Investigator IDplex Plus Kit

Pour l’amplification multiplexe de 13 locus principaux du CODIS, plus D2S1338, D19S433 et amélogénine, et directement à partir d’écouvillons et de papiers

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Investigator IDplex Plus Kit (100)

Cat. No. / ID:   381625

Mélange d’amorces, Fast Reaction Mix avec HotStarTaq Plus DNA Polymerase, ADN de contrôle, échelle allélique IDplex Plus, ADN taille standard 550 (BTO) et eau sans nucléase
KitAccessories
Investigator IDplex Plus
Matrix Standard
Reactions
100
400
Les Investigator IDplex Kits sont destinés à des applications de biologie moléculaire, en criminalistique, identification humaine et recherche de paternité. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement d’une maladie. Ces produits ne sont pas proposés dans tous les pays.

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Caractéristiques

  • Amplification simultanée de 16 locus, dont les principaux du CODIS
  • Parfaitement adapté aux échantillons médico-légaux ou de référence
  • Protocoles simples avec Fast Reaction Mix prêt à l’emploi
  • Conception optimisée des amorces afin de réduire le chevauchement de marqueurs

Détails produit

Le Investigator IDplex Plus Kit est un dosage STR multiplexe destiné à l’identification humaine, il est capable de détecter les 13 locus principaux du CODIS (Combined DNA Index System – Fichier d’empreintes génétiques), le D2S1338, le D19S433 et l’amélogénine.

Ce kit exploite notre technologie à cycle court, qui permet de réaliser une amplification en 90 minutes environ. Particulièrement sensible avec des résultats rapides et fiables à partir d’ADN d’empreinte, le Investigator IDplex Plus Kit est adapté à toutes les applications de criminalistique et à la recherche de paternité. L’analyseur génétique est étalonné avec la matrice BT5.

Le Investigator IDplex Kit est conforme à la norme ISO 18385.

Performances

Le Investigator IDplex Kit exploite la technologie à cycle court, il donne des résultats fiables des dosages STR en 90 minutes environ à partir d’ADN extrait.

Le Fast Reaction Mix est basé sur la technologie QIAGEN éprouvée de PCR multiplexe qui a été optimisée pour augmenter la tolérance aux inhibiteurs. Les dosages testés avec des concentrations accrues de 6 types d’inhibiteurs (acide humique, hématine, acide tannique, carmin d’indigo, calcium et collagène) ont montré une grande sensibilité et une résistance supérieure aux inhibiteurs. Cela permet d’obtenir des résultats fiables et de grande qualité à partir d’échantillons médico-légaux.

Le Investigator IDplex Kit est validé et évalué avec le thermocycleur GeneAmp 9700 et le Applied Biosystems 3500 Genetic Analyzer.

En conditions standard, la quantité recommandée d’ADN à utiliser avec le Investigator IDplex Plus Kit est de 0,5 ng. Des validations en interne ont démontré des résultats probants obtenus avec 0,2 à 2 ng d’ADN et des résultats fiables avec < 0,1 ng d’ADN.

Principe

Le Investigator IDplex Kit exploite la technologie à cycle court QIAGEN pour l’amplification rapide et simultanée des 13 locus principaux du CODIS (Combined DNA Index System – Fichier d’empreintes génétiques), du D2S1338, du D19S433 et de l’amélogénine. Des amorces soigneusement conçues réduisent le chevauchement des allèles des locus, ce qui limite la probabilité d’une interprétation erronée.

Procédure

Les 15 marqueurs STR autosomiques polymorphes (D2S1338, D3S1358, D5S818, D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D19S433, D21S11, CSF1PO, FGA, TH01, TPOX et vWA) et l’amélogénine sexospécifique sont amplifiés simultanément au cours d’une même PCR puis marqués avec l’un des colorants répertoriés dans le tableau « Colorants du Investigator IDplex Plus Kit et marqueurs correspondants ».

 

Colorants du Investigator IDplex Plus Kit et marqueurs correspondants
Colorant Marqueur
6-FAM Amélogénine TH01 D3S1358 vWA D21S11
BTG TPOX D7S820 D19S433 D5S818 D2S1338
BTY D16S539 CSF1PO D13S317 FGA  
BTR D18S51 D8S1179      

Les locus amplifiés sont ensuite soumis à une électrophorèse capillaire. Vous pouvez analyser les résultats avec un logiciel dédié, tel que GeneMapper ID-X. Consultez le tableau « Caractéristiques techniques » pour plus d’informations.

