Cat. No. / ID: 208252
El QuantiNova SYBR Green PCR Kit (kit de qPCR con SYBR), que ofrece una mejora en la especificidad, sensibilidad, velocidad y seguridad de los procesos, establece nuevos estándares en la qPCR basada en SYBR Green. Un novedoso mecanismo de hot start aumenta considerablemente la especificidad de la real-time PCR, y la química optimizada produce resultados cuantitativos exactos de ADNc o ADNg en cualquier termociclador de real-time PCR con la detección de hasta una sola copia de la diana. Por último, un indicador visual integrado garantiza un pipeteo correcto.
Evite los efectos nocivos de realizar el cebado de manera incorrecta a temperaturas más bajas con el QuantiNova Probe PCR Kit (kit de qPCR con sonda). Gracias a un novedoso mecanismo de hot start mediado por anticuerpos, el kit aumenta la especificidad y la eficacia de la real-time PCR basada en sonda para proporcionar un análisis exacto de ADNc o ADNg simple o doble en diversos termocicladores de real-time PCR. La conveniencia adicional de la excelente estabilidad durante hasta 100 horas a temperatura ambiente, sin necesidad de utilizar un agente refrigerante, lo hace ideal para la manipulación de muestras de alto rendimiento y flujos de trabajo automatizados. Un sistema de seguimiento integrado para la identificación visual del pipeteo correcto le brinda total tranquilidad, mientras que la detección extremadamente sensible de incluso pequeñas cantidades de diana garantiza resultados de qPCR fiables en todo momento.
Los QuantiNova Multiplex PCR Kits (kits de qPCR múltiple) también permiten la cuantificación fiable y rápida de hasta 5 dianas de ADNc o ADNg en un solo tubo mediante la real-time PCR múltiple o RT-PCR de dos pasos. La tecnología Q-Bond y una mezcla maestra optimizada favorecen la real-time PCR múltiple en 1 hora. La combinación de un exclusivo hot start y del sistema de tampón de PCR en la mezcla maestra cuádruple lista para usar garantiza una qPCR de alta sensibilidad en cualquier termociclador en tiempo real sin necesidad de optimización, y también ofrece opciones de preparación de reacciones automatizada a temperatura ambiente. Un sistema de seguimiento integrado para la identificación visual del pipeteo correcto ayuda a evitar el error humano, y la combinación con el QuantiNova Reverse Transcription Kit para la síntesis de ADNc permite incluir QuantiNova Internal Control RNA para supervisar la transcripción inversa y la qPCR correctas.
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Indicador visual integrado para la preparación exacta de las reacciones
La mezcla maestra suministrada con los QuantiNova PCR Kits contiene un colorante azul inerte que no interfiere en la real-time PCR, pero sí aumenta la visibilidad en el tubo o en el pocillo. El QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer contiene un colorante amarillo inerte. Cuando el molde del ácido nucleico se diluye en el QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer y se añade a la mezcla maestra, el color de la solución cambia de azul a verde (consulte la figura “ Preparación exacta de las reacciones indicada por el control de pipeteo integrado”), lo que brinda una indicación visual de que cada reacción se configuró correctamente.
QuantiNova SYBR Green PCR Kit
La gran sensibilidad del QuantiNova SYBR Green PCR Kit da como resultado la detección exacta y robusta de hasta una sola copia de la diana (Consulte la figura “ Detección robusta y sensible de dianas de una sola copia”). Esta excelente sensibilidad se alcanza incluso en condiciones de termociclado ultrarrápido.
El QuantiNova SYBR Green PCR Kit puede utilizarse con una gran variedad de cantidades de molde. El rendimiento de este kit de real-time PCR con SYBR se ha comprobado para un rango dinámico de 8 órdenes de magnitud (de 100 ng a 10 fg de ADNc) e independientemente del instrumento utilizado, la cuantificación fue exacta y robusta (consulte la figura “ Cuantificación exacta en un amplio rango dinámico”).
