Investigator Casework GO! Kit

ケースワークサンプルの直接増幅用

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Investigator Casework GO! Kit

Cat. No. / ID:   386546

ケースワークGO! 溶解緩衝液、プロテイナーゼK溶液、ヌクレアーゼフリー水
元 19,030.00
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キット付属品
Casework GO! Kit
DTT
Investigator Casework GO! Kitは、法医学、ヒト個人識別、父子鑑定における分子生物学的用途での使用を目的としています。疾病の診断、予防、治療は目的としていません。

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特徴

  • 後の直接増幅ワークフローでの使用を目的とした法医学ケースワークサンプルの溶解
  • さまざまな微量サンプルからDNAを回収するチャンスを最大化
  • YスクリーニングおよびSTR検査用の証拠サンプルの選択を実現

製品詳細

Investigator Casework GO! Kitを使用すると、性的暴行スワブ、布地片、紙、たばこの吸い殻、チューインガム、その他のサンプルタイプなど、さまざまな基材で法医学サンプルを溶解できます。得られた溶解物は、あらゆるInvestigator QuantiplexおよびInvestigator STR QS Systemに対応します。Investigator Casework GO! Kitは、ISO 18385要件を満たしています。

原理

Investigator Casework GO! Kitは、直接増幅ワークフローでの法医学サンプルの前処理に使用します。キットではDNA精製なしのサンプル溶解が可能で、溶解物はInvestigator Quantiplex Pro、Investigator Quantiplex Pro FLXおよびQuantiplex Pro RGQまたはInvestigator 24plex QS、26plex QS、ESSplex SE QSまたはIDplex Plus Kitなど、複数の下流解析に対応します。 

Investigator Casework GO! Kitはケースワークサンプルの直接増幅に使用でき、これによりケースワーク解析のワークフローを加速できます。また、性的暴行スワブやその他の物質の切断などケースワークサンプルから得たスワブをさらに精製することなく迅速に処理できます。溶解物は、あらゆるInvestigator Quantiplexアッセイを使用した定量、またはあらゆるInvestigator STRアッセイを用いたDNAプロファイリングに直接使用できます(定量によるデータがPCR阻害物質の可能性を示していない限り)。 

性的暴行スクリーニング分析では、Investigator Casework GO!ワークフローによって男性定量およびAuto/Y(常染色体/Y染色体)比によるサンプル処理決定が容易になります。

操作手順

チューブに入ったサンプルに100~400 µLの Casework GO! マスターミックスを加え、60°Cで25分間インキュベートし、その後80°Cでさらに5分間インキュベートします。Quantiplex Proキットを使用するとこの溶解物を2 µL、Quantiplex Pro FLXキットを使用すると最大18 µLまで定量し、Investigator STR QSキットを使用した増幅にはこの溶解物を最大15 µL使用します。

アプリケーション

ケースワークサンプル

サンプル調製に使用できる資金や時間がないことから、大量の犯罪サンプル(強盗や車両関連犯罪など)が検査されていません。Investigator Casework GO! Kitを使用すると、サンプル調製ステップを排除できるため、DNAプロファイルの作成がより迅速かつ低価格になり、大量の犯罪サンプルの大多数に対してDNA検査がより実行可能になる可能性があります。Quantiplex ProキットやInvestigator STR QSキットと共にInvestigator Casework GO! Kitを使用すると、男性/ヒトDNAの有無、サンプルの劣化や潜在的なPCR阻害剤の存在といった貴重なワークフロー情報が取得できます。

性的暴行の証拠/Yスクリーニング

多くの性的暴行事件は、PCR対応のDNAを回収する労力と複雑さが原因で、数ヶ月から数年にわたり保管されたままになっています。最新のSWGDAM勧告に沿って「Direct to DNA」(DNAに直接)アプローチを採用すると、十分に処理をする価値のあるサンプルのみをさらに解析する可能性が最大になります。Investigator Casework GO! Quantiplex ProFLXワークフローは男性/女性DNA比を決定し、サンプル劣化と共にPCR阻害を予測します。このようにして、今後のSTR検査に向けて証拠サンプルを選択するための迅速なYスクリーニングと品質評価が提供されます。

リソース

クイックスタートプロトコール (1)
Supplementary Protocols (1)
テクニカルインフォメーション (2)
Quality initiatives for human identity testing and forensics 
追加リソース (1)
Application Notes (2)
Application Note Investigator Casework GO!  Kit
Application Note Skin flake isolation with the Investigator Casework GO! Kit
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Why is DTT used only for semen samples?
The DTT breaks down the protein disulfide bridges that make up the sperm nuclear membranes. Thus, DTT is always required for semen lysis.

It may also be used for all samples to keep the process simple, but it is not required to lyse blood, epithelial cells, etc. 
FAQ ID - 143761
Is it possible to use Lyse&Spin baskets?
It is possible, but modifications to the heat incubation is required because the temperature transfer to the sample might decrease due to the two plastic walls of the vessel.

This could reduce the yield and ProtK inactivation efficiency.

Note: ProtK inactivation must be done after sample collection and removal of the basket.
FAQ ID - 143762
How long are sample lysates stable in the fridge/ freezer?
Store samples at 2–8°C for storage up to 2 years, or at −30°C to −15°C for storage periods >2 years.

FAQ ID - 143765
How critical is the time of the temperature change from 60°C to 80°C?
There is no adverse effect for samples remaining in the heater during temperature increase. Nor does it make a difference if samples are kept on the bench until the heater has reached its temperature.

If only one heater shaker is available, the protocol will take a few minutes longer than the usual processing time.
FAQ ID - 143768
If 400 µl are used as lysis volume, how do I concentrate the lysate? (Otherwise the DNA would be too diluted.)
Different concentration devices are available on the market, but are not tested with the kit. Testing needs to be done first by customer.

Another helpful modification is the starting lysis volume, which can be reduced for most of the swab type to 200 µl. This helps to have higher sample concentrations.




FAQ ID - 143766
What if only one heater shaker is available?
The usage of only one heater shaker does not adversely affect the outcome.

The process will just last a few minutes longer than the usual processing time.
FAQ ID - 143764
Can the lysis volume be reduced for higher sensitivity?
The ideal lysis volume needs to be determined for each collection device.

For cotton swabs (e.g. Sarstedt Forensic swabs), 200 µl are usually sufficient.

Cuttings can be lysed with 100 µl Casework Go! Buffer depending on the size.
FAQ ID - 143763
Why is there no male DNA obtained from sexual assault samples?
DTT is not stable. The 1M solution should be stored frozen in small aliquots (50 µl) and disposed after thawing.

Repeat with freshly made DTT solution.
FAQ ID - 143767