Certal Residual DNA Detection Kits

• Limite de quantification basse avec une excellente reproductibilité
• Plage linéaire élevée
• Contrôle interne fiable et précis
• Protocoles optimisés pour une large plage de thermocycleurs en temps réel
• Kits complets comprenant le contrôle interne et le contrôle positif

Lorsque l’on travaille avec des produits biopharmaceutiques, il est essentiel d’évaluer le matériel thérapeutique final pour s’assurer qu’il est exempt de substances contaminantes, telles que l’ADN résiduel de la cellule hôte. Les Certal Residual DNA Detection Kits sont conçus pour une quantification sensible et rapide par real-time PCR de l’ADN génomique résiduel de la cellule hôte à l’aide de sondes d’hydrolyse doublement marquées (également connues sous le nom de TaqMan®). Le Certal CHO Detection Kit contient des réactifs pour la détection par real-time PCR duplex de l’ADN résiduel des cellules hôtes CHO, ainsi que le contrôle interne Certal. Le kit comprend également le contrôle positif Certal Residual DNA, qui vérifie la fonctionnalité du dosage PCR en l’absence d’un signal provenant de l’ADN de la cellule hôte CHO, et 2 formats de colorant de référence passif ROX à différentes concentrations, permettant une utilisation sur pratiquement n’importe quel appareil en temps réel.

Les Certal Residual DNA Detection Kits permettent une détection et une quantification sensibles et fiables de l’ADN génomique résiduel (ADNg), ce qui est essentiel pour la production de produits biopharmaceutiques sûrs et fiables (voir figure «  Détection très sensible et fiable »). Le Certal CHO Detection Kit détecte l’ADNg résiduel des cellules ovariennes de hamster chinois (CHO) avec une limite de détection basse et une plage linéaire élevée, garantissant une détection fiable même de faibles niveaux d’ADNg résiduel (voir figure «  Limite inférieure de détection »). Les Certal Residual DNA Detection Kits sont compatibles avec une large plage de thermocycleurs, fournissant des données sensibles et fiables (voir figures «  Détection sensible et fiable sur un grand nombre de thermocycleurs » et «  Détection sensible et fiable de l’ADN génomique de CHO sur le Rotor‑Gene Q »).

Pour une grande sécurité du processus, les Certal Residual DNA Detection Kits intègrent le contrôle interne QIAGEN, qui est spécifiquement conçu pour l’interprétation correcte des résultats négatifs et ne pas interférer avec le dosage cible. Le contrôle interne QIAGEN est détecté de manière fiable lorsqu’il est coamplifié avec de l’ADN génomique (voir figure «  Détection fiable du contrôle interne QIAGEN »).

Les Certal Residual DNA Detection Kits permettent de s’assurer que les substances contaminantes provenant de la lignée cellulaire hôte utilisée pour produire des produits biopharmaceutiques sont absentes du matériel thérapeutique final, grâce à un dosage prédéfini permettant de détecter spécifiquement l’ADN de la cellule hôte CHO. Chaque Certal Residual DNA Assay est composé d’une paire d’amorces optimisée et d’une sonde d’hydrolyse marquée au FAM pour une détection fiable de l’ADN génomique résiduel de CHO. L’ADN de fond humain et l’ADN de contrôle interne Certal n’interfèrent pas avec le dosage de l’ADN résiduel Certal.

Le Certal Internal Control Assay prémélangé contient une amorce avant et arrière et une sonde d’hydrolyse marquée au MAX pour la détection de l’ADN de contrôle interne Certal. Il a été spécifiquement optimisé pour éviter toute interférence avec les Certal Residual DNA Assays. Le Certal Residual DNA Positive Control permet d’interpréter correctement les résultats négatifs en testant la fonctionnalité de la réaction d’amplification elle-même.

Le Certal ResDNA PCR Buffer a été optimisé pour fournir des résultats quantitatifs sensibles et fiables de la real-time PCR. Le mélange principal contient également du dUTP, ce qui permet un prétraitement à l’uracil-N-glycosylase (UNG) avant le début de la PCR, avec pour objectif de garantir que les produits de PCR contaminés n’affectent pas les réactions de PCR ultérieures.

Les Certal Residual DNA Detection Kits proposent une procédure simple pour la détection de l’ADN de la cellule hôte, du contrôle interne Certal et du contrôle positif d’ADN résiduel Certal (voir figure «  Procédure du kit de détection d’ADN résiduel Certal »). Il suffit de mélanger le mélange principal fourni avec le Certal Residual DNA Assay, le Certal Internal Control Assay et le Certal Internal Control DNA, puis d’ajouter l’ADN de votre échantillon ou le Certal Residual DNA Positive Control. Le manuel du kit contient des protocoles optimisés pour une utilisation sur un grand nombre de thermocycleurs. Le colorant ROX est fourni dans 2 tubes de concentrations différentes, ce qui permet de l’utiliser sur n’importe quel appareil en temps réel (voir le tableau « Choix de la concentration correcte de ROX »).

Les Certal Residual DNA Detection Kits permettent unereal-time PCR sensible à l’aide de sondes propres à la séquence pour la détection de l’ADN de la cellule hôte, y compris un contrôle interne. Les kits peuvent être utilisés sur un grand nombre de thermocycleurs en temps réel, notamment les thermocycleurs de QIAGEN, Applied Biosystems, Bio-Rad, Roche et Agilent.