La rigurosa especificidad y la excepcional sensibilidad de la química de QuantiNova produce resultados excelentes en el QIAGEN Rotor-Gene Q, pero puede usarse en cualquier termociclador de real-time PCR, independientemente del formato, la capacidad de termociclado rápido y la necesidad de un colorante de referencia pasivo. El ROX suministrado con el QuantiNova SYBR Green PCR Kit simplemente se añade a la mezcla maestra si es necesario. Los resultados de amplificación y cuantificación del Rotor-Gene Q, Agilent Technologies Mx3005P, Applied Biosystems 7900 HT Fast, ViiA 7, StepOnePlus y 7500 Fast, Roche LightCycler 480 y Bio-Rad CFX96 son invariablemente robustos y sensibles.
El QuantiNova SYBR Green PCR Kit ofrece resultados superiores en comparación con otros kits de PCR con SYBR Green. Independientemente de las condiciones de termociclado o del instrumento, la química de QuantiNova genera de manera demostrable valores de CT más bajos, mayor reproducibilidad y una mayor eficacia de las reacciones.
El QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer brinda tranquilidad durante la preparación de las reacciones, pero no es necesario para obtener resultados superiores con el QuantiNova SYBR Green PCR Kit. La química de QuantiNova está diseñada para ser flexible, por lo que puede incorporarse a cualquier flujo de trabajo establecido. Por lo tanto, el rendimiento es óptimo con la diana de amplificación de su interés y el instrumento y el tampón de dilución de su elección.
QuantiNova Probe PCR Kit
La mezcla para real-time PCR de este kit de real-time PCR con sonda puede almacenarse a una temperatura de 30 °C durante un máximo de 100 horas sin que se altere el rendimiento de las reacciones posteriores. La excelente estabilidad, incluso tras un almacenamiento prolongado a temperatura ambiente sin el uso de ningún agente refrigerante hace que el QuantiNova Probe PCR Kit sea ideal para la preparación de reacciones de alto rendimiento y la manipulación de pilas de placas (consulte la tabla “Efecto del almacenamiento sobre la estabilidad de las reacciones”).
Valores de CT medios | ||||
QuantiNova Probe PCR Kit | Kit de PCR con sonda del proveedor L | |||
Cantidad en ng | 0 h | 100 h | 0 h | 100 h |
10 | 24,37 | 24,49 | 24,35 | 27,49 |
1 | 27,78 | 27,90 | 27,77 | 30,97 |
0,1 | 31,16 | 30,98 | 31,37 | 34,48 |
Control sin molde | No detectado | No detectado | No detectado | No detectado |
Comparación de los valores CT antes y después de un almacenamiento a 30 °C durante 100 horas. Las real-time PCR, incluidos la mezcla maestra, el ADNc de molde, los cebadores y las sondas para TNF, se incubaron a 30 °C durante 100 horas y se procesaron en la real-time PCR con reacciones recién preparadas. Se analizaron las reacciones por triplicado de 3 cantidades de molde diferentes. A diferencia del kit de PCR con sonda del proveedor L, los valores de CT que proporcionó el QuantiNova Probe PCR Kit no variaron tras un almacenamiento prolongado de las muestras a 30 °C.
La gran sensibilidad del QuantiNova Probe PCR Kit da como resultado la detección exacta y robusta de hasta una sola copia de la diana (consulte la figura “ Detección sensible y robusta de la copia de una sola diana”). La mezcla maestra especial suministrada con estos kits permite la cuantificación exacta de 2 dianas con grandes diferencias en el nivel de abundancia en un solo tubo. Esto le permite ahorrar tiempo, dinero y reduce la cantidad de material de muestra necesario. Es más, los datos de PCR obtenidos son similares a los obtenidos con una PCR simple.
La exclusiva combinación de la tecnología de tampones patentada y debidamente comprobada de QIAGEN y QuantiNova DNA Polymerase, QuantiNova Antibody y QuantiNova Guard, garantiza una real-time PCR correcta en el primer intento, sin necesidad de realizar optimizaciones costosas que demandan mucho tiempo, incluso en el caso de los ensayos de real-time PCR difíciles (consulte la figura “ Resultados superiores con ensayos difíciles”).
El QuantiNova Probe PCR Kit puede utilizarse en cualquier termociclador en tiempo real. El ROX se suministra en un tubo separado y se puede añadir si se utiliza un termociclador que emplea ROX como colorante de referencia pasivo. El kit produce resultados muy coherentes en diferentes termocicladores en cuanto a sensibilidad, reproducibilidad y eficacia. La coherencia de los resultados se mantiene, independientemente de las cambiantes capacidades de termociclado rápido de los diferentes termocicladores que resultan en diferentes protocolos de termociclado.
