DyeEx Kits

• わずか2回の短い遠心分離ステップによる迅速な手順
• すぐに使える水和済みのゲル濾過材
• ダイターミネーターを効率的に除去

DyeEx キットはスピンカラムまたは 96 ウェルプレートを提供し、ゲルろ過技術を使用して、サンガーシークエンシングを含むシークダイエンシング反応液からダイターミネーターを除去します。 反応液は、事前に水和されたゲルろ過材にロードされます。 短い遠心分離ステップの後、反応液をキャピラリーシーケンサーにロードする準備が整います。 取り込まれなかったダイターミネーターはゲルマトリックスに保持されます。

DyeEx Kitsは、10–20 µlのシークエンシング反応液からBigDye、dRhodamine dye、Rhodamine、DYEnamic ET、WellREDターミネーターなど、あらゆる種類のダイターミネーターを除去します。クリーンアップの後、シークエンシング反応液は、キャピラリーシークエンサーで分離できます。最適化されたプロトコールを使用したDyeEx 96 Kitをお勧めします。

高品質のシークエンシング

DyeExキットは、迅速かつ簡便に色素ターミネーターを除去し、高品質のシーケンス結果につながるように最適化されています。対照的に、エタノール沈殿によるシークエンシング反応クリーンアップは非常に時間がかかり、非効率的です（「DyeEx操作手順とエタノール沈殿の比較」の表を参照）。ダイターミネーターを効率的に除去できないと、シーケンス データにダイの凝集によって、シークエンスの一部が読み取れなくなることがよくあります。シークエンシング反応のクリーンアップにDyeEx Kitsを使用することで、シークエンシング装置にロードされた反応液は確実にダイターミネーターが含まれなくなります。ダイの凝集がなく、シークエンス全体を容易に読み取れます（ 「優れたシークエンシング成果物」の図を参照）。シグナル強度は強く、ロングリードの長さが得られます（ 「ロングリードシークエンス」の図を参照）。

DyeExの操作手順とエタノール沈殿の比較

N.A：該当せず

* ゲルローディング前のサンプルの乾燥に必要な時間は含まない（該当する場合）。
†標準のプロトールを使用。

DyeExの操作手順では、ゲル濾過を使用して、シークエンシング反応液から組み込まれなかったターミネーターを迅速かつ効率的に除去します。ダイターミネーターの除去は、組み込まれなかったダイターミネーターがシークエンシング成果物の分析を妨害するのを防ぐために重要です。DyeExゲル濾過材料は、均一な細孔を持つ球体で構成され、分子量に応じて分子を分離します。シークエンシング反応液をDyeExカラムにアプライすると、ダイターミネーターは細孔内に拡散し、ゲル濾過材内に保持されます。その一方で、ラベルされたDNAフラグメントは溶出され、フロースルーに回収されます（ 「DyeEx分離の原理」の図を参照）。

DyeEx キットによる色素ターミネーターの除去は、手順が非常にシンプルなため、短時間で完了します（ 「DyeEx 2.0 Spinの操作手順」と ”DyeEx 96 Kitの操作手順”のフローチャートを参照）。素早い遠心分離ステップで、カラムまたはウェルから保存用バッファーを除去し、シークエンシングサンプルをロードし、二番目の遠心分離ステップで組み込まれなかったダイターミネーターを除去します。サンプルはその後、キャピラリーシーケンサーに直接ロードするか、乾燥、再溶解してシーケンシングゲルにロードすることができます。

DyeEx Kitsは、10–20 µlのシークエンシング反応液からBigDye、dRhodamine dye、Rhodamine、DYEnamic ET、WellREDターミネーターなど、あらゆる種類のダイターミネーターを除去します。クリーンアップの後、シークエンシング反応液は、キャピラリーシークエンサー上で分離できます。シグナル強度は強く、読み取り長が長くなります。