Certal Residual DNA Detection Kits

• 優れた再現性を備えた低い定量下限
• 高い直線範囲
• 信頼性の高い正確な内部コントロール
• 幅広いリアルタイムPCRサイクラー用に最適化されたプロトコール
• 内部コントロールと陽性コントロールを含む完全なキット

バイオ医薬品を扱う場合、最終的な治療材料を評価して、宿主細胞からの残存DNAなどのコンタミネーションがないことを確認することが不可欠です。Certal Residual DNA Detection Kitは、二重標識加水分解（TaqMan®としても知られる）プローブを用いて、宿主細胞の残存ゲノムDNAを高感度かつ迅速にリアルタイムPCRで定量できるように設計されています。Certal CHO Detection Kitには、CHO残存宿主細胞DNAのデュプレックスreal-time PCR検出用試薬と、Certal Internal Controlが含まれています。このキットにはまた、CHO宿主細胞DNAからのシグナルがない場合のPCRアッセイの機能を確認するCertal Residual DNA Positive Controlと、濃度の異なる2種類のROXパッシブレファレンス色素も含まれており、実質的にあらゆるリアルタイムPCR装置で使用できます。

Certal Residual DNA Detection Kitsは、安全で信頼性の高いバイオ医薬品の製造に不可欠な残留ゲノムDNA（gDNA）の高感度で信頼性の高い検出と定量を可能にします（図「 高感度で信頼性の高い検出」参照）。Certal CHO Detection Kitは、チャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞からの残存gDNAを、低い検出限界と高い直線範囲で検出し、低レベルの残存gDNAであっても信頼性の高い検出を保証します（図「 低い検出限界」参照）。Certal Residual DNA Detection Kitsは幅広いサイクラーに対応しており、高感度で信頼性の高いデータを提供します（図「 幅広いサイクラーでの高感度で信頼性の高い検出」と 「 Rotor-Gene QでのCHOゲノムDNAの高感度で信頼性の高い検出」参照）。

プロセスの安全性を高めるために、Certal Residual DNA Detection KitsにはQIAGEN Internal Controlが含まれています。これは、陰性結果の正しい解釈を可能にし、ターゲットアッセイに干渉しないよう特別に設計されています。QIAGEN Internal Controlは、ゲノムDNAと共増幅すると確実に検出されます（図「  QIAGEN Internal Controlの確実な検出」参照）。

バイオ医薬品の製造に使用される宿主細胞株からのコンタミネーションが最終治療材料に含まれていないことを保証するために、Certal Residual DNA Detection Kitsは、CHO宿主細胞DNAを特異的に検出するように事前に設計したアッセイを提供しています。各Certal Residual DNA Assayは、残存CHOゲノムDNAを確実に検出できるように、最適化されたプライマーペアとFAM標識加水分解プローブで構成されています。ヒトバックグラウンドDNAとCertal Internal Control DNAは、Certal Residual DNA Assayに干渉しません。

プレミックスしたCertal Internal Control Assayには、Certal Internal Control DNAを検出するためのフォワードプライマーとリバースプライマー、MAX標識加水分解プローブが含まれています。これは、Certal Residual DNA Assaysとの干渉を防ぐように特別に最適化されています。このCertal Residual DNA Positive Controlは、増幅反応自体の機能をテストすることにより、陰性結果を正しく解釈できるようにします。

Certal ResDNA PCR Bufferは、高感度で信頼性の高い定量的デュプレックスreal-time PCR結果を得ることができるように最適化されています。マスターミックスにはdUTPも含まれており、PCR開始前にウラシル-N-グリコシラーゼ（UNG）で前処理を行うことで、PCR産物のコンタミネーションがその後のPCR反応に影響を与えないようにすることができます。

Certal Residual DNA Detection Kitは、宿主細胞 DNA、Certal Internal Control、およびCertal Residual DNA Positive Controlを検出するための簡単な手順を提供します（図 Certal Residual DNA Detection Kitの手順参照）。付属のマスターミックスとCertal Residual DNA Assay、Certal Internal Control Assay、Certal Internal Control DNAを混合し、サンプルDNAまたはCertal Residual DNA Positive Controlを加えるだけです。キットのハンドブックには、さまざまなサイクラーで使用できるように最適化されたプロトコールが含まれています。ROXは濃度の異なる2本のチューブで提供され、どのリアルタイム装置でも使用できます（表「正しいROX濃度の選択」参照）。

Certal Residual DNA Detection Kitsは、内部コントロールを含む宿主細胞DNAの検出に配列特異的プローブを使用する高感度リアルタイムPCRを可能にします。このキットは、QIAGEN、Applied Biosystems、Bio-Rad、Roche、Agilentなどを含む幅広いリアルタイムPCRサイクラーで使用できます。