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DyeEx Kits는 스핀 컬럼 또는 96-well 플레이트 중 하나를 제공하며 겔 여과 기술을 사용하여 Sanger 염기서열 분석 반응을 포함한 염기서열 분석 반응에서 염료 종결자를 제거합니다. 염기서열 분석 반응물은 미리 수화된 겔 여과 재료에 로드됩니다. 짧은 원심분리 단계가 끝나면 반응물을 모세관 염기서열 분석기에 로드할 준비가 된 것입니다. 미삽입된 염료 종결자가 겔 매트릭스에 포획됩니다.
DyeEx Kits는 10~20µl 염기서열 분석 반응에서 BigDye, dRhodamine 염료, Rhodamine, DYEnamic ET, WellRED 종결자를 포함한 모든 유형의 염료 종결자를 제거합니다. 클린업 후, 모든 모세관 염기서열 분석기에서 염기서열 분석 반응물을 분리할 수 있습니다. 최적화된 프로토콜을 사용하는 DyeEx 96 Kit를 추천합니다.
고품질 염기서열 분석
DyeEx Kits는 염료 종결자를 빠르고 편리하게 제거하여 고품질 염기서열 분석 결과를 얻을 수 있도록 최적화되어 있습니다. 반면, 에탄올 침전에 의한 염기서열 분석 반응 클린업은 시간이 오래 걸리고(표 "DyeEx 절차 및 에탄올 침전 비교" 참조) 비효율적입니다. 염료 종결자를 효율적으로 제거하지 못하면 염료 블롭(blob)이 염기서열 분석 데이터에 나타나 염기서열 일부를 읽을 수 없게 되는 경우가 종종 있습니다. 염기서열 분석 반응 클린업에 DyeEx Kits를 사용하면 염기서열 분석 장비에 로드될 반응물에서 염료 종결자를 확실히 제거할 수 있습니다. 염료 블롭이 없으면 염기서열을 전체적으로 쉽게 판독할 수 있습니다(그림 "우수한 염기서열 분석 결과" 참조). 신호 강도가 높기 때문에 판독 길이가 길어집니다(그림 "긴 판독 염기서열" 참조).
DyeEx 절차 및 에탄올 침전 비교
절차 | DyeEx 2.0 Spin | DyeEx 96 | 에탄올 침전 |
---|---|---|---|
소요 시간* (샘플 12개, 스핀 형식) | 10분 | N.A. | >45분 |
소요 시간*† (96개 샘플용 마이크로플레이트 형식) | N.A. | 18분 | >60분 |
취급 | 바로 사용 가능한 스핀 형식 | 바로 사용 가능 | 여러 번의 피펫팅 단계 |
염기서열 품질 | ++ | ++ | + |
N.A.: 해당 사항 없음
* 겔 로딩 전 샘플을 건조시키는 데 필요한 시간은 포함되지 않습니다(해당되는 경우).
† 표준 프로토콜 사용.
DyeEx 절차는 겔 여과를 사용하여 염기서열 분석 반응에서 미삽입된 종결자를 빠르고 효율적으로 제거합니다. 미삽입 염료 종결자가 염기서열 분석 결과를 방해하는 것을 방지하기 위해 염료 종결자를 제거하는 것이 중요합니다. DyeEx 겔 여과 재료는 균일한 기공을 가진 구체로 구성되며 분자량에 따라 분자를 분리합니다. 염기서열 분석 반응 혼합물을 DyeEx 컬럼에 적용하면, 염료 종결자는 기공으로 확산되어 겔 여과 재료에 남아 있는 반면, 표지된 DNA 절편은 통과 과정에서 제외되어 회수됩니다(그림 "DyeEx 분리 원리" 참조).
절차가 매우 간단하기 때문에 DyeEx Kits를 사용한 염료 종결자를 빠르게 제거할 수 있습니다(순서도 "DyeEx 2.0 Spin 절차" 및 ”DyeEx 96 Kit 절차” 참조). 빠른 원심분리 단계를 통해 컬럼 또는 well에서 저장 완충액을 제거하고 염기서열 분석 샘플을 로드한 후 두 번째 원심분리 단계를 통해 미삽입 염료 종결자를 제거합니다. 그런 다음 샘플을 모세관 염기서열 분석기에 직접 로드하거나 건조, 재용해하여 염기서열 분석 겔에 로드할 수 있습니다.
DyeEx Kits는 10~20µl 염기서열 분석 반응에서 BigDye, dRhodamine 염료, Rhodamine, DYEnamic ET, WellRED 종결자를 포함한 모든 유형의 염료 종결자를 제거합니다. 클린업 후, 모든 모세관 염기서열 분석기에서 염기서열 분석 반응물을 분리할 수 있습니다. 신호 강도가 높기 때문에 판독 길이가 깁니다.
DyeEx 특징
특징 | DyeEx 2.0 Spin Kit 및 DyeEx 96 Kit |
---|---|
결합력 | 10~20µl |
용출량 | 10~20µl |
DyeEx Kits용: | 종결자 제거, ABI PRISM 377, 373, 310, 3100, 3700, MegaBACE 1000, CEQ 2000 염기서열 분석기 |
형식 | 튜브(DyeEx 2.0 Spin Kit), 96-well 플레이트(DyeEx 96 Kit) |
처리 | 수동 |
<10mers 17~40mers 염료 종결자 단백질 제거 | 염료 종결자 |
샘플 유형 | 염기서열 분석 반응 |
기술 | 겔 여과 |
DyeEx Kits는 분자생물학 분야에 사용하기 위한 것입니다. 이 제품들은 질병의 진단, 예방 또는 치료 목적으로 사용할 수 없습니다.