MinElute 96 UF PCR Purification Kit

• Très faibles volumes d’élution
• Procédure rapide et manipulation facile
• Récupérations importantes et reproductibles

Le MinElute 96 UF PCR Purification Kit contient des plaques à 96 puits permettant la purification par ultrafiltration à haut débit de produits de PCR ≥ 100 pb. Les plaques sont conçues pour permettre l’élution dans de très faibles volumes (de l’ordre de 20 μl), ce qui donne des rendements élevés d’ADN hautement concentré. La procédure peut être automatisée sur le système universel BioRobot. Les fragments d’ADN purifiés avec le système MinElute peuvent s’utiliser directement dans diverses applications, y compris le séquençage, l’analyse de puce à ADN, la ligature et la transformation, la digestion par enzymes de restriction, le marquage, la micro-injection, la PCR et la transcription in vitro. Le MinElute 96 UF PCR Purification Kit implique d’utiliser le QIAvac Multiwell Vacuum Manifold (n° de réf. 9014579).

Ce produit doit être utilisé avec le QIAvac Multiwell.

Le MinElute 96 UF PCR Purification Kit permet une purification par PCR à haut débit dans des plaques à 96 puits. Le traitement entièrement automatisé est réalisé pour 1 à 8 × 96 échantillons sur le système universel BioRobot ou pour 1 × 96 échantillons sur le QIAvac Multiwell Manifold (n° de réf. 9014579, qui nécessite une rampe à vide adaptée, p. ex. le QIAvac Multiwell Manifold, agitateur de plaques recommandé). La procédure permet de purifier un ADN ≥ 100 pb avec une récupération de 80 à 95 %. Les produits de PCR purifiés sont élués directement à partir de la surface de la membrane dans de faibles volumes (de l’ordre de 20 µl dans la procédure manuelle ou 30 µl sur les BioRobot Workstations), donnant ainsi des éluats hautement concentrés (voir l’illustration «  Éluats d’ADN hautement concentrés ») qui peuvent être utilisés directement dans de nombreuses applications en aval. Il est possible de traiter des volumes d’échantillons de PCR jusqu’à 150 µl avec une procédure manuelle ou entièrement automatisée.

Le QIAGEN MinElute 96 UF PCR Purification Kit présente à la fois l’avantage de la technologie à plusieurs puits et les propriétés de séparation d’une membrane d’ultrafiltration de conception unique. Les plaques permettent de récupérer rapidement et efficacement des fragments d’ADN double brin ≥ 100 pb et d’éliminer les amorces (< 20 mères), les nucléotides non incorporés et les sels.

Les MinElute 96 UF PCR Purification Kits proposent la technologie d’ultrafiltration avec purification sous vide sur les rampes à vide QIAvac (voir le schéma «  Procédure MinElute 96 UF PCR Purification »). Les produits de PCR sont chargés dans les puits des plaques d’ultrafiltration puis un vide est appliqué. Alors que les fines molécules comme les amorces, les sels et les nucléotides non incorporés traversent la membrane, les produits de PCR ≥ 100 pb sont retenus dessus. Pour l’élution, vous pouvez utiliser de l’eau, du diméthyl sulfoxide (DMSO) ou des tampons de type citrate de sodium salin (SSC). La procédure MinElute 96 UF PCR Purification peut aussi être automatisée sur le système universel BioRobot.

Les fragments d’ADN purifiés à l’aide du système MinElute 96 UF peuvent s’utiliser directement dans de nombreuses applications, notamment :

• Séquençage
• Analyse de puce à ADN
• Ligature et transformation
• Digestion par enzymes de restriction
• Marquage