays, Genotyping,1D and 2D gel electrophoresis |
Main sample type | Easy-to-lyse tissue or cells |
Elution volume | RNA: 30 - 50µl, DNA: 100 - 200µl |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | Total RNA, genomic DNA and western-grade proteins |
Format | Spin column |
Yield | varies, depends on sample type |
Time per run or per prep | 60 min |
Processing | Manual (centrifugation) |
Technology | Silica technology, Protein precipitation |
Sample amount | up to 30 mg tissue or 1 x 10e7 cells |