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Strep-Tactin Superflow Plus (10 ml)
Cat. No. / ID: 30004
Strep -tagged 단백질 정제에 사용: 0.02% 아지드화 나트륨을 함유한 Strep-Tactin 충전 Superflow Plus 현탁액(50%) 10ml(최대 압력: 140psi)
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현탁액카트리지
Superflow Plus
Superflow Plus Cartridge
Strep-Tactin Superflow Plus은/는 분자생물학 분야에 사용하기 위한 것입니다. 이 제품은 질병의 진단, 예방, 또는 치료용이 아닙니다.
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특징
- 결합력 3배 증가(최대 9mg/ml)
- 원핵 및 진핵 시스템의 정제에 이상적
- 모든 액체 크로마토그래피 시스템에서 자동 정제 가능
- 단백질 구조, 기능, 면역원성에 미치는 영향 최소화
제품 세부 정보
소량의 Strep-tag II(WSHPQFEK)를 사용하여 Strep-Tactin resin에서 활성의 고유 구조 단백질을 고순도로 정제할 수 있습니다. 또한 표준화된 2단계 정제 절차에서 His 태그와 함께 사용할 수 있습니다. Strep-Tactin은 대용량 정제를 위한 Superflow 크로마토그래피 수지(최대 9mg/ml)로 사용할 수 있습니다. Strep-Tactin 수지는 액체 크로마토그래피 시스템에서 자동 정제를 위해 사전 충전된 카트리지로도 제공됩니다.
성능
Strep-Tactin Superflow Plus를 사용하면 단백질을 매우 효율적으로 정제할 수 있습니다( Strep-Tactin Superflow Plus를 사용한 효율적인 Strep-tagged GFP 정제 및 모든 발현 시스템에서 매우 특이적인 Strep 태그 단백질 검출 그림 참조).
pQE TriSystem His·Strep TriSystem 벡터는 His 및 Strep 태그로 이중 태그가 지정된 단백질을 발현하는 데 사용할 수 있으며 2단계 친화성 절차로 정제됩니다. 순차적인 Ni-NTA 및 Strep-Tactin 정제 단계는 표준화되고 매우 빠르며 초순수 단백질을 제공합니다.
그림 참조
원리
Strep- 태그 단백질은 streptavidin을 조작한 형태인 Strep-Tactin에 높은 친화성과 특이성으로 결합됩니다(표 Strep-Tactin 기질의 단백질 결합력 참조). 단백질은 세척 후 저농도 비오틴(streptavidin의 천연 리간드) 또는 desthiobiotin (안정적이고 가역적으로 결합하는 비오틴 유사체, 그림 Strep-tagged 단백질을 Strep-Tactin에 결합 및 데스티오비오틴을 사용한 용출 참조)을 사용하여 용출됩니다. 단백질에 작은 Strep 태그 II 라벨을 붙이면 원핵 및 진핵 시스템에서 발현되는 재조합 단백질을 효율적이고 표준화된 방식으로 정제할 수 있으며 고순도 단백질을 얻을 수 있습니다. 또한 Strep 태그 II는 다른 태그가 적합하지 않을 수 있는 상황(예: EDTA와 같은 완충액 첨가제가 IMAC 컬럼을 제거할 수 있는 경우)에서 선택하는 시스템입니다.
| 기질 | 단백질 결합력 |
| Strep-Tactin Superflow Plus | 최대 9mg/ml |
그림 참조
절차
Strep 태그 단백질은 pQE TriSystem Vector를 사용하여 발현되고 Strep-Tactin Superflow Plus 친화성 정제 절차를 사용하여 세포 용해물에서 매우 높은 순도로 얻을 수 있습니다. Strep 태그 단백질은 배치 또는 중력류 방식을 사용하여 정제하거나 Strep-Tactin Superflow Plus로 FPLC 호환 컬럼을 채워 액체 크로마토그래피 시스템에서 정제할 수 있습니다. Strep-Tactin Superflow Plus는 FPLC, ÄkTA, BioLogic 시스템과 같은 액체 크로마토그래피 시스템에서 자동으로 정제하거나 주사기를 사용하여 수동으로 정제할 수 있도록 5ml 카트리지로 제공됩니다. Strep-Tactin 수지와 호환되는 시약은 표 Strep 태그 Strep-Tactin 상호 작용과 호환되는 시약을 참조하십시오.
