QIAzol Lysis Reagent

RNA精製までの脂質性あるいは一般的な組織の効率的な溶解用

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QIAzol Lysis Reagent (200ml)

Cat. No. / ID:   79306

200 ml QIAzol Lysis Reagent
R$2,357.00
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QIAzol Lysis Reagentは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • 遺伝子発現解析に使用するRNA精製に至適化された溶解条件
  • 脂肪の多い組織から高収量のRNA
  • 溶解とホモジナイゼーションのための解りやすいプロトコール
  • フェノールのキャリーオーバーを回避するためのRNeasyクリーンアップを統合
  • 様々な組織タイプに対応

製品詳細

QIAzol Lysis Reagent は、脂質を多く含む組織の溶解に最適です。QIAzol標準プロトコールは、簡単な操作手順で、QIAzol による溶解と一般的なホモジナイゼーション法、エタノール沈殿を組み合わせます。

パフォーマンス

QIAzolによる組織の有機溶媒抽出によって、ゲノムDNAが効果的に除去され、ダウンストリームアプリケーションでのRNA抽出の効率が高まります。QIAzolは脂肪組織の溶解に至適化されており、特にRNeasyシリカメンブレン技術との併用で、脂肪組織から高品質のRNAを回収することができます(図" 高品質RNA")。
図参照

原理

フェノール・グアニジンをベースにしたQIAzol Lysis Reagent は、あらゆる種類の組織の溶解に使用することができますが、脳組織、脂肪組織などの脂質に富んだ組織の溶解に至適化されています。有機溶媒抽出とカオトロピック塩による破砕とを組み合わせることで、組織を効率的に溶解し、トータルRNAを高い収量で得ることができます。有機溶媒抽出ステップではタンパク質とDNAの双方が除去されることで、沈殿およびスピンカラムなどの精製ステップの効率が高まります。QIAGENでは、QIAzol による溶解とRNeasyシリカメンブレン精製テクノロジーを統合し、ひとつの簡単なプロトコールにおいて統合された効率的なRNA精製ソリューションも提供しています(あらゆる種類の組織を対象としたRNeasy Plus Universal Kitsなど)。

操作手順

QIAzol標準プロトコールはQIAzol による溶解と一般的なホモジナイゼーション法、エタノール沈殿を組み合わせた解りやすい操作手順です。組織サンプルをQIAzol Lysis Reagent中でホモジナイズし、クロロホルムを添加した後、ホモジネートを遠心操作により、水層と有機溶媒層に分離します。DNAは中間層、タンパク質は下の有機溶媒層に、そしてRNAは上の水層に分画されます。イソプロパノールを添加してRNAを水層から沈殿させ、その後にエタノールで洗浄したペレットをRNaseフリーの水で溶解します。ダウンストリームアプリケーションで良好な実験結果を得るためには、その後、混入しているフェノールを取り除き、RNAを濃縮するためにRNeasy MinElute Cleanup Kitを用いてRNAを精製することをお薦めします。

アプリケーション

フェノール・グアニジンをベースにしたQIAzol Lysis Reagent は、脳や脂肪組織のような脂質を多く含む組織の溶解に最適です。ダウンストリームアプリケーションで最高の実験結果を得るためには、RNeasy Plus Universal KitあるいはRNeasy MinElute Cleanup Kitを用いてRNAを精製することをお薦めします。

裏付けデータと数値

Publications

Visceral adiposity and endothelial lipase.
Paradis ME; Badellino KO; Rader DJ; Tchernof A; Richard C; Luu-The V; Deshaies Y; Bergeron J; Archer WR; Couture P; Bergeron N; Lamarche B;
J Clin Endocrinol Metab; 2006; 91 (9):3538-43 2006 Jun 13 PMID:16772345
Targeted gene silencing in the model mushroom Coprinopsis cinerea (Coprinus cinereus) by expression of homologous hairpin RNAs.
Wälti MA; Villalba C; Buser RM; Grünler A; Aebi M; Künzler M;
Eukaryot Cell; 2006; 5 (4):732-44 2006 Apr PMID:16607020
A comprehensive description of the transcriptome of the hypothalamoneurohypophyseal system in euhydrated and dehydrated rats.
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Proc Natl Acad Sci U S A; 2006; 103 (5):1609-14 2006 Jan 23 PMID:16432224