QuantiNova Multiplex PCR Kits
La mezcla maestra especial suministrada con los QuantiNova Multiplex PCR Kits permite la preparación rápida de reacciones múltiples y produce resultados correctos en el primer intento, proporcionando datos de PCR múltiple que son similares a los datos de PCR simple. La mezcla maestra cuádruple muy concentrada admite la entrada de molde de hasta 800 ng, lo que garantiza una excelente sensibilidad, incluso en reacciones quíntuples. El kit puede distinguir claramente entre pequeñas diferencias en la cantidad de molde y proporcionar una cuantificación exacta de las dianas con grandes diferencias en el nivel de abundancia.
Un novedoso mecanismo de hot start mediado por anticuerpos garantiza una excelente especificidad y permite la preparación de las reacciones a temperatura ambiente, ideal para procedimientos automáticos. El tampón de PCR rápida especialmente desarrollado contiene el aditivo Q-Bond, que reduce de manera significativa los tiempos de hibridación y extensión, lo que permite realizar la qPCR múltiple en menos de una hora. El control visual del pipeteo ayuda a evitar el error humano y aumenta la seguridad del proceso; en particular, si se combina con el Internal Control RNA suministrado con el QuantiNova Reverse Transcription Kit para la RT-PCR cuantitativa de dos pasos.
El QuantiNova Multiplex PCR Kit aumenta la eficacia del flujo de trabajo al generar más información de una cantidad limitada de material de muestra al utilizar la qPCR múltiple ultrarrápida y controlada durante el proceso.
Los QuantiNova PCR Kits ofrecen análisis de ADNc o ADNg con excelente especificidad gracias a un novedoso mecanismo de hot start mediado por anticuerpos (consulte la figura “ Principio del nuevo mecanismo de hot start de QuantiNova”). A bajas temperaturas, la QuantiNova DNA Polymerase se mantiene en un estado inactivo por acción del anticuerpo QuantiNova Antibody y el nuevo aditivo, QuantiNova Guard, que estabiliza el complejo. De esta manera, se mejora la rigurosidad del hot start y previene la extensión de cebadores y de dímeros de cebador hibridados de manera no específica. A los 2 minutos de haber aumentado la temperatura a 95 °C, el QuantiNova Antibody y el QuantiNova Guard se desnaturalizan y se activa la QuantiNova DNA Polymerase, lo que permite la amplificación.
Además, la química de QuantiNova incluye características que optimizan el flujo de trabajo sin pérdida de la sensibilidad y la eficacia de la PCR. Los colorantes inertes de la mezcla maestra y del QuantiNova Yellow Dilution Buffer sirven como un indicador visual de que cada reacción se ha configurado correctamente. El color azul de la mezcla maestra aumenta la visibilidad del contenido del recipiente de reacción y cambia a verde al añadir el molde de ácidos nucleicos diluidos en el QuantiNova Yellow Dilution Buffer (consulte la figura “ Preparación exacta de las reacciones indicada por el control de pipeteo integrado”). La exclusiva formulación del tampón de PCR incluido en los QuantiNova SYBR PCR Kits aumenta la rigurosidad del mecanismo de hot start y acorta los pasos de termociclado de modo que su PCR se ejecute más rápido y se pueda aumentar el rendimiento.
Los QuantiNova Multiplex PCR Kits producen resultados muy sensibles y rápidos en un amplio rango dinámico en termocicladores estándar y rápidos sin optimización. El tampón de PCR rápida especialmente desarrollado contiene el aditivo Q-Bond, que reduce de manera significativa los tiempos de hibridación y extensión (consulte la figura “ Hibridación rápida de cebadores”).
La amplificación de genes diana y de referencia en la misma reacción, en lugar de en reacciones independientes, aumenta la fiabilidad de la cuantificación genética al reducir al mínimo los errores de manipulación. Además, el Internal Control RNA suministrado en el QuantiNova Reverse Transcription Kit para la RT-PCR cuantitativa de dos pasos puede incorporarse para supervisar la transcripción inversa y la qPCR correctas.
