Allprotect Tissue Reagent

組織中の DNA、RNA、タンパク質を迅速に安定化

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Allprotect Tissue Reagent (100 ml)

Cat. No. / ID:   76405

100 ml Allprotect Tissue Reagent, Allprotect Reagent Pump
Allprotect Tissue Reagentは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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特徴

  • 液体窒素やドライアイス不要
  • 採取した組織を簡便かつ即座に安定化
  • 組織を長期保存した後でも信頼できる解析を実現
  • システムバイオロジーのための標準化されたサンプル調製

製品詳細

Allprotect Tissue Reagent は組織サンプル中のDNA、RNA およびタンパク質を室温で迅速に安定化します。DNA、RNA、タンパク質のin vivo プロファイルを保持するため、信頼できるダウンストリーム解析を行なえます。安定化した組織は、15~25℃で最高7日間輸送可能、あるいは2~8℃で12ヶ月まで保存可能です。長期間の保存には、安定化した組織を–20℃あるいは–80℃で保存することができます。

パフォーマンス

採取した組織をAllprotect Tissue Reagent 中で即座に安定化することでDNA、RNA、タンパク質のin vivo プロファイルを保持できます。そのため、室温(15~25℃)で最高7日間保存した組織でも信頼できるダウンストリーム解析が行なえます(図 " ウェスタンブロット用にインタクトなタンパク質"、" タンパク質分解を防止"、 " タンパク質活性を保持")。RNAの場合に、安定化は特に重要になります。転写物の量は組織採取後に急速に変化するからです(図 " 遺伝子発現誘導を防止"、" RNA分解を防止")。Allprotect で安定化した組織から精製したRNAのAgilent 2100 Bioanalyzer による解析で高いRIN 値が得られたことはインタクトなRNA であることを示唆しています。Allprotect Tissue Reagentは、miRNAやメチル化ゲノムDNA、リン酸化タンパク質など関心が高まっている分子も安定化することが可能です。
図参照

原理

採取したばかりの組織をAllprotect Tissue Reagent 中に浸すことで、即座にDNA、RNA、タンパク質のin vivo プロファイルを保持できます。Allprotect Tissue Reagent中の組織サンプルは、凍結しなくとも安定に長期保存でき、室温では7日間まで、2~8℃では12ヶ月まで保存可能です。

本試薬はQIAGENがお届けするシステムバイオロジーのためのサンプル調製テクノロジーの1つで、貴重な同一サンプルからのDNA、RNA、タンパク質の同時精製を実現するAllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kitと組み合わせて使用できます。Allprotectで安定化した組織は、DNeasy、QIAamp、RNeasy、Qproteome KitなどのDNA、RNA、タンパク質精製用QIAGENキットとも組み合わせて使用できます。酵素アッセイに使用する機能タンパク質は、Allprotectで安定化した組織からQproteome Mammalian Protein Prep Kitを用いて精製できます。精製操作の前にサンプルを3つに分割する必要がなく、DNA、RNA、タンパク質を最も効率よく回収できます。さらに、フェノールやアセトンのような有機溶媒も不要です。同一のサンプルからDNA、RNA、タンパク質を全て調製できるため、別々のサンプルからこれらの分析物を調製する際に起こるばらつきを排除できます。

DNA、RNA、タンパク質を個別に精製するQIAGENサンプル調製テクノロジーもお届けしています(表を参照)。これらのキットにはAllprotectで安定化した組織から機能タンパク質を精製できるQproteome Mammalian Protein Prep Kitも含まれています。Allprotectで安定化しQproteome Mammalian Protein Prep Kitで精製したタンパク質は、全てのダウンストリームアプリケーションに適しています。

Allprotect Tissue Reagent と併用できるQIAGENキット
精製する生体分子 推奨するキット
ゲノムDNA、トータルRNA、トータルタンパク質 AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit
ゲノムDNA、トータルRNA AllPrep DNA/RNA Micro Kit
AllPrep DNA/RNA Mini Kit
ゲノムDNA DNeasy Blood & Tissue Kit
QIAamp DNA Mini Kit
トータル RNA RNeasy Plus Micro Kit* (少量の組織サンプル用)
RNeasy Mini Kit (溶解しやすい組織用)
RNeasy Plus Mini Kit* (溶解しやすい組織用)
RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (線維性組織用)
RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (脂肪性組織用)
RNeasy Microarray Tissue Mini Kit (マイクロアレイ解析のための組織サンプル用)
トータルタンパク質 Qproteome Mammalian Protein Prep Kit
* キットにはgDNA Eliminatorカラムを含む。

