miRCURY LNA Probe PCR Kits

• Optimizado y especializado para los miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays y Panels
• Los componentes de PCR mejorados con LNA breve y específicos de miARN eliminan la amplificación inespecífica y los dímeros de cebador
• Rendimiento sensible y específico con las enzimas de QuantiNova más modernas
• Gran robustez de reacción para la preparación y automatización a temperatura ambiente
• Incluye el miRCURY Probe PCR Universal Reverse Primer

El miRCURY Probe PCR Kits contiene una mezcla maestra de PCR de alto rendimiento diseñada específicamente para la cuantificación basada en sondas de miARN utilizando miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays y Panels. La transcriptasa inversa se realiza utilizando el miRCURY LNA RT Kit. Los miRCURY Probe PCR Kits se han optimizado para su uso con cualquier termociclador en tiempo real.

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Posibilidades únicas de diseño de cebadores y sondas

El miRCURY LNA miRNA Probe PCR System es un sistema innovador de detección y cuantificación del miARN que utiliza tecnología de LNA para habilitar nuevos diseños de cebadores y sondas que mejoran en gran medida la especificidad y sensibilidad de los ensayos. Por un lado, los cebadores y sondas mejorados con LNA tienen una T_m mayor, lo que aumenta la rigurosidad de la reacción y permite la discriminación entre los miARN que difieren en un único nucleótido, independientemente del contenido de AU. Por otro lado, los cebadores y sondas directos son específicos de miARN y más breves que en otros sistemas de detección (consulte  Resumen de miRCURY LNA miRNA Probe PCR System). De este modo, el diseño de los ensayos es más flexible y la colocación inteligente de LNA mejora en gran medida la especificidad y sensibilidad de los ensayos. De hecho, el sistema permite una cuantificación de hasta 1 copia de un miARN diana sin preamplificación. Además, el flujo de trabajo es rápido y sencillo, pues se pasa del ARN a los datos en 2 horas, y la robustez excepcional de los ensayos permite la preparación a temperatura ambiente y el retraso de series para una mayor flexibilidad y uso en automatización (consulte  Estabilidad de la reacción y robustez de la preparación). Las enzimas de QuantiNova garantizan resultados de alta reproducibilidad entre las réplicas técnicas y biológicas en el primer intento (consulte  Principio del nuevo mecanismo de inicio en caliente de QuantiNova).

Rápido y sencillo

Este protocolo fácil de seguir de 2 horas de duración ahorra tiempo y trabajo. Al utilizar una transcripción universal y protocolos de RT-PCR optimizados, el procedimiento se ha simplificado en gran medida en comparación con otras soluciones. Además, el ADNc generado en el paso de RT se puede utilizar en todo el miRCURY LNA miRNA Probe PCR System, lo que le permite hacer una transición fluida de los paneles a los ensayos en función de sus necesidades de investigación, además de ahorrar material de muestras y tiempo. El número de pasos de pipeteado se reduce al mínimo, lo que disminuye también la variación técnica. Este flujo de trabajo simplificado, combinado con la elaboración de ensayos que cumplen la normativa ISO (consulte  Alta uniformidad entre lotes), permite alcanzar una reproducibilidad de un día para otro y de un centro a otro sumamente alta.

Reactivos de alto rendimiento para real-time RT-PCR cuantitativa

El miRCURY LNA miRNA Probe PCR System permite una cuantificación y una creación de perfiles de miARN sensibles y específicas mediante real-time PCR. La detección se basa en una sonda de hidrólisis etiquetada de supresor. El sistema cubre todos los pasos relacionados con la conversión del miARN a ADNc y la detección posterior de qPCR de miARN. Los miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays y Panels se han validado utilizando la QuantiNova Probe Master Mix; si se utilizan otros reactivos para la qPCR, esto afectará a los resultados.

RNA Spike-In Kit para RT

El RNA Spike-In Kit permite realizar un control de calidad de los pasos de aislamiento de ARN, síntesis de ADNc y amplificación de PCR de los experimentos de miRCURY LNA miRNA Probe PCR para que pueda identificar cualquier muestra de calidad deficiente en una fase temprana del proceso y ahorrar tiempo y reactivos. El kit incluye UniSp2, UniSp4 y UniSp5 RNA Spike-in Template Mix y el cel-miR-39-3p RNA Spike-in Template.

miRCURY LNA RT Kit

Un kit de transcripción inversa universal para dos sistemas de detección. El miRCURY LNA RT Kit se utiliza tanto para el miRCURY LNA miRNA PCR System, que utiliza SYBR^® Green para la detección, como para el miRCURY LNA miRNA Probe PCR System basado en sonda. El kit incluye dos tampones de reacción específicos del sistema y todos los reactivos necesarios para realizar una poliadenilación y una transcripción inversa rápidas y cómodas de miARN en un único paso de reacción.

miRCURY Probe PCR Kit

El kit contiene la QuantiNova Probe Master Mix de alto rendimiento y el miRCURY Probe PCR Universal Reverse Primer. En combinación con un miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assay o un miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panel, la química permite la detección de miARN mediante real-time PCR cuantitativa.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays

Estos ensayos de cebadores y sondas utilizan sondas de hidrólisis específicas de miARN y cebadores directos específicos de miARN diseñados para detectar los miARN maduros que utilizan la información de secuencias más actualizada de miRBase. El miRCURY Probe Universal Reverse Primer se incluye en el miRCURY Probe PCR Kit.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panels

Placas de paneles de PCR listas para usar, prediseñadas y de un solo uso para perfilar con rapidez los miARN maduros que se centran en el miARNoma, vías específicas, determinados tipos de muestra como suero/plasma o en un panel personalizado diseñado por el usuario.

Centro de análisis de datos GeneGlobe

Esta herramienta de análisis complementaria e intuitiva basada en la web le guía paso a paso mediante un asistente sencillo a través de la normalización y el análisis de sus datos y genera cifras listas para la publicación.

El primer paso, la reacción de transcripción inversa es una reacción fácil de realizar de un único tubo. El ARN total, incluido el miARN, se utiliza como material de inicio y el ADNc resultante se utiliza en la amplificación de real-time PCR con sonda y cebador mejorados con LNA para detectar los miARN maduros. Esto permite una cuantificación y perfilación de miARN sencillas y accesibles para cualquier laboratorio con un termociclador de real-time PCR.

Los miRCURY Probe PCR Kits se utilizan como parte del miRCURY LNA miRNA Probe PCR System para:

• Detección, creación de perfiles y cuantificación de la expresión de miARN
• Desarrollo, cribado e identificación de biomarcadores de miARN
• Regulación de miARN y análisis de trayectoria
• Detección de miARN en tipos de muestras complejas y muestras con bajos niveles de expresión de miARN
• Detección de snoRNA
• Validación de la secuenciación de miARN