Strep-Tactin Superflow Plus

• Capacidad de unión tres veces mayor (hasta 9 mg/ml)
• Ideal para la purificación de sistemas procariotas y eucariotas
• Permite la purificación automatizada en cualquier sistema de cromatografía líquida
• Influencia mínima en la estructura, función e inmunogenicidad de las proteínas

El Strep-tag II (WSHPQFEK) pequeño se puede utilizar para purificar proteínas activas de conformación nativa con alta pureza en resinas Strep-Tactin. Además, se puede utilizar en combinación con la etiqueta His en un procedimiento normalizado de purificación en dos pasos. Strep-Tactin está disponible como resina de cromatografía Superflow para purificaciones a mayor escala (hasta 9 mg/ml de resina). La resina Strep-Tactin también está disponible en cartuchos precargados para la purificación automatizada en sistemas de cromatografía líquida.

Strep-Tactin Superflow Plus permite una purificación muy eficiente de las proteínas (consulte las figuras  Purificación eficiente de GFP marcada con Strep con Strep-Tactin Superflow Plus y  Detección altamente específica de proteínas marcadas con Strep en cualquier sistema de expresión).

Mientras tanto, los pQE TriSystem His·Strep TriSystem Vectors se pueden utilizar para expresar proteínas doblemente marcadas con una etiqueta His y una etiqueta Strep, que se purifican en un procedimiento de afinidad en dos pasos. Los pasos secuenciales de purificación Ni-NTA y Strep-Tactin están estandarizados, son muy rápidos y producen proteínas ultrapuras.

Las proteínas marcadas con Strep se unen con alta afinidad y especificidad a Strep-Tactin, una forma manipulada de estreptavidina (consulte la tabla Capacidades de unión de proteínas de matrices Strep-Tactin). Tras lavarse, las proteínas se eluyen utilizando bajas concentraciones de biotina (el ligando natural de la estreptavidina) o destiobiotina (un análogo estable de la biotina de unión reversible, consulte la figura  Unión de proteínas marcadas con Strep a Strep-Tactin y elución utilizando destiobiotina). Marcar las proteínas con el Strep-tag II pequeño permite una purificación eficiente y estandarizada de las proteínas recombinantes expresadas en sistemas procariotas y eucariotas y produce proteínas muy puras. Además, el Strep-tag II es el sistema de elección en situaciones en las que otros marcadores podrían no ser adecuados, por ejemplo, cuando los aditivos de tampón, como EDTA, pueden romper las columnas IMAC.

Las proteínas marcadas con Strep se expresan utilizando el pQE TriSystem Vector y se obtienen con gran pureza a partir de lisados celulares utilizando procedimientos de purificación por afinidad de Strep-Tactin Superflow Plus. Las proteínas marcadas con Strep se pueden purificar utilizando métodos por lotes o de flujo por gravedad, o las columnas compatibles con FPLC se pueden cargar con Strep-Tactin Superflow Plus para la purificación en sistemas de cromatografía líquida. Strep-Tactin Superflow Plus está disponible en cartuchos de 5 ml para la purificación automatizada en sistemas de cromatografía líquida, como los sistemas FPLC, ÄkTA y BioLogic o la purificación manual utilizando una jeringa. Para los reactivos compatibles con las resinas Strep-Tactin, consulte la tabla Reactivos compatibles con la interacción de Strep-Tactin con el marcador Strep.

La ubicación del extremo C-terminal del marcador garantiza que solo se purifican las proteínas de duración completa. El proceso de purificación es altamente reproducible, lo que garantiza las mismas preparaciones de proteína de alta calidad una y otra vez Los anticuerpos Strep-tag se utilizan para detectar las proteínas marcadas con Strep en los procedimientos de inmunodetección con alta sensibilidad y especificidad.

Strep-Tactin Superflow Plus se puede utilizar para la purificación eficiente y reproducible de hasta 9 mg de proteína marcada con Strep por ml de resina. Las proteínas purificadas se pueden utilizar para:

• Estudios funcionales o de interacción
• Cribado de cristalización
• Análisis estructural
• Generación de anticuerpos