QIAsymphony RNA Kit

組織あるいは細胞からのトータルRNAまたはmiRNAを含むトータルRNAの自動精製

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✓ 迅速で信頼性の高い（再）注文

QIAsymphony RNA Kit

Cat. No. / ID: 931636

For as many as 192 preps, depending on protocol: includes 2 reagent cartridges and enzyme racks and accessories

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QIAsymphony RNA Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

画期的な充填済み試薬カートリッジで取り扱いが簡単
標準化されたプロセスにより高い再現性
至適化されたプロトコールで高収量の高純度RNA
バーコードにより試薬とサンプルのトラッキングが可能

製品詳細

QIAsymphony RNA Kit は、QIAsymphony SP上で1～96 サンプルからのトータルRNAあるいはmiRNAやその他のsmall RNAを含むトータルRNAの完全自動化精製を実現します。微量のスタートサンプル（細胞100 個以上）から最高1 x 10⁷個の細胞あるいは50 mg の組織を用いて動物細胞、組織、FFPE組織からトータルRNA を精製可能です。至適化済みのプロトコールにより高純度のRNAまたはmiRNAを含むRNAを高収量で得られ、溶出容量が調節可能なので各ダウンストリームに応じて容易にRNA 濃度を至適化できます。充填済み試薬によりセットアップ時間を短縮でき、マニュアルでの作業操作も最小限に抑えることができます。バーコードの読み取りにより試薬の使用履歴のトラッキングが可能です。

パフォーマンス

QIAsymphony SP上でのRNA自動化精製では、培養細胞、組織、FFPE組織から高い再現性で質の高いRNAを高収量で得ることができ、マニュアル精製操作で得られるRNAと同等のRNAを回収できます（図 ""）。RNA精製用のQIAsymphony protocol では、主としてmRNAを含む200ヌクレオチドより長いRNA分子が多く含まれています（図 ""）。QIAsymphony miRNA protocol を使用すれば、miRNAsや他の低分子RNAなどの200ヌクレオチドより短いRNAを含むトータルRNAを精製できます（図 ""）。

図参照

Reproducible purification of RNA.

Highly pure intact RNA.

Automated purification comparable to manual procedure.

原理

QIAsymphony RNA Kitは、proteinase K処理後に200ヌクレオチドより長いトータルRNAやmiRNAおよびその他の低分子RNAを含むトータルRNAを精製するために、シリカベーステクノロジーのスピードと効率と磁性粒子による簡便な操作を組み合わせています（図 ""）。スタートサンプルに、動物の細胞や組織も使用できます。追加の製品を使えば、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織も本キットで処理できます。サンプルを溶解し、カオトロピック塩の存在下で粒子のシリカ表面へ結合させることによりライセートからRNAを1ステップで精製します。マグネットを使用してライセートから粒子を分離させ、DNAはRNaseフリーのDNase処理により取り除きます。磁性粒子を効率的に洗浄し、RNAをRNaseフリー水で溶出します。

図参照

Efficient handling of magnetic particles.

操作手順

革新的で即使用可能な試薬カートリッジは、精製工程に必要な全ての試薬（酵素も含む）および磁性粒子が充填済みです。QIAsymphony SPがカートリッジを自動的に開封するため、周囲環境からのコンタミのリスクが最小限に抑えられます（図 " 充填済みのプレパックカートリッジ"）。ワークテーブルのセットアップが簡単かつ迅速に行なえ、貴重な時間を節約できます。QIAsymphony SPのボックスに最高2種類の試薬カートリッジを入れるだけで準備完了です。同じキットの試薬カートリッジではなく、別々のキットの試薬カートリッジをセットすれば、1回のランで96サンプルから2種類の精製工程が可能です。選択したサンプル数だけの試薬量が使用されるため、経費を完璧にコントロールできます。精製手順は、4段階になっています（溶解、結合、洗浄、溶出）。スタートサンプルおよび必要なRNA量により、多数のQIAsymphony SP用RNA精製プロトコールが使用可能です（表参照）。

QIAsymphony SPによるRNA精製のプロトコール
プロトコール	使用するキット	スタートサンプル（前処理したサンプルライセート）	サンプル量 (μl)
RNA CT 400	QIAsymphony RNA Kit (192)	≤3 x 10⁶ 個の培養細胞 ≤20 mg 溶解しやすい組織	400 μl
RNA CT 800	QIAsymphony RNA Kit (2 x 48)	3 x 10⁶～1 x 10⁷ 個の培養細胞 ≤50 mg 溶解しやすい組織	800 μl
RNA FT 400^*	QIAsymphony RNA Kit (192)	≤20 mg 線維性組織	400 μl
miRNA CT 400^*	QIAsymphony RNA Kit (192)	≤3 x 10⁶ 個の培養細胞 ≤20 mg 組織	400 μl
RNA FFPE 130^†	QIAsymphony RNA Kit (2 x 72)	10 μmまでのFFPE切片　1～2 枚 FFPE切片 20 μm1枚	130 μl

図参照

Prefilled, sealed reagent cartridges.