El QuantiNova Multiplex PCR Buffer incluye una combinación equilibrada de iones de K+ y NH4+, así como el exclusivo Factor MP sintético. La combinación de ambos permite la hibridación estable y eficaz de cebadores y sondas al molde de ácido nucleico, lo que produce una alta eficacia de la PCR (consulte la figura “ El exclusivo tampón de PCR múltiple favorece una hibridación estable y eficaz”).
La mezcla maestra del QuantiNova Multiplex PCR Kit puede almacenarse cómodamente a 2-8 °C durante un máximo de 12 meses; además, la reacción configurada se mantiene increíblemente estable a temperatura ambiente, lo que permite realizar procedimientos automatizados para aumentar la eficacia y la exactitud.
Los QuantiNova PCR Kits contienen mezclas maestras listas para usar que eliminan la necesidad de optimizar las condiciones de reacción y termociclado. Simplemente añada ADNg o ADNc de molde y cebadores (detección basada en SYBR Green) o ADNg o ADNc de molde, cebadores y sondas (detección basada en sondas) a la mezcla maestra y siga el protocolo del manual de uso para obtener resultados rápidos y fiables en cualquier termociclador en tiempo real. El colorante de referencia pasivo ROX se suministra en un tubo separado y las concentraciones del colorante pueden ajustarse según el tipo de termociclador que se use. Por tanto, los QuantiNova PCR Kits pueden utilizarse en casi cualquier termociclador en tiempo real, independientemente del formato o de las condiciones de termociclado. Gracias a las concentraciones optimizadas de ROX, se logra la detección incluso de números de copias bajos a través del análisis automático de los datos.
Los QuantiNova Multiplex PCR Kits contienen mezclas maestras cuádruples listas para usar que eliminan la necesidad de optimizar las condiciones de reacción y termociclado. Simplemente añada hasta 800 ng de ADN del molde y juegos de cebador-sonda a la mezcla maestra y siga el protocolo del manual de uso para obtener resultados rápidos y fiables en cualquier termociclador en tiempo real. Los kits incorporan el colorante de referencia pasivo ROX en un tubo separado, para ajustar la concentración correcta de ROX, si es necesario para el instrumento.
Para obtener resultados óptimos en la RT-PCR de dos pasos en tiempo real, recomendamos sintetizar ADNc utilizando el QuantiNova Reverse Transcription Kit, que realiza la síntesis rápida del ADNc en solo 20 minutos con la eliminación integrada de la contaminación del ADN genómico. Además, incluye QuantiNova Internal Control RNA, lo que permite una supervisión durante el proceso de la transcripción inversa y la qPRC correctas.
Para optimizar el flujo de trabajo, recomendamos combinar los QuantiNova Kits con nuestros ensayos o paneles de real-time PCR QuantiNova prediseñados. Estos ofrecen la cuantificación precisa del ARNm o transcritos de ARN extenso sin codificación, independientemente del nivel de abundancia. Elija entre una gran variedad de conjuntos de cebadores prediseñados de humano, ratón y rata, o personalice sus propios ensayos y paneles utilizando nuestras herramientas de diseño avanzado.
Nuestros QuantiNova LNA PCR y QuantiNova LNA Probe PCR Assays utilizan tecnología LNA para alcanzar mayor sensibilidad, lo que permite obtener perfiles de expresión génica sin sesgo y datos científicos más rápidos.
El QuantiNova SYBR Green puede utilizarse para el análisis de expresión génica basado en SYBR Green de dianas de ADNc y para el análisis cuantitativo de ADNg en cualquier termociclador en tiempo real. Esto incluye instrumentos de Applied Biosystems, Bio-Rad, Cepheid, Eppendorf, LIFE Technologies, Roche y Agilent, y también el Rotor-Gene Q.
Los QuantiNova Probe PCR Kits pueden utilizarse para el análisis de expresión génica basado en sondas de dianas de ADNc y para el análisis cuantitativo de ADNg en cualquier termociclador en tiempo real. Esto incluye instrumentos de Applied Biosystems, Bio-Rad, Cepheid, Eppendorf, Roche y Agilent.
Los QuantiNova Multiplex PCR Kits pueden utilizarse para el análisis múltiple de expresión génica de dianas de ADNc o de ADNg en cualquier termociclador en tiempo real. Para aprovechar al máximo la capacidad de los beneficios de la multiplexación, recomendamos instrumentos que ofrecen capacidad quíntuple, como el Rotor-Gene Q.