Strep-tag Antibody

Para la detección extremadamente sensible y específica de proteínas marcadas con Strep

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Strep-tag Antibody (100 μg)

Cat. No. / ID:  34850

Anticuerpo monoclonal de ratón que reconoce el epítopo Strep-tag II; liofilizado, para 1000 ml de solución de trabajo
El Strep-tag Antibody está concebido para su uso en aplicaciones de biología molecular. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

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Características

  • Resultados excelentes en procedimientos de dot blot y western blot
  • Detección extremadamente sensible y específica

Detalles del producto

Los anticuerpos monoclonales de ratón marcados con Strep se utilizan para detectar proteínas recombinantes portadoras del epítopo corto de afinidad del marcador Strep con alta especificidad y sensibilidad. Al igual que todos los anticuerpos monoclonales de ratón de QIAGEN, se preparan en condiciones sin suero, lo que garantiza la ausencia de virus, micoplasma e inmunoglobulinas contaminantes.

Rendimiento

El Strep-tag Antibody permite la detección extremadamente sensible de proteínas (consulta las figuras  Detección altamente sensible de proteínas portadoras de un marcador de Strep y  Proteína ultrapura en dos pasos)
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Principio

El sistema de purificación por afinidad en dos pasos, que se basa en el marcador de eficacia comprobada 6xHis y el marcador corto Strep II, permite una purificación sencilla y muy eficiente de proteínas ultrapuras en un procedimiento rápido y estandarizado. Las proteínas recombinantes portadoras de ambos marcadores se purifican secuencialmente en matrices de Ni-NTA y Strep-Tactin (consulte la figura  Proteína ultrapura en dos pasos). Las dos purificaciones sencillas por afinidad proporcionan proteína ultrapura, totalmente activa, de longitud completa y adecuada para cualquier aplicación posterior.

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Procedimiento

Las proteínas recombinantes que portan dos etiquetas pequeñas de afinidad (la etiqueta 6xHis y la etiqueta Strep II) se expresan de forma eficiente en E. coli, insectos o células de mamífero utilizando vectores pQE-TriSystem His·Strep. Tras la lisis celular y la limpieza del lisado, las proteínas se purifican inicialmente utilizando un procedimiento de cromatografía por afinidad con metal inmovilizado, que se basa en la interacción de eficacia comprobada de Ni-NTA con la etiqueta 6xHis. Tras la elución de la matriz Ni-NTA con imidazol, las proteínas recombinantes (que también portan el epítopo de la etiqueta Strep II) se cargan directamente en una matriz Strep-Tactin. No se necesita ningún intercambio de tampones. La proteína se eluye desde la matriz Strep-Tactin utilizando biotina o destiobiotina. Esta purificación por afinidad en dos pasos produce proteína ultrapura (>98 % de pureza) (consulte la figura  Procedimiento de purificación por afinidad en dos pasos). El orden de las purificaciones se puede revertir (es decir, la purificación de Strep-Tactin puede realizarse antes de la purificación Ni-NTA). Las proteínas se pueden detectar con alta especificidad y sensibilidad utilizando anticuerpos monoclonales de ratón Strep-tag o Anti·His.

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Aplicaciones

El sistema de purificación por afinidad en dos pasos, que utiliza el Strep-tag Antibody para la detección, es muy adecuado para las aplicaciones en las que la pureza alta es primordial o difícil de alcanzar. El procedimiento de purificación estandarizado también aumenta el rendimiento eliminando la necesidad de desarrollo y optimización de protocolos de purificación específicos de las proteínas. La pureza extremadamente alta y la practicidad proporcionadas por el sistema de purificación por afinidad en dos pasos hacen que sea el método de elección para:

  • Análisis estructurales y funcionales
  • Expresión en sistemas eucariotas

Datos y cifras de respaldo

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsWestern blot, dot blot, ELISA, inmunoprecipitación, inmunohistoquímica
DetectionSe necesita el anticuerpo secundario
Sensitivity in Western blots (chemiluminescent detection)1 ng
Substrate for blot detectionDepende del anticuerpo secundario
Substrates for assay procedureDepende del anticuerpo secundario
TagMarcador Strep
Epitope detectedSAWSHPQFEK

Recursos

Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

What is the basic technology behind the Strep-tag Protein Purification System?

The basic technology behind the Strep-tag System is a Two-Step Affinity Protein Purification using sequential purification of recombinant proteins carrying two affinity tags. Proteins that carry these two small tags (the 6xHis tag and the 8 amino acid containing Strep-tag) are efficiently expressed in E. coli, insect, or mammalian cells using pQE-TriSystem His·Strep vectors. After cell lysis and clearing of the lysate, proteins are initially purified by a procedure based on the proven 6xHis-tag-Ni-NTA interaction. After elution from the Ni-NTA matrix using imidazole, recombinant proteins (which also carry the Strep-tag epitope) are loaded directly onto a Strep-Tactin matrix (Strep-Tactin SuperFlow or Strep-Tactin Magnetic Beads). Protein is eluted from the Strep-Tactin matrix using either biotin or desthiobiotin. This two-step affinity purification delivers ultrapure (>98% pure) protein. The order of purifications can also be reversed (i.e., Strep-Tactin followed by Ni-NTA purification). Since purification is done under native conditions, the Two-Step Affinity Purification System can be beneficial for highly demanding applications (i.e., crystallization studies).

 

FAQ ID -740
What is the concentration of SureENTRY Transduction Reagent?
The concentration of SureENTRY Transduction Reagent is 10 mg/ml.
FAQ ID - 3708