FAQ

What is the composition of QIAzol? What is the color of this reagent?
For proprietary reasons, the exact composition of QIAzol is confidential.  However, it does contain phenol and thiocyanate compounds.  It is pink in color.
FAQ ID - 3355
When using QIAzol Lysis Reagent for RNA extraction, I see a pinkish colored aqueous phase! Is it OK?
Yes. Depending on the starting material the aqueous phase might be colored. It will not harm the RNA extraction procedure. It may be a hint at overloading.
FAQ ID -534
Do you have a protocol for the isolation of RNA from bacterial cultures using RNAprotect Bacteria Reagent and QIAzol Lysis Reagent?
Yes, please follow the protocol in the RNAprotect Bacteria Reagent Handbook in Appendix D:  Stabilization and Purification of Bacterial RNA Using RNAprotect Bacteria Reagent, the RNeasy Lipid Tissue Mini Kit, and the TissueLyser.
FAQ ID -1020
How pure should the chloroform used with the RNeasy Plus Universal Mini Kit be?
In general, we recommend using Molecular Biology or higher grade chloroform, which should not contain isoamyl alcohol.
FAQ ID -2344
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA and/or proteins from fatty tissue treated with QIAzol?
FAQ ID -955
Do you have a protocol for purification of total RNA from fatty tissues using QIAzol Lysis Reagent and MaXtract High Density?

Yes, we have the following protocols:

  • Purification of total RNA from fatty tissues using QIAzol Lysis Reagent, MaXtract High Density, and the TissueRuptor (RY29).
  • Purification of total RNA from fatty tissues using QIAzol Lysis Reagent, MaXtract High Density, and the TissueLyser (RY30).
  • Purification of total RNA from fatty tissues using the RNeasy Lipid Tissue Mini Kit and MaXtract High Density (RY31).
FAQ ID -1550
What is the composition of Buffer RWT?
The exact composition of Buffer RWT is confidential. Buffer RWT is a proprietary component of, for example, the miRNeasy Mini Kit and the RNeasy Plus Universal Kit. Guanidine salt and ethanol are important ingredients in Buffer RWT. Ethanol is added by the user prior to the first use of the kit. Buffer RWT is a stringent washing buffer used after preclearing the sample with QIAzol Lysis Reagent, especially if isolation of small RNAs, for example, microRNAs or RNAs from formalin-fixed tissue, is desired
FAQ ID -2798
Which chloroform should I use for the RNeasy Lipid Tissue Kit?
In general we recommend to use Molecular Biology or higher grade chloroform.
FAQ ID -516
How is the RNeasy Lipid Tissue Mini Kit different from the RNeasy Mini Kit?
The RNeasy Lipid Tissue Kits have been designed for the optimal lysis of tissues rich in fat, such as brain and adipose tissues. Lysis and homogenization is performed using QIAzol, a phenol/guanidine-based lysis reagent. The RNA is then purified from the aqueous fraction using a RNeasy spin column. The RNeasy Lipid Tissue Kit combines optimal lysis of fatty tissues with silica membrane technology, resulting in high-quality total RNA.
FAQ ID -468
Can I homogenize samples in QIAzol using the QIAshredder?
Yes
FAQ ID -501
Is it possible to use a QIAzol lysate for the isolation of RNA from tissue on the BioRobot EZ1?
Yes, we recommend using the EZ1 RNA Universal Tissue Kit, containing the QIAzol Lysis Reagent, for purification of total RNA from any type of animal and human tissue on the BioRobot EZ1.
FAQ ID -573