Q-Solution Kit

• Mitiga el arrastre de inhibidores de PCR, como el etanol, la heparina y otros posibles inhibidores 
• Ayuda en reacciones con moldes de ácido nucleico con estructuras secundarias complejas 
• Mejora las reacciones con el arrastre de quelantes de magnesio, como el EDTA 
• Compatible con los kits QIAGEN y con instrumentos para dPCR, PCR convencional y qPCR

El Q-Solution Kit se ha diseñado para optimizar las condiciones en reacciones de qPCR y dPCR difíciles. La caja del kit contiene 5x Q-Solution y 25 mM de MgCl₂, que se pueden usar de manera independiente o combinada. Si es necesario, puede valorar el rango de concentración de ambas soluciones.

Minimice los efectos de los inhibidores de la PCR  

Q-Solution es un aditivo para PCR novedoso y versátil, que se puede utilizar con cualquiera de las mezclas maestras QIAcuity. El arrastre de inhibidores como el alcohol residual, la heparina, los ácidos húmicos u otras sustancias fundamentales que puede impedir la reacción de PCR, se mitiga con las propiedades especiales de Q-Solution (figura 1).  

Aumentar la afinidad de unión del cebador 

Si sospecha que una unión de cebador o sonda débil produce un bajo rendimiento de la PCR, intente añadir MgCl₂ a la reacción de PCR. 

Compatible con mezclas maestras de dPCR y qPCR 

Pueden existir condiciones de PCR difíciles en cualquier reacción de dPCR, PCR convencional o qPCR, para proporcionar rendimiento, reproducibilidad y sensibilidad. Independientemente de su aplicación, los datos demuestran que el Q-Solution Kit puede mejorar las reacciones de dPCR, PCR convencional y qPCR; en algunos casos, después de una valoración simple de ambos componentes.  

Al bajar la temperatura de fusión del ADN, Q-Solution puede superar las dificultades que causa el ADN con elevado contenido de GC o con estructuras secundarias complejas, como las que se encuentran en los genomas del virus adenoasociado (Adeno-Associated Virus, AAV). El kit, además, aumenta la eficiencia de la PCR en presencia de inhibidores. La adición de MgCl₂ es opcional e impide el fallo de la PCR que causan los quelantes como el EDTA. Como cofactor esencial de la polimerasa del ADN, el MgCl₂ puede estabilizar estructuras de ADN bicatenario, incluidas las formadas entre cebadores y moldes. El principio de la reacción de dPCR en las nanoplacas se describe aquí. 
 

El protocolo es sencillo y se puede ejecutar en cualquier laboratorio que cuente con el QIAcuity Digital PCR System. Según las instrucciones del manual del usuario, el usuario puede preparar la mezcla de reacción como de costumbre y añadir Q-Solution y MgCl₂ como se describe en el protocolo de inicio rápido. La mezcla se pipetea en la nanoplaca. Se recomienda valorar Q-Solution y el MgCl₂ antes del primer uso para encontrar la concentración óptima de la configuración de reacción específica.  

El Q-Solution Kit resulta muy adecuado para diversas reacciones de dPCR en el QIAcuity, y también para las reacciones de PCR convencional y qPCR. Para ver ejemplos de otras aplicaciones, consulte la Nota de aplicación en la sección “Recursos”.