FlexiGene DNA Kit

Para el aislamiento escalable de ADN genómico a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo en un solo tubo

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FlexiGene DNA Kit (250)

Cat. No. / ID:   51206

Para el aislamiento de ADN genómico a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo en un solo tubo con preparación rápida del kit
9647,00 MXN
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El FlexiGene DNA Kit está concebido para su uso en aplicaciones de biología molecular. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

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Características

  • Fácil manipulación, sin riesgo de confusión de muestras
  • Purificación escalable de 0,1-20 ml de sangre total
  • Purificación directa de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo
  • Procedimiento rápido
  • Sin extracción orgánica

Detalles del producto

El sistema FlexiGene utiliza centrifugación simple para aislar ADN de alta pureza a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo. El FlexiGene DNA Kit contiene tampones y QIAGEN Protease para la purificación simple y directa en un solo tubo. Para obtener información sobre soluciones automatizadas con los reactivos FlexiGene, póngase en contacto con Autogen, Inc.

Rendimiento

El ADN purificado con el sistema FlexiGene tiene un tamaño de hasta 150 kb (consulte la figura « ADN genómico de gran calidad»). Tiene un buen desempeño en los experimentos de amplificación y transferencia de Southern (Southern blot) y también es adecuado para el archivado (consulte la figura « Análisis de PCR posterior eficaz»).

El ADN se purifica a partir de 0,1-20 ml (sangre), 0,1-2 ml (capa leucoplaquetaria), o 1-2 × 106 células (células en cultivo) en un solo tubo, procesadas mediante centrifugación. Se pueden procesar doce muestras en 1 hora. En función del tamaño de la muestra, el volumen de rehidratación es 0,2-1 ml.

Rendimiento del ADN purificado a partir de diferentes tipos de muestras mediante el procedimiento FlexiGene
MuestraVolumenValores de ADN (µg)
Sangre*0,3 ml11-14
Sangre*2,0 ml75-90
Sangre*10,0 ml380-460
Capa leucoplaquetaria0,5 ml110-130
Células HeLa106 células25-35
Ver figuras

Principio

El sistema FlexiGene DNA permite el aislamiento de ADN genómico a partir de cantidades variables de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo. El procedimiento simple de purificación se lleva a cabo en un solo tubo, lo que reduce los costes y simplifica la manipulación. El ADN purificado tiene un buen desempeño en aplicaciones posteriores sensibles.

Procedimiento

El primer paso es la adición del tampón de lisis a las muestras (consulte el organigrama « Procedimiento del ADN FlexiGene»). Los núcleos celulares y las mitocondrias se eliminan mediante centrifugación y se resuspenden en un tampón desnaturalizante que contiene QIAGEN Protease. Tras la digestión de las proteínas, el ADN se precipita mediante la adición de isopropanol, se recupera mediante centrifugación, se lava en etanol al 70 % y se seca. El ADN se resuspende en tampón de hidratación y está listo para el uso directo en ensayos posteriores o para su almacenamiento a –20 ºC. Se obtiene ADN de alto rendimiento a partir de sangre total, capa leucoplaquetaria y células en cultivo (consulte la tabla «Rendimiento del ADN purificado a partir de diferentes tipos de muestras mediante el procedimiento FlexiGene»).
Ver figuras

Aplicaciones

El ADN purificado con el FlexiGene DNA Kit tiene un buen desempeño en las aplicaciones posteriores, que incluyen:

  • PCR
  • Transferencia de Southern (Southern blot)
  • Archivado

Datos y cifras de respaldo

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsTécnicas de PCR, digestión de restricción, transferencia de Southern, secuenciación
Sample amount100 µl-20 ml
FormatEscalable
Time per run or per prep25-45 minutos (+ rehidratación de ADN)
Main sample typeSangre total, capa leucoplaquetaria, células en cultivo
TechnologyMétodo de precipitado en un solo tubo
ProcessingManual
Yield35 µg/ml de sangre total
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinADN genómico
Elution volume200 µl-1000 µl

Recursos

Kit Handbooks (1)
For purification of DNA from human whole blood, buffy coat, cultured cells
Additional Resources (1)
7 years storage at 2-8°C and -20°C
Supplementary Protocols (1)
This protocol is designed for purification of DNA from up to 10 ml clotted blood using the FlexiGene DNA Kit.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

Publications

The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Ferk P; Teran N; Gersak K;
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Huang Y; Yang H; Borg BB; Su X; Rhodes SL; Yang K; Tong X; Tang G; Howell CD; Rosen HR; Thio CL; Thomas DL; Alter HJ; Sapp RK; Liang TJ;
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
Lewkowicz P; Lewkowicz N; Sasiak A; Tchórzewski H;
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Gori AM; Sofi F; Corsi AM; Gazzini A; Sestini I; Lauretani F; Bandinelli S; Gensini GF; Ferrucci L; Abbate R;
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Stewart WF; Schwartz BS; Davatzikos C; Shen D; Liu D; Wu X; Todd AC; Shi W; Bassett S; Youssem D;
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205

FAQ

Do you have a protocol for purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit' (FG01).

 

FAQ ID -973
Do you have stability data for genomic DNA isolated with the Flexigene DNA Kit?

Yes. We have shown that DNA purified with the Flexigene DNA Kit is stable for at least 7 years when being stored at either 2-8°C or -20°C.  However, the DNA stability is dependent upon storage conditions.  The data is available here under Additional Resources.

 

FAQ ID -1317
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from frozen clotted whole blood using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG02). TEST

You will need to prepare the required buffers according to the recipes in Appendix A of the QIAGEN Genomic DNA Handbook, or you can purchase the Genomic DNA Buffer Set containing pre-made solutions. Alternatively, the QIAGEN Blood & Cell Culture Midi Kit, containing Genomic-tips 100/G and buffers, can be used.

  • Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using Clotspin Baskets and the Gentra Puregene Blood Kit (PG03).
  • Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using the Gentra Puregene Tissue Kit or Gentra Puregene Mouse Tail Kit (PG04).
  • Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit (FG01).
FAQ ID -900. Test
What is the composition of Buffer FG3?
Buffer FG3, the hydration buffer supplied in the FlexiGene DNA Kit, is a 10 mM Tris-Cl solution at pH 8.5.
FAQ ID -356
Does the Epitect Bisulfite Kit also work on DNA extracted from plants?

Bisulfite conversion of unmethylated cytosines into uracils with the EpiTect Bisulfite Kit works on DNA irrespective of the source organism. The DNA template needs to be of high purity for efficient conversion. We recommend to use genomic DNA extracted with our DNA isolation kits for clinical or animal and plant samples as a template for the EpiTect Bisulfite Kit.

FAQ ID -1209