MinElute Reaction Cleanup Kit

• Volúmenes de elución muy bajos
• Procedimiento rápido y manejo sencillo
• Recuperaciones altas y reproducibles
• Colorante de carga de gel para el análisis práctico de muestras

El MinElute Reaction Cleanup Kit incluye columnas de centrifugación, tampones y tubos de recogida para la purificación basada en membrana de gel de sílice de ADN de 70 bp–4 kb en tamaño a partir de reacciones enzimáticas. Las columnas de centrifugación se han diseñado para permitir la elución en volúmenes muy pequeños (tan solo 10 µl), lo que genera ADN altamente concentrado en altos rendimientos. El indicador de pH integrado permite la fácil determinación del pH óptimo para la unión del ADN en la columna de centrifugación. El procedimiento se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect. Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluyendo la secuenciación, el análisis de micromatrices, la ligación y transformación, la digestión de restricción, el marcado, la microinyección, la PCR y la transcripción in vitro.

Para obtener resultados óptimos, se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

El MinElute Reaction Cleanup Kit garantiza la limpieza de hasta 5 µg de ADN (entre 70 bp y 4 kb) a partir de reacciones enzimáticas, lo que genera altos rendimientos de ADN adecuados para una variedad de aplicaciones. El kit incluye columnas de centrifugación para la limpieza de reacciones enzimáticas. Con el uso de una microcentrifugadora o un colector de vacío, se alcanza rápidamente una alta concentración del fragmento de ADN (70 bp–4 kb). (Los fragmentos de ADN superiores a 4 kb se deben purificar con el sistema QIAquick.)

Los kits MinElute contienen un ensamblaje de membrana de síllice para la unión de ADN en tampón de alta salinidad y elución con tampón de baja salinidad o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceites minerales, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN. La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes relacionados con las resinas sueltas y los residuos pastosos. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promover la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Colorante de carga de gel

Para que el procesamiento y el análisis de las muestras sean más rápidos y prácticos, se proporciona el colorante de carga de gel. El GelPilot Loading Dye contiene tres colorantes de seguimiento (xileno cianol, azul de bromofenol y naranja G) para facilitar la optimización del tiempo de la serie del gel de agarosa y evitar que los fragmentos más pequeños de ADN migren demasiado lejos (consulte la figura « GelPilot Loading Dye »).

El sistema MinElute utiliza un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución (consulte el diagrama de flujo « Procedimiento de MinElute»). El tampón de unión se añade directamente a la reacción enzimática y la mezcla se aplica a la MinElute Spin Column. El tampón de unión contiene un indicador de pH, lo que permite determinar con facilidad el pH óptimo para la unión del ADN (consulte la figura  «Colorante indicador de pH»). Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad generadas por el tampón. Las impurezas se lavan y el ADN puro se eluye con un volumen pequeño de tampón suministrado de baja salinidad o agua, listo para usarse en aplicaciones posteriores.

Manejo

Las MinElute Spin Columns se han diseñado con dos prácticas opciones de manejo (consulte el diagrama de flujo «Procedimiento de MinElute»). Las columnas de centrifugación se adaptan a una microcentrifugadora de mesa convencional o a cualquier colector de vacío con conectores Luer, como QIAvac 24 Plus o QIAvac 6S con QIAvac Luer Adapters. El MinElute Reaction Cleanup Kit, junto con otros kits basados en columnas de centrifugación de QIAGEN, se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect, lo que permite incrementar la productividad y la normalización de los resultados (consulte las figuras «Opciones de manejo de la columna de centrifugación  A,  B,  C,  D y  E» y « QIAcube Connect»).

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluyendo las indicadas a continuación:

• Secuenciación
• Análisis de micromatrices
• Ligación y transformación
• Digestión de restricción
• Marcado