Afin de garantir une sensibilité maximale, les kits artus EBV ont été optimisés de manière à détecter l’ADN de l’EBV en faible quantité. La sensibilité analytique du kit artus EBV QS-RGQ est de 157 copies/ml compte tenu de la purification à partir du plasma EDTA et de la préparation de la PCR réalisées sur le système QIAsymphony RGQ (voir figure « Détection très sensible de l’ADN de l’EBV »). (2)
Kit | artus EBV RG PCR | artus EBV QS-RGQ |
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Types d’échantillons validés | Plasma humain, sérum, LCR ou cellules sanguines | Plasma EDTA ou sang total |
Sensibilité analytique | 1,02 copies/µl en PCR (Rotor-Gene 6000) | 157 copies/ml compte tenu de la purification à partir du plasma |
Intervalle de linéarité | n. d. | 316 à 1,00 x 107 copies/ml (plasma) |
Les kits artus EBV se fondent sur l’amplification et la détection simultanées d’une région spécifique du génome de l’EBV à partir d’une PCR en temps-réel. Ils permettent des niveaux élevés de spécificité, de sensibilité (voir figure « Détection très sensible de l’ADN de l’EBV ») et de reproductibilité. (1-5)
Chacun des kits artus EBV inclut 4 standards de quantification d’EBV (voir figure « Quantification fiable de la charge d’EBV »). Le recours à des standards permet une quantification précise de la charge virale. Par ailleurs, les kits incluent un second système d’amplification hétérologue destiné à l’identification de toute inhibition possible de la PCR. Cette détection s’effectue par le biais d’un contrôle interne dans un canal de fluorescence distinct de celui de la PCR analytique. La limite de détection de la PCR analytique de l’EBV n’est pas réduite. (1-5)
Kit | artus EBV RG PCR | artus EBV QS-RGQ |
---|---|---|
Types d’échantillons validés | Plasma humain, LCR ou cellules sanguines | Plasma EDTA ou sang total |
Amplicon | Région de 97 paires de bases du gène EBNA-1 | Région de 97 paires de bases du gène EBNA-1 |
Les kits artus EBV PCR incluent tous les réactifs nécessaires, optimisés pour une détection et une quantification fiables de l’ADN de l’EBV. Il suffit d’ajouter de l’ADN matrice au master mix PCR prêt à l’emploi et de lancer la réaction sur le thermocycleur en temps réel approprié à l’aide du programme de cycle optimisé décrit dans le manuel du kit. (1-5)
Le profil de température des kits artus EBV RG PCR et artus EBV QS-RGQ correspond aux profils des kits artus RG PCR et artus QS-RGQ pour le BK virus, CMV, HSV-1/2 et VZV (2, 3). Le profil de température du kit artus EBV LC PCR correspond aux profils des kits artus LC PCR pour HSV-1/2, VZV et CMV (4). Par conséquent, ces tests de PCR peuvent être réalisés et analysés en une seule étape.
La chaîne complète QIAsymphony RGQ pour la détection de l’EBV se compose du module QIAsymphony SP pour la préparation des échantillons, du module QIAsymphony AS pour la préparation des réactions d’amplification, et du kit artus EBV QS-RGQ pour la détection sur l’instrument Rotor-Gene Q. Ce système intégré permet la détection fiable des agents pathogènes par l’intermédiaire d’une procédure de travail complète certifiée CE-IVD (voir figure « Système intégré QIAsymphony RGQ pour la détection de l’EBV »). (1)
Les kits artus EBV LC, RG et TM PCR ont été validés pour une utilisation avec le kit QIAamp DNA Mini, le kit QIAamp UltraSens Virus, le kit QIAamp DNA Blood Mini ou le kit EZ1 DSP Virus. Le kit artus EBV RG PCR est également disponible en tant que kit EASYartus EBV RG PCR conforme au marquage CE-IVD, notamment en tant que kit EZ1 DSP Virus pour la purification automatisée de l’acide nucléique viral. (3-5)
Les kits artus EBV LC, RG et TM PCR permettent une détection rapide et sensible de l’ADN de l’EBV dans le sérum, le plasma, le liquide céphalo-rachidien (LCR) et les cellules sanguines. Les kits sont disponibles sur les instruments ABI PRISM 7000, 7700 et 7900HT SDS, LightCycler 1.1/1.2/1.5/2.0 ou Rotor-Gene Q. (3-5)
Le kit artus EBV QS-RGQ est validé pour une utilisation avec du plasma EDTA ou du sang total et destiné à une utilisation avec le système QIAsymphony RGQ, offrant une procédure de travail complète conforme au marquage CE-IVD, de l’échantillon à la détection et à la quantification de l’ADN de l’EBV. (1)