miRCURY LNA RT Kit

• Optimizado para los dos métodos de detección de miRCURY LNA miRNA PCR Assays y Panels
• Síntesis rápida, fácil y fiable de la primera hebra
• Incluye molde de agregado de ARN para monitorizar el rendimiento

El miRCURY LNA RT Kit permite una poliadenilación y una transcripción inversa de miARN rápidas y cómodas en un único paso de reacción. El uso de una reacción de RT universal como molde para las amplificaciones posteriores de PCR simplifica en gran medida el procedimiento en comparación con los sistemas que requieren una síntesis de la primera hebra específica de miARN, lo que añade comodidad y le ahorra tiempo. El kit se ha diseñado para su uso con los dos miRCURY LNA miRNA PCR Systems, utilizando SYBR Green o una sonda de hidrólisis mejorada con LNA como método de detección. El kit contiene dos tubos de tampones de reacción separados para el método de detección de PCR correspondiente.

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La transcripción inversa simplificada ahorra tiempo y recursos

El uso de una reacción de transcripción inversa universal por muestra de ARN no solo ahorra reactivos y muestras valiosas, sino también tiempo. El miRCURY LNA RT Kit se utiliza en la síntesis de ADNc de primera hebra para los dos miRCURY LNA miRNA PCR Systems, empleando el SYBR Green para la detección (consulte Resumen de miRCURY LNA miRNA PCR System) o una sonda de hidrólisis mejorada con LNA y específica de miARN (consulte Resumen de miRCURY LNA miRNA Probe PCR System). El kit incluye un tampón de reacción específico para cada sistema. Los ensayos y paneles de miARN son específicos del sistema.

Sensibilidad inigualable

La transcripción inversa universal combinada con componentes de PCR mejorada con LNA y normalizada con T_m permite una cuantificación precisa y fiable de miARN concretos a partir de tan solo 1 pg de ARN total (consulte la figura Cuantificación precisa a partir de solo 1 pg de material de partida de ARN total). Con una sensibilidad excepcional y un fondo sumamente bajo, puede cuantificar con precisión niveles muy bajos de miARN sin preamplificación. De esta manera, se logra que el miRCURY LNA miRNA PCR System y el miRCURY LNA miRNA Probe PCR System sean adecuados para todos los tipos de muestras, en especial para aquellas con bajo contenido de ARN, como suero, plasma y otros biofluidos.

Rápido y sencillo

El miRCURY LNA RT Kit es el primer paso para los miRCURY LNA miRNA PCR Systems con SYBR Green o una sonda de hidrólisis para la detección. Este protocolo fácil de seguir de 2 horas de duración ahorra tiempo y trabajo. Al utilizar una transcripción inversa universal y protocolos de RT-PCR optimizados, el procedimiento se simplifica en gran medida en comparación con otras soluciones. Además, el ADNc generado en el paso de RT se puede utilizar en todo el sistema elegido, lo que le permite una transición fluida de los paneles a los ensayos en función de sus necesidades de investigación y ahorra material de muestras y tiempo. El número de pasos de pipeteado se reduce al mínimo, lo que disminuye también la variación técnica. Este flujo de trabajo, combinado con la elaboración de ensayos que cumplen la normativa ISO, permite alcanzar una reproducibilidad de un día para otro y de un centro a otro sumamente alta.

Un miRCURY LNA RT Kit para dos sistemas de detección

El miRCURY LNA RT Kit se utiliza para los dos miRCURY LNA miRNA PCR Systems, ya sea SYBR Green o los métodos de detección de sonda de hidrólisis. Este kit incluye dos tampones de reacción específicos para el sistema y todos los reactivos necesarios para realizar una poliadenilación y una transcripción inversa de miARN rápidas y cómodas en un único paso de reacción. Utilizar una reacción única y universal de RT como molde para las amplificaciones de PCR posteriores simplifica en gran medida el procedimiento en comparación con sistemas que requieren una síntesis de la primera hebra específica de miARN (consulte la figura La ventaja de un paso de transcripción inversa universal). Además, el ADNc generado en el paso de RT se puede utilizar en todo el sistema elegido, lo que le permite una transición fluida de los paneles a los ensayos en función de sus necesidades de investigación y ahorra material de muestras y tiempo. El agregado de ARN UniSp6 incluido en el kit se puede utilizar con el ensayo de control UniSp6 miRCURY LNA miRNA PCR Assay como control positivo de transcripción inversa y/o como calibrador entre placas en nuestros paneles de PCR de miARN.

miRCURY LNA miRNA PCR System (SYBR Green)

La arquitectura de este sistema consiste en la detección de SYBR Green con dos cebadores mejorados con LNA y específicos de miARN para un rendimiento sin igual (consulte Resumen de miRCURY LNA miRNA PCR System).

• miRCURY LNA RT Kit
• RNA Spike-In Kit
• miRCURY LNA SYBR Green PCR Kit
• miRCURY LNA miRNA PCR Assays (predefinido, personalizado)
• miRCURY LNA miRNA PCR Panels (miARNoma, Focus, personalizado)

miRCURY LNA miRNA Probe PCR System

Una sonda única de hidrólisis mejorada con LN y específica de miARN se combina con un cebador directo mejorado con LN y específico de miARN para obtener señales verdaderas muy específicas y sensibles (consulte «Resumen de miRCURY LNA miRNA Probe PCR System»).

• miRCURY LNA RT Kit
• RNA Spike-In Kit
• miRCURY LNA Probe PCR Kit
• miRCURY LNA miRNA Probe Assays (predefinido, personalizado)
• miRCURY LNA miRNA Probe Panels (miARNoma, Focus, personalizado)

Las reacciones de transcripción inversa son fáciles de realizar como reacciones de tubo único. El ARN total, incluido el miARN, se utiliza como material de inicio y el procedimiento incluye la incubación de la reacción a 40–42 °C durante 1 hora, seguida de un paso de inactivación mediante una incubación breve a 95 °C.

El miRCURY LNA RT Kit se utiliza como parte de los miRCURY LNA miRNA PCR y Probe PCR Systems para:

• Detección, creación de perfiles y cuantificación de la expresión de miARN
• Desarrollo, cribado e identificación de biomarcadores de miARN
• Regulación de miARN y análisis de trayectoria
• Detección de miARN en tipos de muestras complejas y muestras con bajos niveles de expresión de miARN
• Detección de snoRNA
• Validación de la secuenciación de miARN