Investigator Casework GO! Kit

Para la amplificación directa de muestras de casos

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Investigator Casework GO! Kit

Cat. No. / ID:  386546

Casework GO! Solución de lisis, solución de proteinasa K y agua libre de nucleasas
KitAccessories
Casework GO! Kit
DTT
El Investigator Casework GO! Kit está concebido para aplicaciones de biología molecular en análisis forenses, de identificación humana y en pruebas de paternidad. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

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Features

  • Lisis de muestras de casos forenses para el uso posterior en flujos de trabajo de amplificación directa
  • Maximizar las posibilidades de recuperar ADN de una gran variedad de muestras de trazas
  • Permitir el cribado de Y y la selección de muestras probatorias para los análisis de STR

Product Details

El Investigator Casework GO! Kit puede utilizarse para realizar la lisis de muestras forenses en una gran variedad de sustratos, incluidos hisopos de agresión sexual, trozos de tela, papel, colillas de cigarrillos, chicles y otros tipos de muestras. Los lisados generados son compatibles con todos los sistemas Investigator Quantiplex e Investigator STR QS. El Investigator Casework GO! Kit cumple los requisitos de la norma ISO 18385.

Principle

El Investigator Casework GO! Kit se utiliza para el pretratamiento de muestras forenses en un flujo de trabajo de amplificación directa. El kit permite la lisis de la muestra sin purificación del ADN y el lisado es compatible con varias opciones posteriores, incluidos los kits Investigator Quantiplex Pro, Investigator Quantiplex Pro FLX y Quantiplex Pro RGQ o los kits Investigator 24plex QS, 26plex QS, ESSplex SE QS o IDplex Plus.

El Investigator Casework GO! Kit se puede utilizar para la amplificación directa de muestras de casos, lo que permite acelerar el flujo de trabajo en los análisis de casos. Permite el procesamiento rápido de hisopos de muestras de casos, incluidas muestras de hisopos de agresiones sexuales, u otros materiales, sin necesidad de purificación adicional. El lisado puede utilizarse directamente para la cuantificación con todos los ensayos Investigator Quantiplex o para los perfiles de ADN utilizando todos los ensayos Investigator STR (a menos que los datos de cuantificación indiquen la presencia de posibles inhibidores de la PCR). 

En los análisis de cribado en agresiones sexuales, el flujo de trabajo Investigator Casework GO! puede facilitar las decisiones de procesamiento de muestras por cuantificación masculina y relación Auto/Y.

Procedure

Añada entre 100 y 400 µl de Casework GO! Master Mix a la muestra en un tubo e incúbela a 60 °C durante 25 minutos, seguido de otros 5 minutos a 80 °C. Cuantifique entre 2 y 5 µl de este lisado utilizando el Quantiplex Pro Kit y utilice hasta 15 µl del lisado para la amplificación utilizando el Investigator STR QS Kit.

Applications

Muestras de casos

Muchas muestras de delitos de gran volumen (por ejemplo, de robos o delitos relacionados con vehículos) no se analizan porque no se dispone de fondos ni de tiempo para la preparación de las muestras. Con el Investigator Casework GO! Kit se puede eliminar el paso de preparación de la muestra, lo que agiliza y abarata la generación de perfiles de ADN y podría hacer más viables las pruebas de ADN para un mayor número de muestras de delitos de gran volumen. Se puede obtener información valiosa sobre el flujo de trabajo, como la presencia/ausencia de ADN humano masculino/total, la degradación de la muestra o la presencia de posibles inhibidores de la PCR, cuando el Investigator Casework GO! Kit se utiliza con los Quantiplex Pro Kits o Investigator STR QS Kits.

Pruebas de agresión sexual/cribado de Y

Muchos casos de agresión sexual permanecen almacenados durante meses o incluso años porque el trabajo y la complejidad que supone obtener ADN listo para PCR son demasiado elevados. El uso de un enfoque «directo al ADN», en línea con las últimas recomendaciones del SWGDAM, maximiza las posibilidades de que solo se sigan procesando las muestras que valgan la pena. El Investigator Casework GO! Quantiplex Pro FLX-workflow determina la proporción de ADN masculino/femenino y predice la inhibición de la PCR, así como la degradación de la muestra. De este modo, ofrece un rápido cribado de Y y la evaluación de la calidad para la selección de muestras probatorias para posteriores análisis de STR.

Resources

Quick-Start Protocols (1)
Supplementary Protocols (1)
Technical Information (2)
Quality initiatives for human identity testing and forensics 
Additional Resources (1)
Application Notes (2)
Application Note Investigator Casework GO!  Kit
Application Note Skin flake isolation with the Investigator Casework GO! Kit
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Why is DTT used only for semen samples?
The DTT breaks down the protein disulfide bridges that make up the sperm nuclear membranes. Thus, DTT is always required for semen lysis.

It may also be used for all samples to keep the process simple, but it is not required to lyse blood, epithelial cells, etc. 
FAQ ID - 143761
Is it possible to use Lyse&Spin baskets?
It is possible, but modifications to the heat incubation is required because the temperature transfer to the sample might decrease due to the two plastic walls of the vessel.

This could reduce the yield and ProtK inactivation efficiency.

Note: ProtK inactivation must be done after sample collection and removal of the basket.
FAQ ID - 143762
How long are sample lysates stable in the fridge/ freezer?
Store samples at 2–8°C for storage up to 2 years, or at −30°C to −15°C for storage periods >2 years.

FAQ ID - 143765
How critical is the time of the temperature change from 60°C to 80°C?
There is no adverse effect for samples remaining in the heater during temperature increase. Nor does it make a difference if samples are kept on the bench until the heater has reached its temperature.

If only one heater shaker is available, the protocol will take a few minutes longer than the usual processing time.
FAQ ID - 143768
If 400 µl are used as lysis volume, how do I concentrate the lysate? (Otherwise the DNA would be too diluted.)
Different concentration devices are available on the market, but are not tested with the kit. Testing needs to be done first by customer.

Another helpful modification is the starting lysis volume, which can be reduced for most of the swab type to 200 µl. This helps to have higher sample concentrations.




FAQ ID - 143766
What if only one heater shaker is available?
The usage of only one heater shaker does not adversely affect the outcome.

The process will just last a few minutes longer than the usual processing time.
FAQ ID - 143764
Can the lysis volume be reduced for higher sensitivity?
The ideal lysis volume needs to be determined for each collection device.

For cotton swabs (e.g. Sarstedt Forensic swabs), 200 µl are usually sufficient.

Cuttings can be lysed with 100 µl Casework Go! Buffer depending on the size.
FAQ ID - 143763
Why is there no male DNA obtained from sexual assault samples?
DTT is not stable. The 1M solution should be stored frozen in small aliquots (50 µl) and disposed after thawing.

Repeat with freshly made DTT solution.
FAQ ID - 143767