Q-Solution Kit

• Limite le transfert des inhibiteurs de PCR comme l’éthanol, l’héparine et d’autres inhibiteurs potentiels 
• Utile pour les réactions contenant des matrices d’acides nucléiques de structures secondaires complexes 
• Améliore les réactions avec transfert de chélateurs de magnésium de type EDTA 
• Compatible avec les kits et instruments QIAGEN pour dPCR, PCR en point final et qPCR

Le Q-Solution Kit est conçu pour améliorer les conditions des réactions de qPCR et dPCR complexes. Ce kit contient 5 × Q-Solution et 25 mM de MgCl₂, qui peuvent être utilisés individuellement ou associés à d’autres éléments. Vous pouvez si nécessaire titrer la plage de concentration des deux solutions.

Limitez les effets des inhibiteurs de PCR 

La Q-Solution est un additif pour PCR innovant et polyvalent, il peut être utilisé avec n’importe quel QIAcuity Master Mix. Les propriétés spécifiques de la Q-Solution (Illustration 1) limitent le transfert des inhibiteurs tels que l’alcool résiduel, l’héparine, les acides humiques et d’autres agents importants susceptibles de compromettre la réaction de PCR. 

Optimisez l’affinité de liaison des amorces 

Si vous trouvez qu’une liaison médiocre des amorces ou des sondes freine les performances de la PCR, essayez d’ajouter du MgCl₂ à votre réaction. 

Compatible avec de nombreux Master Mix pour dPCR et qPCR 

Des conditions de PCR difficiles sont toujours possibles avec une réaction de dPCR, PCR en point final ou qPCR, ce qui compromet le débit, la reproductibilité et la sensibilité. Quelle que soit l’application, il est avéré que le Q-Solution Kit peut améliorer les réactions de dPCR, PCR en point final et qPCR, parfois après un simple titrage des deux composants. 

En abaissant la température de fusion de l’ADN, la Q-Solution peut éliminer les difficultés liées à un ADN présentant un taux élevé de GC ou des structures secondaires complexes, comme celui que l’on trouve dans le génome d’un virus adéno-associé (VAA). Ce kit améliore en outre l’efficacité de la PCR en présence d’inhibiteurs. L’ajout de MgCl₂ est facultatif et empêche l’échec de la PCR imputable aux agents chélateurs comme l’EDTA. En tant que co-facteur essentiel de l’ADN polymérase, le MgCl₂ peut stabiliser les structures d’ADN double brin, y compris celles formées entre les amorces et la matrice. Vous trouverez ici une description du principe de la réaction de dPCR sur nanoplaque. 
 

Le protocole est simple et peut être appliqué dans n’importe quel laboratoire équipé du QIAcuity Digital PCR System. Comme l’indiquent les consignes figurant dans le manuel d’utilisation, l’utilisateur peut préparer le mélange réactionnel comme d’habitude puis ajouter la Q-Solution et le MgCl₂ comme indiqué dans le protocole de démarrage rapide. Le mélange est pipetté dans la nanoplaque. Nous vous recommandons de titrer la Q-Solution et le MgCl₂ avant la première utilisation, vous trouverez ainsi la concentration optimale pour votre réaction. 

Le Q-Solution Kit est tout à fait adapté à diverses réactions de dPCR sur le QIAcuity, comme aux réactions de PCR en point final et de qPCR. Pour d’autres exemples d’application, consultez notre note d’application dans la section « Ressources ».