QIAquick 96 PCR Purification Kits

Para la purificación de 96 productos de PCR (hasta 10 µg), entre 100 bp y 10 kb

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QIAquick 96 PCR Purification Kit (4)

Cat. No. / ID:   28181

Para la purificación de 4 reacciones de 96 PCR: 4 QIAquick 96 Plates, tampones, Collection Microtubes (1,2 ml), tapas
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Kit
QIAquick 96 PCR Purification Kit
QIAquick 96 PCR BioRobot Kit
Preparations
4
24
QIAquick 96 PCR Purification Kits están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están concebidos para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

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Características

  • Hasta 95 % de recuperación de ADN listo para usarse
  • Procedimiento rápido y práctico
  • Limpieza de ADN de hasta 10 kb en tres sencillos pasos

Detalles del producto

Los QIAquick 96 PCR Purification Kits incluyen placas con 96 pocillos, tampones y tubos de recogida para la purificación de alto rendimiento basada en membrana de gel de sílice de productos de PCR >100 bp de tamaño. El ADN de hasta 10 kb se purifica con un procedimiento sencillo y rápido de unión, lavado y elución y un volumen de elución de 60–80 µl (lo que deriva en un volumen de eluido de 40–60 µl). El procedimiento de limpieza se puede automatizar por completo en la estación de trabajo BioRobot Universal con el QIAquick 96 PCR BioRobot Kit.

Rendimiento

El QIAquick 96 PCR Kit brinda un método rápido y sencillo para la purificación de alto rendimiento de muestras de PCR, con un índice de recuperación de hasta un 90 %. El procedimiento de QIAquick 96 genera un ADN altamente puro adecuado para diversas aplicaciones posteriores (consulte la figura « Secuenciación exacta»). Empleando el QIAvac 96, los fragmentos de ADN de 100 bp–10 kb en tamaño se purifican a partir de 1–4 × 96 muestras.
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Principio

Los kits QIAquick 96 contienen un ensamblaje de membrana de sílice para la unión del ADN en tampón de alta salinidad y elución con tampón de baja salinidad o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceites minerales, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN. La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes relacionados con las resinas sueltas y los residuos pastosos. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promover la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

El procedimiento de QIAquick 96 permite la purificación paralela de hasta 96 muestras de PCR empleando la purificación eficiente impulsada por vacío en un kit QIAvac 96.
El QIAquick 96 PCR BioRobot Kit es un formato de kit especializado que se ha optimizado para usarlo en el sistema BioRobot Universal. El kit brinda módulos de QIAquick 96, junto con todos los tampones y utensilios de plástico necesarios para la limpieza automatizada de alto rendimiento de 96 muestras de PCR.

Procedimiento

El sistema QIAquick emplea un procedimiento sencillo de unión, lavado y elución (consulte el diagrama de flujo « Procedimiento de QIAquick 96»). El tampón de unión se añade directamente a la muestra de PCR o otras reacciones enzimáticas y la mezcla se aplica a la placa con 96 pocillos. Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad generadas por el tampón. Las impurezas se lavan y el ADN puro se eluye con un volumen pequeño de tampón suministrado de baja salinidad o agua, listo para usarse en aplicaciones posteriores.

Manejo

Los módulos multipocillos QIAquick se procesan con la purificación impulsada por vacío en los colectores QIAvac. El QIAquick 96 PCR Purification Kit requiere el uso del colector de vacío QIAvac 96. El procedimiento de limpieza se puede automatizar por completo en las estaciones de trabajo BioRobot Universal con el QIAquick 96 PCR BioRobot Kit.

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Aplicaciones

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute o QIAquick están listos para su uso directo en diversas aplicaciones, incluyendo la secuenciación, el análisis de micromatrices, la ligación y transformación, la digestión de restricción, el marcado, la microinyección, la PCR y la transcripción in vitro.

