Strep-Tactin Superflow Plus

• Capacité de liaison multipliée par trois (jusqu’à 9 mg/ml)
• Idéal pour la purification à partir de systèmes procaryotes et eucaryotes
• Permet la purification automatisée sur n’importe quel système de chromatographie liquide
• Influence minime sur la structure, le fonctionnement et l’immunogénicité des protéines

Le petit Strep-tag II (WSHPQFEK) peut être utilisé pour purifier des protéines actives de conformation native sur des résines Strep-Tactin. Il peut aussi être utilisé avec l’étiquette His dans une procédure standardisée de purification en deux étapes. La Strep-Tactin existe sous forme de résine de chromatographie Superflow pour une purification à grande échelle (jusqu’à 9 mg/ml). La résine Strep-Tactin existe également en cartouches préremplies pour la purification automatisée sur des systèmes de chromatographie liquide.

La Strep-Tactin Superflow Plus permet une purification très efficace des protéines (voir les illustrations  Purification efficace de la GFP marquée à la streptavidine avec Strep-Tactin Superflow Plus et  Détection hautement spécifique de protéines marquées à la streptavidine sur tout système d’expression).

Pendant ce temps, les pQE TriSystem His Strep TriSystem Vectors peuvent être utilisés pour exprimer des protéines doublement marquées avec un His-tag et un Strep-tag, qui sont purifiés dans une procédure d’affinité en deux étapes. Les étapes consécutives de purification Ni-NTA et Strep-Tactin sont standardisées, très rapides et donnent des protéines infiniment pures.

Les protéines marquées à la streptavidine se lient avec une affinité et une spécificité fortes au Strep-Tactin, une forme de streptavidine de synthèse (voir le tableau Capacités de liaison des protéines des matrices de Strep-Tactin). Après le lavage, les protéines sont éluées avec de faibles concentrations de biotine (le ligand naturel de la streptavidine) ou de desthiobiotine (un analogue de la biotine stable et de liaison inverse, voir l’illustration  Liaison des protéines marquées à la streptavidine au Strep-Tactin et élution à la desthiobiotine). Le marquage des protéines avec le petit Strep-tag II permet une purification efficace et standardisée des protéines recombinantes exprimées dans les systèmes procaryotes et eucaryotes, et donne des protéines particulièrement pures. De plus, le Strep-tag II est le système à privilégier dans les cas où d’autres étiquettes peuvent être inadaptées, par exemple lorsque les additifs ajoutés au tampon comme l’EDTA peuvent abîmer les colonnes IMAC.

Les protéines marquées à la streptavidine sont exprimées à l’aide du pQE TriSystem Vector et extraites avec une grande pureté à partir de lysats cellulaires avec les procédures de purification par affinité Strep-Tactin Superflow Plus. Les protéines marquées à la streptavidine peuvent être purifiées suivant la méthode discontinue ou par gravité, ou bien des colonnes compatibles avec la FPLC peuvent être remplies de Strep-Tactin Superflow Plus pour la purification sur des systèmes de chromatographie liquide. Le Strep-Tactin Superflow Plus existe en cartouches de 5 ml pour la purification automatisée sur des systèmes de chromatographie liquide de type FPLC, ÄkTA et BioLogic, ou pour la purification manuelle à l’aide d’une seringue. Pour connaître les réactifs compatibles avec les résines Strep-Tactin, consultez le tableau Réactifs compatibles avec l’interaction Strep-tag/Strep-Tactin.

Grâce à l’emplacement C-terminal de l’étiquette, seules les protéines de pleine longueur sont purifiées. Le processus de purification est hautement reproductible, ce qui garantit une qualité optimale constante des préparations des protéines. Des anticorps monoclonaux Strep-tag sont utilisés pour détecter les protéines marquées à la streptavidine dans des procédures d’immunodétection avec une sensibilité et une spécificité élevées.

Le Strep-Tactin Superflow Plus peut être utilisé pour une purification performante et reproductible de 9 mg maximum de protéines marquées à la streptavidine par ml de résine. Les protéines purifiées peuvent être utilisées pour :

• Études des fonctionnements ou des interactions
• Dépistage par cristallisation
• Analyse des structures
• Génération d’anticorps