QIAquick Nucleotide Removal Kit

• Jusqu’à 95 % de récupération d’ADN prêt à l’emploi
• Procédure rapide et pratique
• Nettoyage d’ADN jusqu’à 10 kb en trois étapes simples
• Colorant de chargement gélifié pour simplifier l’analyse d’échantillon

Le QIAquick Nucleotide Removal Kit contient des colonnes de centrifugation, tampons et tubes de prélèvement pour la purification sur membrane de silice d’oligonucléotides et d’ADN. Les nucléotides non incorporés, les sels et autres contaminants sont éliminés puis les oligonucléotides (> 17 nt) et les fragments d’ADN de 40 pb à 10 kb sont purifiés par une procédure simple et rapide de liaison-lavage-élution, avec un volume d’élution de 30 à 200 µl. La procédure est entièrement automatisée sur le système QIAcube Connect.

La procédure QIAquick Nucleotide Removal permet d’éliminer les nucléotides, les enzymes, les sels et d’autres impuretés des échantillons d’ADN (voir l’illustration «  Élimination complète des nucléotides dans les oligonucléotides marqués »). À l’aide d’une microcentrifugeuse, vous purifiez 17 mères à 10 kb d’ADN. Pour des volumes d’échantillon inférieurs à 50 µl, vous pouvez aussi utiliser le DyeEx Spin Kit.

Les QIAquick Kits contiennent une membrane de silice permettant la liaison de l’ADN dans un tampon de forte salinité et l’élution avec un tampon de faible salinité ou de l’eau. La procédure de purification permet d’éliminer les amorces, les nucléotides, les enzymes, l’huile minérale, les sels, l’agarose, le bromure d’éthidium et d’autres impuretés des échantillons d’ADN (voir l’illustration «  Élimination complète des nucléotides dans les oligonucléotides marqués »). La technologie à membrane de silice permet d’écarter les problèmes liés aux résines et aux bouillies non homogènes. Des tampons de liaison spéciaux sont optimisés pour des applications spécifiques et favorisent l’adsorption sélective de molécules d’ADN de tailles bien précises.

Colorant de chargement gélifié

Afin de faciliter un traitement et une analyse plus rapides et pratiques des échantillons, un colorant de chargement gélifié est fourni. Le colorant de chargement GelPilot contient trois colorants de suivi (xylène cyanol, bleu de bromophénol et orange G) pour faciliter l’optimisation du temps d’exécution du gel d’agarose et empêcher les petits fragments d’ADN de migrer trop loin (voir l’illustration «  Colorant de chargement GelPilot »).

Le système QIAquick utilise une procédure simple de liaison–lavage–élution (voir le schéma «  Procédure QIAquick Nucleotide Removal »). Le tampon de liaison est ajouté directement à l’échantillon puis le mélange est appliqué à la colonne de centrifugation QIAquick. Les acides nucléiques se fixent à la membrane de silice dans les conditions de forte salinité du tampon. Les impuretés sont éliminées et l’ADN pur est élué dans un petit volume de tampon de faible salinité ou d’eau, prêt à être utilisé dans toutes les autres applications.

Manipulation

Les QIAquick Spin Columns offrent deux possibilités de manipulation pratiques. Ces colonnes de centrifugation peuvent être insérées dans une microcentrifugeuse de paillasse classique. Le QIAquick Nucleotide Removal Kit, tout comme d’autres kits QIAGEN avec colonnes de centrifugation, peut être entièrement automatisé sur le QIAcube Connect, cela permet d’accroître la productivité et de standardiser les résultats (voir les illustrations « Possibilités de manipulation des colonnes de centrifugation  A » et «  QIAcube Connect »).

Les fragments d’ADN purifiés avec le système QIAquick peuvent s’utiliser directement dans toutes les applications, y compris le séquençage, l’analyse de puce à ADN, la ligature et la transformation, la digestion par enzymes de restriction, le marquage et la micro-injection.