TransMessenger Transfection Reagent

効果的なmRNA トランスフェクション

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TransMessenger Transfection Reagent (0.5 ml)

Cat. No. / ID: 301525

For 60 transfections in 6-well plates or 80 transfections in 12-well plates

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TransMessenger Transfection Reagentは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

効率の高いトランスフェクション
厳密な品質管理で再現性の高い結果を実現
初代神経細胞への効率的なトランスフェクション

製品詳細

TransMessenger Transfection Reagent は、真核細胞へのRNAトランスフェクションに即使用可能な脂質ベースの試薬です。DNAではなくRNAを用いた細胞へのトランスフェクションにより、トランスフェクション実験における新しいアプローチが可能になります。TransMessenger Reagentを用いた293T、Jurkat、Veroへのトランスフェクションは良好な結果が得られます。本製品は初代細胞（ヒト線維芽細胞、ラット心筋細胞、ラット神経細胞）へのRNAトランスフェクションにも使用できます。

パフォーマンス

TransMessenger Reagentは、操作を迅速かつ簡単にし、トランスフェクション効率を高めます（図""）。RNA量はトランスフェクションを成功させるための重要な因子であることから、それぞれの細胞およびRNAの組み合わせにおいて、RNAとTransMessenger Transfection Reagent の至適化をお薦めします（図 ""）。この作業を簡便化するため、本試薬は、種々の培養細胞フォーマットで至適化を行なうための開始点と、至適化のガイドラインを示しています。

図参照

TransMessenger Reagent with HeLa cells.

Amount of RNA and TransMessenger Reagent vs. transfection efficiency.

原理

TransMessenger Transfection Reagentは、特にRNAによる細胞のトランスフェクションを目的に開発された最初の試薬です。脂質をベースにしたTransMessenger Reagent は、RNAを縮合する特殊なエンハンサーと至適化されたバッファーを組み合わせて使用します。エンハンサーによりRNA分子は縮合された後、TransMessenger Reagentによりコーティングされ真核細胞へ効率良く移行します。RNase活性がないかどうか、ロット間に一貫性があるかどうか、エンドトキシンレベルが低い（≤10 EU/ml）かどうかをチェックするために、品質管理を厳格に行なっています。RNAトランスフェクションの効率に悪影響を及ぼすおそれのある試薬変数は、当社の厳格な基準で消去されています。

操作手順

TransMessenger Reagent の全ての試薬は即使用可能です。RNAをEnhancer RとBuffer EC-Rと混合し、室温で5分間インキュベート後、TransMessenger Reagent を添加してさらに5～10分間インキュベートするだけでTransMessenger-RNAトランスフェクションコンプレックスが形成されます。このコンプレックスを培養液と混合し、細胞に直接アプライします。3時間のインキュベーションの後に培地を交換し、細胞をさらにインキュベートして分析可能な状態にします。
DNA、タンパク質などの夾雑物を伴わない高純度なRNAを使用すれば、最適なトランスフェクション結果を得ることができます。RNeasy Kitsで精製したRNAの使用をお薦めします。

アプリケーション

DNAではなくRNAを用いた細胞へのトランスフェクションにより、トランスフェクション実験における新しいアプローチが可能になります。トランスフェクトされたRNA配列は転写反応が行なわれることなく、またプロモーターに依存することなく発現されます。さらに、DNAよりRNAをトランスフェクトした場合の方が通常より早くタンパク質が発現されます。TransMessenger Transfection Reagentを用いたRNAトランスフェクションは以下の方法に使用できます。

プラスミドDNAを効率的にトランスフェクトできない細胞の研究
RNA機能の直接研究

裏付けデータと数値

Amount of RNA and TransMessenger Reagent vs. transfection efficiency.

Optimization experiments were performed in CHO-K1 cells. Cells (2 x 10⁴⁾ were seeded in quadruplicate into 96-well plates and transfected 24 hours later with an in vitro-transcribed CAT-encoding RNA using [A] increasing amounts of RNA with 1.5 µl TransMessenger Reagent and [B] increasing amounts of TransMessenger Reagent with 0.25 µg RNA, as described in the TransMessenger Transfection Reagent Handbook. CAT activity was measured 24 hours post-transfection.