| Nonionic 세제 | 이온성 및 양성이온성 세제 | 환원제 | 기타 | 염 |
| 2% Triton X-100 | 2% N-라우릴 사르코신 | 50mM DTT | 25% 글리세롤 | 5M 염화나트륨 |
| 2% Tween 20 | 0.1% SDS | 2M 염화암모늄 | ||
| 2% N-octyl-β-D-glucopyranoside |
1.3% N-octyl-2-hydroxy-ethylsulfoxide | 1M 염화칼슘 | ||
| 0.2% N-nonyl-β-D--glucopyranoside | 0.3% CHAPS | |||
| 2% Igepol CA-630 (Nonidet P40) | 0.1% N-dodecyl-N,N-dimethylamine-N-oxide | 1M 구아니딘 | ||
| 0.12% C10E5, decylpentaoxyethylene | 0.034% DDAO, N-decyl-N,N-dimethylamine-N-oxide | 1 mM phenylmethyl-sulfonyl fluoride (PMSF) | ||
| 0.03% C10 E6 | 10% 에탄올 | |||
| 0.005% C12 E8 | ||||
| 0.023% C12E9, dodecyl nonooxyethylene (Thesit) | ||||
| 0.35% DM, decyl-β-D-maltoside | ||||
| 0.007% LM, N-dodecyl-β-D-maltoside |
태그의 C 말단 위치는 전장 단백질만 정제하도록 합니다. 정제 과정은 재현성이 매우 높기 때문에 시간이 지나도 단백질 제제의 높은 품질이 유지됩니다. 단일클론 Strep 태그 항체는 높은 민감도와 특이성으로 면역검출 절차에서 Strep 태그 단백질을 검출하는 데 사용됩니다.
응용 분야
Strep-Tactin Superflow Plus는 수지 1ml당 최대 9mg의 Strep 태그 단백질을 효율적이고 재현 가능한 방식으로 정제하는 데 사용할 수 있습니다. 정제된 단백질은 다음 용도로 사용할 수 있습니다.
- 기능 또는 상호 작용 연구
- 결정화 스크리닝
- 구조 분석
- 항체 생성
지원되는 데이터 및 수치
모든 발현 시스템에서 Strep 태그 단백질을 매우 특이적으로 검출합니다.
정제된 Strep -tagged thioredoxin (10ng)을 포유류(NIH-3T3), 곤충(Sf9), 박테리아(E. coli) 세포(각각 총 단백질 10µg)의 미가공 세포 용해물과 혼합했습니다. 전기영동과 웨스턴 이동 후 Strep-tag Antibody 및 화학발광 검출을 사용하여 Strep 태그 단백질을 검출했습니다.
Specifications
| Features | Specifications |
|---|---|
| Applications | 단백질체학 |
| Binding capacity | 최대 9 mg/ml |
| Scale | Strep-Tactin Superflow Plus: 대용량, Strep-Tactin Superflow Plus 카트리지: 중간 용량 |
| Tag | Strep-tag |
| Support/matrix | Superflow Plus |
| Yield | 최대 9 mg/ml |
| Processing | 수동/자동 |
| Start material | 세포 용해물 |
| N- or C-terminal tag | 둘 다 |
리소스
Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Technical Information (2)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
How often can the Strep-Tactin Superflow Plus resin be reused?
Are there any changes in the procedure using the Strep-Tactin Superflow Plus resin with the higher capacity over the standard matrix?