 

 

操作手順

DNA、RNA、タンパク質を即座に安定化するには、採取したばかりの組織をAllprotect Tissue Reagent に浸します(図 " Allprotect による安定化のメカニズム")。室温で安定化および精製操作を行なえるため、危険な液体窒素やドライアイスを使用する必要がありません。採取した組織をAllprotect Tissue Reagent 中で即座に安定化することでDNA、RNA、タンパク質のin vivo プロファイルを保持でき、信頼できるダウンストリーム解析が可能になります。

Allprotect Tissue Reagentにより安定化した組織は、DNA、RNAおよびタンパク質が分解することなく室温で最高7日間、2~8℃で最高12ヶ月保存可能です。長期間の保存には、安定化した組織を-20 ℃あるいは-80 ℃で保存できます。

図参照

アプリケーション

AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kitを用いて、Allprotect で安定化した組織からDNA、RNA、タンパク質を同時に精製できます。Allprotect とAllPrep サンプル調製テクノロジーを組み合わせて使用することによりシステムバイオロジーにおけるサンプル調製を標準化できます。AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit を用いて精製したゲノムDNA およびトータルRNAで全てのダウンストリームアプリケーションで最適な結果が得られます。アプリケーションにはリアルタイムPCRやRT-PCR解析が含まれています。本キットを用いて精製したトータルタンパク質はSDS-PAGE およびウェスタンブロットに最適です。

裏付けデータと数値

リソース

サイエンティフィック・ポスター (1)
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
キットハンドブック (2)
For immediate stabilization of DNA, RNA, and proteins in animal and human tissues, and subsequent storage
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Gene Expression Analysis (1)
Kit Handbooks (2)
For immediate stabilization of DNA, RNA, and proteins in animal and human tissues, and subsequent storage

Publications

[The problem of tooth substitution].
Huber E;
Zahnarztl Mitt; 1975; 65 (1):1-2 1975 Jan 1 PMID:1096487

FAQ

Can Allprotect Tissue Reagent be used to stabilize RNA, DNA and proteins in cells, bacteria, yeast, and plants?

Allprotect Tissue Reagent is optimized to protect RNA, DNA, and proteins in humans and animal tissues. However, Allprotect can also be used with plant tissues. If the plants leaves are waxy, the surface of the leaves can be scratched to allow Allprotect reagent to permeate the tissue.

FAQ ID -1574
Can tissue incubated in Allprotect Tissue Reagent be used for morphological studies?

No, we do not recommend performing morphological studies with tissues that were incubated in Allprotect Tissue Reagent. The reagent causes the tissue to shrink and therefore changes its morphology.

 

FAQ ID -1571
Which homogenization method do you recommend for tissues stored in Allprotect Tissue Reagent?

We recommend using either the TissueRuptor or the TissueLyser for homogenization of tissues stored in Allprotect Tissue Reagent.

Since tissues incubated in Allprotect Tissue Reagent are harder than fresh tissues, longer homogenization times might be necessary (for details, see the Allprotect Tissue Reagent Handbook).

Furthermore, we do not recommend using rotor–stator homogenizers with a metal probe (e.g., Polytron) if proteins will be purified subsequently, as the metal probe can heat the sample.

 

FAQ ID -1572
Does residual Allprotect Tissue Reagent left behind on tissue samples interfere with DNA, RNA, and protein purification?

No. Allprotect Tissue Reagent remains on the sample due to its viscosity. We recommend removing excess reagent by dabbing or rolling the sample over a paper towel.

However, residual Allprotect Tissue Reagent on the sample inhibits neither DNA, RNA, and/or protein purification, nor downstream applications.

 

FAQ ID -1573
Can samples in Allprotect Tissue Reagent undergo repeated freeze-thaws without degradation of DNA, RNA, and protein?

In general, yes. Freezing and thawing a sample incubated in Allprotect Tissue Reagent several times does not affect analysis of RNA and protein in downstream applications.

However, if you would like to perform protein activity assays, you should test each specific assay, since several freeze–thaw cycles might reduce protein activity, depending on the protein being assayed.

 

FAQ ID -1575