Specifications

Features	Specifications
Applications	Direct studies of RNA function
Features	Transfection with RNA. Efficient transfection of neuronal cells.
Controls	Not included
Nucleic acid	RNA
Cell type	Eukaryotic cells
Number of possible transfections	80 transfections in 12-well plates / 0,5 ml reagent
Technology	Lipid-based formulation in conjunction with a RNA-condensing enhancer
Transfection type	Transient transfection, co-transfection

リソース

Search for transfection data by nucleic acid, cell line, and transfection reagent. Our database contains data from researchers like yourself who have shared their experimental results with us.

Transfection protocols for specific cell types and plate formats that save you the time and effort of adapting existing protocols to fit your requirements. Simply select the cell type, nucleic acid, and culture format to receive a QIAGEN transfection protocol to print out or download in convenient PDF format.

For transfection of eukaryotic cells with RNA and siRNA

Brochure detailing reagents for efficient and robust DNA and RNA transfection.

Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.

The following procedure is for co-transfection of adherent cells using siRNA and plasmid DNA in one well of a 24-well plate. This procedure is provided as a starting point for optimization of siRNA and plasmid DNA co-transfection in mammalian cells using TransMessenger™ Transfection Reagent.

FAQ

QIAGEN Transfection Reagents have been used successfully with many different cell types. For your convenience, we have organized data from researchers who have shared their experimental results with us online in our Transfection Cell Database. Simply type your cell line of interest into the 'Search' field on this page, and find transfection results achieved with various QIAGEN Transfection Reagents. Please note that QIAGEN cannot verify data supplied from outside sources.

You can also submit your own transfection data and obtain a gift as appreciation. In addition you can find on our TransFect Protocol Database transfection protocols for specific cell types and plate formats.

FAQ ID -158

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Guidelines for co-transfection of adherent cells with siRNA and plasmid DNA using TransMessenger Transfection Reagent' (TFP21).

In addition, we have also the following Supplementary Protocol for the Attractene Transfection Reagent 'Fast-Forward cotransfection of adherent cells with siRNA and DNA in 24-well plates using Attractene Transfection Reagent'.

FAQ ID -969

Unfortunately, we do not have any data for the transfection of siRNA into insect cells. However, we know about customers who have successfully used Effectene Transfection Reagent for the transfection of plasmid DNA into insect cell lines S2 and Sf9 (see FAQ 397). Since Effectene Transfection Reagent and HiPerFect Transfection Reagent for the transfection of eukaryotic cells with siRNA are both lipid based, there is a chance that HiPerFect will work with insect cells. It is especially suitable for transfection of very low siRNA concentrations, reducing the risk of cell toxicity and off-target knockdown effects.

Alternatively, you can try RNAifect or TransMessenger Transfection Reagent, also lipid-based, for the transfection of siRNA into S2 cells.

We would appreciate any feedback on your results in case you want to give it a try. Please visit our Transfection Cell Survey page to submit your feedback.

FAQ ID -1046

The composition of 1x PBS solution is:

137 mM NaCl
2.7 mM KCl
4.3 mM Na₂HPO₄
1.47 mM KH₂PO₄

Adjust to a final pH of 7.4.

This solution is not supplied in any QIAGEN Kit, but is used in protocols for various QIAGEN transfection kits.

FAQ ID -1030

No, we do not recommend to use RNAiFect for the transfection of plasmid DNA. The RNAiFect Kit does not contain Enhancer which is necessary to form condensed complexes before transfection of DNA into the cell. TransMessenger Transfection Reagent would be the right choice as it allows co-transfection of siRNA and plasmid DNA. Access the protocol via the following link: Co-transfection of adherent cells with siRNA and plasmid DNA using TransMessenger Transfection Reagent

Alternatively, you can use the Attractene Transfection Reagent with the QIAGEN Protocol "Fast -Forward cotransfection of adhernet cells with siRNA and DNA in 24-well plates using Attractene Transfection Reagent".

FAQ ID -515