Applications

Les Investigator IDplex Plus Kits permettent de générer rapidement et avec fiabilité des profils ADN à partir de sang, d’écouvillons buccaux et de taches collectées par un service médicolégal ou d’échantillons de référence, et sont tout à fait adaptés pour :

  • Base de données criminelles, échantillons de référence ou échantillons médico-légaux
  • Recherche de paternité
  • Études génétiques des populations
  • Autres applications pour identification humaine

 

Caractéristiques techniques
Caractéristiques Investigator IDplex Plus Kit
Volume initial d’ADN Jusqu’à 15 µl
Volume par réaction 25 µl
Matrice BT5
Colorants fluorescents 6-FAM, BTG, BTY, BTO
Analyseurs génétiques ABI PRISM 3100/3100 Avant, Applied 
Biosystems 3130/3130xl ou Applied 
Biosystems 3500 Genetic Analyzers
Logiciel d’analyse Applied Biosystems GeneMapper ID ou
GeneMapper ID-X

Ressources

Brochures & Guides (3)
Advanced sample collection, automation and STR solutions for kinship testing

Streamline your workflow with QIAGEN solutions for human identity and forensic testing

Kit Handbooks (1)
Quick-Start Protocols (1)
Template Files (3)
For further information on which version of the v11 template files is suitable for your needs, please refer to the Template File Info Note.
For further information on which version of the v11 template files is suitable for your needs, please refer to the Template File Info Note.
Technical Information (3)

The most comprehensive and versatile coverage of current international STR standards for capillary electrophoresis analysis



Quality initiatives for human identity testing and forensics 
Technical Information and Important Notes (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Is the Fast Reaction Mix of the Investigator IDplex Plus Kit ready to use?
Yes. The Fast Reaction Mix of the Investigator IDplex Plus Kit contains HotStarTaq Plus enzyme, Mg2+, and dNTPs in a pre-optimized concentration. Only Investigator IDplex Plus Primer Mix and template DNA need to be added. Nuclease-free Water should be added to complete the reaction volume.
FAQ ID -3008
What is the safest procedure to add FTA punches to the PCR reactions of the Investigator IDplex GO! Kit?

We recommend first adding master mix to the PCR plate and then adding the punch to avoid punches getting lost or mixed up due to electrostatic effects. Furthermore, we strongly recommend spinning down the PCR plate after setup to ensure all punches get fully submerged.

FAQ ID -3096
Can the Investigator IDplex GO! PCR protocol be run on different PCR endpoint cyclers?
Yes. The protocol is generic and has successfully been tested on various commonly used instruments.
FAQ ID -3089
Can the PCR protocol of the Investigator IDplex Plus Kit be run on different PCR endpoint cyclers?
Yes. The protocol of the Investigator IDplex Plus Kit is generic and has been successfully tested on various commonly used instruments.
FAQ ID -3009
What is the maximum DNA input volume that can be used in the Investigator IDplex Plus Kit?
15 µl input volume can be used with the Investigator IDplex Plus Kit.
FAQ ID -3014
Can additional positive controls be used for the Investigator IDplex GO! Kit?

Amplification of Control DNA 9948 is appropriate as a PCR performance check. However, if you have access to reference samples at constant quality (for example, swabs or FTA donated by lab personnel), these samples may be used as additional in process controls.

FAQ ID -3094
Which filter set should be used with Investigator IDplex Plus Kit?
If you are using an ABI PRISM 3100-Avant/3100 or 3130/3130xl Genetic Analyzer, please use Any5Dye, if available. If you are using the Applied Biosystems 3500/3500xL Genetic Analyzer, please use filter set AnyDye. Otherwise, filter set G5 should be used. If you are using an ABI PRISM 310 Genetic Analyzer, filter set G5 should be used.
FAQ ID -3017
Does the Investigator IDplex Plus assay contain an internal control?
No. Unlike some other QIAGEN STR products (e.g., the Investigator Argus Y-12 QS Kit) there is no QS quality sensor included in the Investigator IDplex Plus Kit.
FAQ ID -3011
Is there a need to compensate for additional liquid volume added with the positive control DNA, or a buccal swab lysate in the Investigator IDplex GO! Kit?
No. Up to 2 µl can be added on top of a 25 µl reaction.
FAQ ID -3088
Is it possible to increase the amount of sample to obtain higher signals using the Investigator IDplex GO! Kit?
We do not recommend using more than one punch of 1.2 mm diameter for blood or buccal cells on FTA, or 2 µl of a crude buccal swab lysate. To adapt protocols to the type and quality of samples used in your laboratory, and to the CE instrumentation in use, adjust PCR cycle numbers and CE injection conditions.
FAQ ID -3090
Do you recommend using indicator cards for buccal cells on FTA with Investigator IDplex GO! Kit?
Yes. Use of indicator cards helps to ensure sample is taken from an appropriate area of the FTA card. This may significantly improve success rates compared to procedures using non-indicator cards.

