QIAcuity Residual DNA Quantification Kits

• 宿主細胞DNAのセットアップと検出を容易にするコントロール付きプレミックスマスターミックス
• E.coli、CHO、HEK293細胞から、残存宿主細胞DNAを、フェムトグラムレベルまで正確に検出可能
• 高度に断片化された宿主細胞DNAを検出および定量するマルチコピーターゲットアッセイ
• 抽出サンプルと未抽出サンプルの両方で宿主細胞DNA検出が可能

ワクチン、医薬品、その他のバイオ医薬品などの製品の宿主細胞DNAコンタミネーションは、大きな健康リスクをもたらします。そのため、その安全限界は米国FDAやWHOなどの機関によって厳しく規制されています。残存DNAの上限に関する明確なガイドラインは、薬剤投与の性質、汚染細胞DNAの感染性および発がん性に基づいて規定されています。例えば、非腫瘍原性細胞DNAの非経口投与は、投与1回あたり10 ng、最大長200 bpに制限すべきですが、経口投与されるワクチンでは、WHOにより、残存DNAは1投与当たり100 µg未満にするよう推奨されています。 

製造中の製品のこのようなコンタミネーションの検出と除去には、製品中に存在する極微量の特異的宿主細胞DNAを高感度かつ正確に定量する必要があります。

デジタル PCRは、残存DNA定量に適した検出方法です。これは、リアルタイム PCRのような他の検出法と比較して、特に微量レベルのコンタミネーションでは、比類のない感度と精度を有しているからです。QIAcuity Residual DNA Quantification Kitsは、Escherichia coli (E.coli)、チャイニーズハムスター卵巣細胞（CHO）およびヒト胎児腎293細胞（HEK293）の宿主細胞DNAを正確かつ高精度で検出します。     

QIAcuity Residual DNA Quantification Kitsは、PCR時のコンタミネーションやその他の阻害試薬が存在する場合でも、抽出の有無にかかわらず、CHO、E.coli、HEK293の残存DNA（resDNA）の正確な定量を行い結果を示します。このアッセイは、高度に断片化された残存宿主細胞DNAを正確に測定するマルチコピーターゲットアッセイです。

QIAcuity E.coli resDNA Quant Kitは、1回の反応でわずか5 fgの残留DNAを検出します

*内部コントロールには100コピー/µlが予想される

デジタルPCRは、リアルタイム PCRよりも少ないテンプレートインプット濃度で、より高い検出感度を示すため、安定したアプリケーションが可能になります。

QIAcuity CHO resDNA Quant Kitは、1回の反応でわずか5 fgの残留DNAを検出します

*内部コントロールには100コピー/µlが予想される

QIAcuity HEK293 resDNA Quant Kitは、1回の反応でわずか5 fgの残留DNAを検出します

*内部コントロールには100コピー/µlが予想される

このキットは、QIAcuityデジタルPCRシステムおよびQIAcuity Nanoplatesと連動して作動し、リアルタイムPCRと同等のエンドツーエンドの高速dPCRワークフローを提供しながら、サンプル中のresDNAを絶対定量することができます。このキットは、バイオプロセス製造とQCの要件を念頭に置いて設計されています。

ナノプレートでのdPCR反応の原理はこちらで説明しています。

宿主細胞DNAモニタリングにQIAcuity デジタルPCR を使用すると、QIAcuity Nanoplate 26kの性能により、バルクサンプルのパーティショニングによってLoD/LoCが向上します。パーティショニングによってターゲットの有効濃度が上昇するので、少量の宿主細胞 DNAをより高い精度と正確さで捕捉すること、測定することができます。QIAcuity Nanoplate 26kでは、多くのテンプレートインプット量をロードすることができます。パーティション数の増加が、残存宿主細胞検出の精度と正確さが向上する理由の一つになります。

  

溶解物を、内部コントロールおよび絶対定量によって測定する宿主細胞DNAとともに、残留定量アッセイに追加します。コピー/µlを提供されている変換ファクターでfg/µlに変換します。

QIAcuity Residual DNA Quantification Kitsは、複雑なバイオプロセス中間体中の宿主細胞DNAの高精度定量に理想的です。