アプリケーション

QIAsymphony RNA KitとQIAsymphony SPを用いたトータルRNA自動精製により、どのようなアプリケーションにも最適な高品質RNAが得られます。

裏付けデータと数値

Reproducible purification of RNA.

RNA was purified from Jurkat cells on the QIAsymphony SP using the QIAsymphony RNA Kit. RNA yields from 2 instrument runs using 2 different reagent cartridge lots were compared with manual purification using the RNeasy Mini Kit. Each bar represents the average of 4 samples.

Specifications

Features	Specifications
Applications	RT-PCR; Real-Time PCR; Expression Profiling
Sample amount	400 µl lysate from <20 mg tissue or 3 x 10e6 cells or 800 µl lysate from <50 mg tissue or 3 x 10e6 cells
Elution volume	50-200 µl

リソース

Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.

For use with software version 4.0 or higher

For use with software version 4.0

For use with software version 4.0 or higher

For use with software version 4.0

For use with the QIAsymphony SP/AS instruments (software version 4.0)

For use with software version 5.0 or higher

FAQ

RNA processed on the QIAsymphony SP with the QIAsymphony RNA Kit can be eluted in 200, 100, or 50 µl.

Elution in smaller volumes will provide higher concentration, but lower overall yield. Total RNA yield with elution in 50 µl will be about 20% lower compared to elution in 100 µl.

FAQ ID -1943

Using the Standard protocol for RNA extraction on the QIAsymphony SP, up to 400 µl of lysate can be processed while the Large-Volume protocol allows up to 800 µl of homogenate.

FAQ ID -1939

No. Modified QIAGEN protocols or custom protocols for QIAsymphony SP can be developed to meet your specific requirements and purchased from QIAGEN.

FAQ ID -1904

Yes. Any number of samples between 1 and 96 can be processed on the QIAsymphony SP.

FAQ ID -1906

For purification of RNA from blood on the QIAsymphony SP, we recommend using the QIAsymphony PAXgene RNA Kit, since it includes stabilization of gene expression profiles.

FAQ ID -1945

For purification of RNA on the QIAsymphony SP, tissue samples require mechanical disruption and homogenization in the supplied lysis buffer (Buffer RLT Plus), e.g., by using the TissueLyser or TissueRuptor. Cultured cells should be lysed by vortexing in the lysis buffer contained in the kit.

FAQ ID -1938

200–1000 µl sample volumes can be processed on the QIAsymphony Sample Prep Module.

FAQ ID -1907

Yes, the QIAsymphony RNA Kit is compatible with stabilized samples. We recommend stabilizing tissue samples with RNAprotect Tissue Reagent or AllProtect Tissue Reagent, or by flash-freezing. Cultured cells can be lysed directly in cell culture dishes, or after pelleting. Alternatively, cells can be stabilized using RNAprotect Cell Reagent.

FAQ ID -1944

The QIAsymphony RNA Kit enables purification of RNA from cultured cells and easy-to-lyse tissues, such as kidney, liver, and spleen on the QIAsymphony SP. A large-volume protocol is available that enables processing of larger sample amounts.

Cultured cells: up to 3x10⁶ cells (standard protocol); up to 1x10⁷ (large volume protocol)
Tissues: up to 20 mg of most tissues (standard protocol); up to 50 mg (large-volume protocol)

For particularly DNA-rich tissues, such as spleen or thymus, we recommend either using no more than half the maximum amount, or using DNase at a higher concentration (see the QIAsymphony RNA Handbook; additional DNase required).

FAQ ID -1937

Strongly denaturing conditions in the lysis buffer (Buffer RLT Plus) of the QIAsymphony RNA Kit keep RNases in an inactive state. Keeping homogenates on the QIAsymphony instrument at room temperature (20-25°C) for over 6 hours does not impair RNA integrity.

FAQ ID -1941

No. Protocols on the QIAsymphony SP cannot be modified by users. However, protocols allow elution volumes to be selected within a predefined range. Customized protocols for QIAsymphony SP will be available on request.

FAQ ID -1903

Depending on the application, elution volumes on the QIAsymphony SP range from 30 µl to 500 µl.

FAQ ID -1908

Please see expected yields of total RNA isolated with the QIAsymphony RNA Kit on the QIAsymphony SP in the table below:

Sample type	Sample amount	Typical RNA yield (µg)*
Cultured Cells
HeLa, Jurkat	1 x 10e6 cells	15
Rat tissues
Kidney	10 mg	10-25
Liver	10 mg	20-50
Lung	10 mg	5-10
Spleen	10 mg	25-35

*RNA yields strongly depend on the type and quality of the sample material.

FAQ ID -1942

Each QIAsymphony RNA Kit enables preparation of up to 192 samples (96 per reagent cartridge) using the standard protocol on the QIAsymphony SP. If only the large-volume protocol is used, the number of samples that can be prepared per kit is reduced to 96 (48 per reagent cartridge). Any combination of standard and large-volume sample preparation can be performed.

FAQ ID -1940