 

FAQ ID -3095
What is the optimal sample DNA concentration for the Investigator IDplex Plus Kit?
The optimum sample DNA input range of the Investigator IDplex Plus Kit is between 200–500 pg. However, reliable results can be obtained with less than 100 pg. For higher amounts of input DNA, consider adjusting the PCR cycle number.
FAQ ID -3015
Can the allelic ladder of the Investigator IDplex Plus Kit be used for analysis of Investigator IDplex GO! Kit?

No. Amplification products of marker FGA have a slightly different size between IDplex Plus and IDplex GO! kits due to a change in the fluorescent dye linker used. Use of the IDplex Plus ladder will frequently cause off ladder calls for FGA alleles.

 

FAQ ID -3093
Is the Fast Reaction Mix ready to use in the Investigator IDplex GO?

Yes. The Fast Reaction Mix contains Taq enzyme, Mg2+, and dNTPs in a pre-optimized concentration. Only IDplex GO! Primer Mix and sample needs to be added.

FAQ ID -3087
Do I need to evaluate optimal PCR cycle numbers for the Investigator IDplex GO! Kit with my samples?

Yes. Sample materials used for direct amplification vary with regard to quality and quantity of DNA present, depending on sampling materials, procedures, and storage conditions. In order to obtain the highest possible success rates in routine use, it is essential to run a representative batch of samples for evaluation of optimal conditions. Furthermore, we recommend revisiting this aspect after a certain period of routine use to ensure the evaluated conditions are optimal and re-adjust if necessary.

FAQ ID -3091
Have primer sequences of the Investigator IDplex Plus Kit been changed compared to the former Investigator IDplex assay?
No, the primer site locations of the markers in the Investigator IDplex Plus Kit have not been changed. Only minor changes have been introduced for some markers, e.g., to improve A addition to the PCR products.
FAQ ID -3012
What is the correct matrix to use with Investigator IDplex Plus Kit?
Matrix BT5 should be used with Investigator IDplex Plus Kit.
FAQ ID -3016
What fluorescent labels are 6-FAM, BTG, BTY, BTR, and BTO in Matrix Standard BT5 single or multi.cap?

The BT5 matrix standard is designed for use with our 5-dye Investigator STR Assays. We do not disclose the containing dyes.

FAQ ID - 3364
Is it possible to extend the number of PCR cycles to increase sensitivity of the Investigator IDplex Plus Kit?
Yes. For example, cycle numbers can be increased to 32 or 34 in order to obtain higher signals for very diluted samples. However, please note that this promotes the amplification of nonspecific products or amplification from spurious background DNA.
FAQ ID -3010
What does the Investigator IDplex Plus Kit contain?
The Investigator IDplex Plus Kit contains Primer mix, Fast Reaction Mix, Control DNA allelic ladder IDplex Plus, DNA size standard 550 (BTO), and nuclease-free water.
FAQ ID -3013
Where can I find the template files for the Investigator IDplex Plus Kit?
The template files for the Investigator IDplex Plus Kit for various softwares and analyzers can be downloaded from the Resource tab on the product webpage.
FAQ ID -3019
Have primer sequences in the Investigator IDplex GO! Kit been changed compared to the Investigator IDplex Plus assay?

No, primer site locations of markers have not been changed. Two additional SNP primers have been added to allow balanced amplification of vWA and D16S539 alleles carrying known primer binding site mutations. The mutations covered were observed in concordance studies in samples of African origin at an elevated level. The labelled FGA forward primer has been slightly changed with regard to the linker of the fluorescent dye. The change does not affect PCR amplification, but causes a slight size shift during capillary electrophoresis. The allelic ladder therefore has been changed accordingly.

FAQ ID -3092
Which settings for the filter set Any5Dye must be adjusted before running the spectral calibration for Investigator IDplex Plus Kit?

For Any5Dye filter set with the Investigator IDplex Plus Kit, please use:

  • Condition Bound: Lower 1.0 – Upper 20
  • Sensitivity: 0.1
  • Quality Value: 0.80
FAQ ID -3018