QIAamp DSP Circulating NA Kit

• Acides nucléiques concentrés ; haut rendement, faibles volumes d’élution
• Extraction performante de l’ADN et de l’ARN
• Pas d’extraction organique ni de précipitation à l’éthanol
• Élimination des contaminants et des inhibiteurs
• Pour une utilisation diagnostique in vitro

Le QIAamp DSP Circulating NA Kit est destiné à l'extraction et la purification de l’ADN et l’ARN libres circulants à partir de plasma pour une utilisation diagnostique in vitro.

Le QIAamp DSP Circulating NA Kit propose une procédure de diagnostic facile à utiliser, il respecte les règles des bonnes pratiques de fabrication (BPF). La procédure consiste à isoler et purifier les acides nucléiques de haute qualité pour être utilisés dans des applications en aval. La concentration en acides nucléiques libres circulants dans le plasma sanguin humain est généralement faible et varie considérablement d’un individu à l’autre, dans une plage de 1 à 100 ng/ml dans les échantillons humains. Les acides nucléiques sont efficacement purifiés et concentrés à partir d’un matériel de départ qui contient de faibles concentrations d’ADN et d’ARN principalement fragmenté (habituellement de 1 à 100 ng/ml d’ADN circulant dans le plasma humain).

Le QIAamp DSP Circulating NA Kit simplifie l’isolement de l’ADN et l’ARN circulant à partir d’échantillons de plasma en omettant les extractions au phénol-chloroforme. Les acides nucléiques se lient spécifiquement aux colonnes QIAamp Mini tandis que les contaminants sont éliminés. Les inhibiteurs de PCR sont entièrement éliminés lors des étapes de lavage, laissant des acides nucléiques purs pour l’élution avec le tampon fourni.

Le QIAamp DSP Circulating NA Kit associe les propriétés de liaison sélective d’une membrane à base de silice à la flexibilité des volumes d’élution entre 20 µl et 150 µl.

Des extensions de colonne et un traitement sous vide sur le QIAvac 24 Plus permettent des volumes de matériel de départ pouvant aller jusqu’à 5 ml (figure  Extensions de colonne pour traitement sur le QIAvac 24 Plus). Des volumes d’élution flexibles, entre 20 µl et 150 µl, permettent une concentration d’acides nucléiques présentes en faibles concentrations.

La procédure QIAamp DSP Circulating NA comprend 4 étapes (lyse, liaison, lavage et élution), réalisées à l’aide des colonnes QIAamp Mini sur une rampe à vide. Cette procédure simple est particulièrement adaptée au traitement simultané de plusieurs échantillons. Les acides nucléiques sont purifiés et concentrés de façon performante (figure  Procédure avec le QIAamp DSP Circulating NA Kit). En outre, le QIAamp DSP Circulating NA Kit propose deux protocoles distincts : classique et rapide (figure  Comparaison des procédures classique et rapide). Le protocole classique permet de traiter jusqu’à 5 ml de plasma par incréments de 1 ml, il est identique au protocole figurant dans le manuel du QIAamp DSP Circulating NA Kit, version 1, révision 3 (R3). Le protocole rapide permet de traiter jusqu’à 5 ml de plasma par incréments de 1 ml mais il a été optimisé pour réduire le temps de manipulation et d’exécution.

Extraction ADN circulant (ccfDNA) purifié à l’aide du QIAamp DSP Circulating NA Kit pouvant être utilisé dans de nombreuses applications en aval, notamment le NGS, la RT-PCR, la PCR digitale, la PCR multiplexe et la PCR quantitative.