Cat. No. / ID: 339320
Le miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit contient tous les réactifs dont vous avez besoin pour débuter avec le miRCURY LNA miRNA PCR System. Le kit comprend un lot enrichi en amorces de contrôle (UniSp6), un lot d’amorces de contrôle endogène candidat (miR-103a-3p) et deux lots d’amorces validés de votre choix, renforcés par la technologie LNA. Les réactifs sont suffisants pour effectuer 20 réactions de transcription inverse et 200 amplifications par PCR, ce qui permet de quantifier jusqu’à 20 échantillons avec un minimum de 4 dosages par échantillon. Vous aimeriez essayer cette solution pour la première fois ? Demander un devis pour un kit d’essai.
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La transcription inverse universelle combinée à des amorces renforcées par LNA et normalisées par Tm permet une quantification précise et fiable des miARN individuels à partir de 1 pg d’ARN total (voir la figure Quantification précise à partir de 1 pg de matériel départ d’ARN total). Grâce à une sensibilité exceptionnelle et un bruit de fond extrêmement faible, vous pouvez quantifier avec précision de très faibles niveaux de miARN sans préamplification. Le miRCURY LNA miRNA PCR System est ainsi adapté à tous les types d’échantillons, en particulier ceux à faible teneur en ARN, tels que le sérum, le plasma et d’autres biofluides.
miRCURY LNA RT Kit
Ce kit comprend tous les réactifs nécessaires pour réaliser une polyadénylation et une transcription inverse des miARN rapides et pratiques en une seule étape de réaction. L’utilisation d’une seule réaction de transcription inverse universelle comme matrice pour les amplifications par PCR ultérieures simplifie grandement la procédure par rapport aux systèmes qui nécessitent une synthèse de premier brin spécifique au miARN (voir la figure Modèle L’avantage d’une étape universelle de transcription inverse). L’ajout d’ARN UniSp6 peut être utilisé avec le dosage de contrôle – UniSp6 miRCURY LNA miRNA PCR Assay (n° de réf. YP00203954) – comme contrôle positif de transcription inverse et/ou comme étalonneur inter-plaques dans nos panels de PCR miARN.
miRCURY LNA SYBR Green PCR Kit
Ce kit contient le miRCURY SYBR Green Master Mix à haute performance pour l’amplification quantitative par real-time PCR. La détection est basée sur le SYBR Green, qui permet de contrôler la qualité de l’amplicon PCR obtenu par l’analyse de la courbe de fusion. Les lots d’amorces renforcées par LNA nécessitent des conditions de réaction PCR spécifiques pour une performance optimale. Le kit comprend également un lot d’amorces de contrôle conçues pour l’amplification de l’ajout d’ARN synthétique fourni dans le miRCURY LNA RT Kit. Consulter le manuel du miRCURY LNA RT Kit pour plus de détails. Les miRCURY LNA miRNA PCR Assays et Panels ont été validés à l’aide du miRCURY SYBR Green Master Mix ; l’utilisation d’autres réactifs pour la qPCR affectera les résultats.
Le système miRCURY LNA miRNA PCR Assay est un système spécifique aux miARN, basé sur les LNA, conçu pour une détection sensible et précise des miARN par real-time PCR quantitative à l’aide du SYBR Green. La première étape de la procédure est la transcription inverse universelle, suivie d’une amplification par real-time PCR avec des amorces renforcées par LNA.
Le miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit est utilisé comme un élément du miRCURY PCR System pour :
Les données provenant de dilutions en série de l’ARN total de l’homme AM6000 sont présentées. Tous les dosages de miARN présentent une lecture linéaire avec des coefficients de corrélation R2 > 0,99.