DNeasy mericon Food Kit

• La modification de la procédure au CTAB assure un traitement rapide des échantillons alimentaires
• Purification efficace d’ADN même fragmenté à partir d’aliments transformés
• Aucun transfert d’inhibiteurs de PCR à partir de matrices alimentaires complexes
• Protocoles pour les aliments ultratransformés

Le DNeasy mericon Food Kit est conçu pour permettre l’extraction d’acides nucléiques de haute qualité à partir de nombreux aliments crus et transformés. Le transfert d’inhibiteurs de PCR à partir de ces matrices alimentaires complexes est limité. Ce kit fait partie de la gamme complète de tests alimentaires QIAGEN, qui comprend également des dosages destinés à la détection d’agents pathogènes et d’ADN d’OGM et à l’authentification d’ingrédients. La procédure peut être entièrement automatisée sur le QIAcube Connect.

Le DNeasy mericon Food Kit utilise l’extraction au bromure de cétyltriméthylammonium (Cetyltrimethylammonium bromide, CTAB) d’acides nucléiques cellulaires totaux.

Détergent non ionique, le CTAB est largement utilisé pour l’extraction efficace d’acides nucléiques cellulaires totaux à partir de nombreux types de tissus. En fonction des conditions de salinité, le CTAB peut former un complexe avec les acides nucléiques cellulaires (conditions de faible salinité) ou avec des inhibiteurs cellulaires, comme les polysaccharides, les protéines et les métabolites végétaux (conditions de forte salinité, comme dans le tampon de lyse alimentaire).

Avec moins d’étapes de procédure que les protocoles avec CTAB classiques, vous pouvez traiter jusqu’à 30 échantillons en 2,5 heures (voir l’illustration « Extraction performante et rapide d’ADN »). La récupération d’ADN avec ces kits est très élevée et performante.

Les protocoles optimisés du DNeasy mericon Food Kit utilisent du CTAB associé à de la protéinase K d’abord pour digérer les tissus compacts, ensuite pour précipiter les protéines avec la précipitation simultanée d’autres inhibiteurs cellulaires et alimentaires.

Les inhibiteurs sont précipités par centrifugation tandis que l’ADN extrait reste dans la solution. Dans l’extraction au chloroforme qui suit, tout complexe CTAB-protéine, CTAB-débris ou CTAB-polysaccharide non précipité restant est retiré, avec d’autres inhibiteurs lipophiles, par extraction dans la phase organique du chloroforme. Seule la phase aqueuse contenant l’ADN et des inhibiteurs fortement appauvris est ensuite traitée. Cette phase est mélangée avec un tampon de liaison (pour ajuster les conditions de liaison) et ajoutée dans les QIAquick Spin Columns. L’ADN obtenu est immédiatement prêt à l’emploi dans un dosage mericon par PCR en temps réel en aval.