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miRCURY LNA Custom PCR Panel (8)
Cat. No. / ID: 339330
8 placas idénticas y listas para usar de 96 o 384 pocillos; cada uno de estos contiene suficientes cebadores para una reacción de 10 µl; para una detección basada en SYBR® Green
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Panel
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Additional Plate
miRCURY LNA miRNA Custom PCR Panels están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están concebidos para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.
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Características
- Combine ensayos PCR de LNA prediseñados, verificados y diseñados de forma personalizada en placas de un único uso listas para usar
- Personalice para su tipo de placa, disposición, instrumento de PCR y tamaño de lote favoritos
- Ideal para una creación de perfiles de miARN sensible, específico y reproducible de un número de muestras de mediano a grande
- Utilice nuestra nueva herramienta de diseño en línea fácil de utilizar
Detalles del producto
Los miRCURY LNA miRNA Custom Panels son placas listas para usar de 96 y 384 pocillos que contienen miRCURY LNA miRNA PCR Assays individuales según sus intereses particulares. Los cebadores para la amplificación de PCR directa e inversa son específicos para el miARN y están optimizados con la tecnología LNA, lo que permite realizar una cuantificación sumamente sensible y específica de miARN con el miRCURY LNA miRNA PCR System. Cada pocillo contiene un juego de cebadores suficiente para una reacción de 10 µl.
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Rendimiento
Mayor rendimiento en especificidad
El miRCURY LNA miRNA PCR System es la única plataforma de cuantificación de miARN con especificidad absoluta (consulte el estudio de miRQC publicado en Nature Methods) y superó a otra plataforma de qPCR de miARN basada en sonda en pruebas de especificidad (consulte la figura Prueba de especificidad junto con el sistema de qPCR de miARN basado en sonda del competidor). Esto elimina los falsos positivos y garantiza solo las señales sólidas y fiables de miARN.
El protocolo fácil de seguir de 3 horas le permite ahorrar tiempo y esfuerzo en el laboratorio. Simplemente diluya el ADNc sintetizado, combínelo con la miRCURY LNA SYBR Green Master Mix y añada una alícuota en la placa de PCR, que después estará lista para ejecutarse en su instrumento de real-time PCR. El número de pasos de pipeteado se reduce al mínimo, lo que disminuye la variación técnica. Como consecuencia, puede conseguir una reproducibilidad sumamente alta de un día para otro e incluso de un centro a otro (consulte las figuras Reproducibilidad excelente de un día para otro y Correlación excelente de un centro a otro). La alta reproducibilidad resulta posible incluso al crear perfiles de muestras difíciles, como ARN purificado a partir de suero (consulte la figura Reproducibilidad excelente entre las reacciones de RT en ARN total a partir de suero).
Ver figuras
Principio
Diseñe sus propias placas de qPCR de miARN de 96 o 384 pocillos según una disposición totalmente flexible y varias disposiciones cómodas y predefinidas. Coloque los miRCURY LNA miRNA PCR Assays prediseñados o sus propios miRCURY PCR Assays personalizados en el panel utilizando un configurador de placas intuitivo y fácil de usar en línea. Los paneles se entregan listos para usar, con un único ensayo por pocillo para un volumen de reacción de 10 µl. Añada simplemente ADNc y miRCURY LNA SYBR Green Master Mix.
Los miRNA PCR Panels personalizados incluyen un calibrador entre placas (CEP) preposicionado en réplicas que permiten una calibración óptima y una evaluación del control en estudios de varias placas. El CEP es obligatorio, pero se puede volver a colocar para adaptarlo a su disposición preferida de la placa. Además, el panel se muestra con uno o más controles de agregado de ARN preposicionados UniSp6. Los controles de agregado de ARN se pueden utilizar para monitorización de la síntesis del ADNc o la purificación del ARN. El ensayo UniSp6 CP se puede eliminar y sustituir por juegos de cebadores de miARN o por otros ensayos de control de agregado de ARN. Entre los controles de agregado de ARN alternativos se incluyen UniSp2, UniSp4, UniSp5 y cel-miR-39-3p.
Cobertura
Los miRNA PCR Panels personalizados están disponibles en 2 formatos diferentes:- Con 96 pocillos, listos para usar: diseñe sus paneles a partir de una de las tres disposiciones disponibles. Elija entre nuestra amplia selección de juegos de cebadores de PCR de miARN de LNA y juegos de genes de referencia para cuantificación de miARN humano, de ratón y de rata.
- Con 384 pocillos, listos para usar: diseñe sus paneles a partir de una de las cuatro disposiciones disponibles. Elija entre nuestra amplia selección de juegos de cebadores de PCR de miARN de LNA y juegos de genes de referencia para cuantificación de miARN humano, de ratón y de rata.
Los miRNA PCR Panels personalizados incluyen un calibrador entre placas (CEP) preposicionado en réplicas que permiten una calibración óptima y una evaluación del control en estudios de varias placas. El CEP es obligatorio, pero se puede volver a colocar para adaptarlo a su disposición preferida de la placa. Además, el panel se muestra con uno o más controles de agregado de ARN preposicionados UniSp6. Los controles de agregado de ARN se pueden utilizar para monitorización de la síntesis del ADNc o la purificación del ARN. El ensayo UniSp6 CP se puede eliminar y sustituir por juegos de cebadores de miARN o por otros ensayos de control de agregado de ARN. Entre los controles de agregado de ARN alternativos se incluyen UniSp2, UniSp4, UniSp5 y cel-miR-39-3p.
Añadir ensayos personalizados
Ahora se pueden añadir ensayos personalizados a la placa personalizada. Los ensayos personalizados se diseñan mediante una de nuestras herramientas de diseño de ensayos personalizados. Diseñe cebadores de PCR mejorados con LNA para secuencias no disponibles entre nuestros ensayos prediseñados, por ejemplo, para la identificación de miARN nuevos con secuenciación de nueva generación.Procedimiento
La creación de perfiles de la expresión de miARN con miRCURY LNA miRNA PCR Panels es sencilla y sólida. En primer lugar, prepare el ADNc con el miRCURY LNA RT Kit. A continuación, añada una premezcla de ADNc, miRCURY LNA SYBR Green PCR Master Mix y agua libre de ARNasa a un miRCURY miRNA PCR Panel. En tercer lugar, realice la reacción en un termociclador de real-time PCR.
Aplicaciones
Los miRCURY LNA Custom PCR Panels se utilizan como parte del miRCURY LNA miRNA PCR System para:
- Creación de perfiles de miARN centrados en trayectorias y enfermedades
- Descubrimiento de biomarcadores
Datos y cifras de respaldo
Correlación excelente de un centro a otro.
Se perfiló la expresión de alícuotas de ARN total del mismo corazón e hígado con miRCURY LNA miRNA PCR Panels en dos ubicaciones distintas (en días distintos por parte de operadores diferentes) utilizando distintos instrumentos de Roche LightCycler 480 Real-Time PCR. Se muestra la correlación entre los valores medios de Cq (reacciones de RT por triplicado) de todos los miARN con señales por debajo de 35 valores de Cq (total de 297 puntos de datos).
Recursos
Safety Data Sheets (1)
Quick-Start Protocols (2)
Scientific Posters (1)
Brochures & Guides (2)
Kit Handbooks (2)
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)