アデノ随伴ウイルスは、遺伝子治療アプリケーションで広く使用されるウイルスベクターです。しかし、臨床試験や患者の治療において安全かつ信頼できる方法で投与するには、ウイルスベクターの作製および精製プロセスにおける厳密な品質管理が要求されます。ウイルス力価を正確に定量し、コンタミネーションを特定できることが、AAVを活用した安全で有効な遺伝子治療のカギとなります。
CGT Viral Vector Lysis Kitには100回または1000回分の反応試薬が含まれています。CGT Viral Vector Lysis Kitを取り入れることで、正確で精密なウイルス力価測定が可能になり、ウイルスベクター溶解物のための最適で標準化されたワークフローがもたらされます。本キットはアデノウイルスにも使用できます。
AAV溶解から細胞溶解液のウイルス力価定量まで、完全なワークフローを提供します。CGT Viral Vector Lysis Kitは、その優れた組成により、一貫した堅牢で正確な最終力価の測定を可能にします。QIAcuity Cell and Gene Therapy dPCR Assays、 QIAcuity Digital PCR System、 QIAcuity Probe PCR Kitおよび QIAcuity Nanoplate 8.5Kと連携して動作し、qPCRと同等のエンドツーエンドdPCRワークフローを提供しながら、サンプル中のAAVベクターゲノムコピーを絶対定量することができます。
次の特長を備えた、AAV溶解のためのオールインワンソリューションです。
CGT Viral Vector Lysis Kitは、QIAcuity Cell and Gene Therapy dPCR AssaysおよびQIAcuity Probe PCR Kitと組み合わせてシングルプレックスまたはマルチプレックス反応に使用することで、完全なウイルス力価測定ワークフローが実現します。
ナノプレートでのdPCRの原理はこちらで説明しています。
CGT Viral Vector Lysis Kitは、AAVベクター用の反応試薬100回分または1000回分を2つの箱で提供します。本キットは、AAV2、AAV5、AAV6、AAV8およびAAV9の溶解物に適しています。溶解液は、QIAcuity Cell and Gene Therapy dPCR AssaysとQIAcuity Probe PCR Kitを組み合わせた分析に最適です。これらのアッセイを使用することで、ウイルス力価測定やウイルスベクターコピー数測定など、細胞遺伝子治療アプリケーションにおけるシングルプレックスおよびマルチプレックス分析が可能です。本キットには、プロトコール(下記のResourcesを参照)に記載の制限酵素(Hpallなど)は含まれません。
CGT Viral Vector Lysis Kitは、AAVおよびアデノウイルスの溶解物に使用され、ウイルスベクターのゲノム力価測定やコピー数測定など幅広いアプリケーションに活用されます。
Two AAV2 samples were processed using the CGT Viral Vector Lysis Kit and quantified using the QIAcuity Digital PCR instrument with 8.5k Nanoplates and the CGT dPCR Assays. The CGT dPCR Assays were run in triplex reactions in the FAM, HEX and Cy5 channels. The samples were serially diluted in 6 steps from 15,000 copies/µL down to 2.5 copies/µL with an R2=1.0 on 8.5k Nanoplates (A, B). Each dilution was measured in technical triplicates. Quantifications were performed with (+) and without (–) restriction digest of the ITR regions. (A) For the titration of a purified AAV2 reference standard sample, the CGT dPCR assays targeting the CMV enhancer bGH polyA regions were used. The expected copies are based on an ITR estimate determined by qPCR measurements from the reference standard supplier and not directly comparable to dPCR measurements. (B) For the titration of the AAV2-SV40 harvest sample, the CGT dPCR Assays targeting the SV40 promoter, SV40 polyA and bGH polyA regions were used.