Datos y cifras de respaldo

Specifications

FeaturesSpecifications
Binding capacity10 µg
ProcessingManual/automatizado
Removal <10mers 17–40mers dye terminator proteinsEliminación, <40 mers
Sample type: applicationsADN, oligonucleótidos: Reacciones de PCR
FormatPlaca de 96 pocillos
Fragment size100 bp–10 kb
TechnologyTecnología de sílice
Recovery: oligonucleotides dsDNARecuperación: oligonucleótidos, ADNbc
Elution volume60-80 μl

Recursos

Quick-Start Protocols (1)
Technical Information and Important Notes (2)
Kit Handbooks (1)
For rapid purification of multiple PCR products 
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

Publications

Temporal and differential gene expression of Singapore grouper iridovirus.
Chen LM; Wang F; Song W; Hew CL;
J Gen Virol; 2006; 87 (Pt 10):2907-2915 2006 Oct PMID:16963749
Comparative genomics of host-specific virulence in Pseudomonas syringae.
Sarkar SF; Gordon JS; Martin GB; Guttman DS;
Genetics; 2006; 174 (2):1041-56 2006 Sep 1 PMID:16951068
cDNA microarrays as a tool for identification of biomineralization proteins in the coccolithophorid Emiliania huxleyi (Haptophyta).
Quinn P; Bowers RM; Zhang X; Wahlund TM; Fanelli MA; Olszova D; Read BA;
Appl Environ Microbiol; 2006; 72 (8):5512-26 2006 Aug PMID:16885305
Characterization of the vernalization response in Lolium perenne by a cDNA microarray approach.
Ciannamea S; Busscher-Lange J; de Folter S; Angenent GC; Immink RG;
Plant Cell Physiol; 2006; 47 (4):481-92 2006 Jan 31 PMID:16449231
Anti-inflammatory activity in vitro and in vivo of the protein farnesyltransferase inhibitor tipifarnib.
Xue X; Lai KT; Huang JF; Gu Y; Karlsson L; Fourie A;
J Pharmacol Exp Ther; 2005; 317 (1):53-60 2005 Dec 13 PMID:16352705

FAQ

I bound an 11 kb DNA fragment to a QIAquick column; is it completely lost?

Larger DNA fragments bind more tightly to the QIAquick columns. It is difficult to predict whether a DNA fragment larger than 10 kb can be efficiently recovered, because this depends on base composition as well as fragment size. If the fragment is only a few kb larger than the 10 kb limit, it can be helpful to heat the elution buffer EB to 60°C and let it incubate on the column for a few minutes before centrifuging. However, please note that it will become less likely to recover your sample the larger the fragment size is. As we cannot guarantee recovery of fragments larger than the maximum cutoff size, we do not recommend to purify such fragments using QIAquick Kits.

The QIAEX II Kit can be used to extract DNA fragments up to 50 kb from agarose or polyacrylamide gels.

 

FAQ ID -756
How can I improve recoveries when using the QIAquick Kits?

Buffer PE did not contain ethanol

Ethanol must be added to Buffer PE (concentrate) before use. Repeat procedure with correctly prepared Buffer PE.

Inappropriate elution buffer

DNA will only be eluted efficiently in the presence of low-salt buffer (e.g., Buffer EB: 10 mM Tris·Cl, pH 8.5) or water. Elution efficiency is strongly dependent on the salt concentration and pH of the elution buffer. Contrary to adsorption, elution is most efficient under basic conditions and low salt concentrations. DNA is eluted with 50 or 30 µl of the provided Buffer EB (10 mM Tris·Cl, pH 8.5), or water. The maximum elution efficiency is achieved between pH 7.0 and 8.5. When using water to elute, make sure that the pH is within this range. In addition, DNA must be stored at –20°C when eluted with water since DNA may degrade in the absence of a buffering agent. Elution with TE (10 mM Tris·Cl, 1 mM EDTA, pH 8.0) is possible, but not recommended because EDTA may inhibit subsequent enzymatic reactions.

Elution buffer incorrectly dispensed

Add elution buffer to the center of the QIAquick membrane to ensure that the buffer completely covers the membrane. This is particularly important when using small elution volumes (30 µl).

FAQ ID -180
Can I use a centrifuge instead of vacuum when using the QIAquick 96 PCR Purification Kit?
Yes, you can use a QIAGEN Centrifuge with the QIAquick 96 PCR Purification Kit. Follow the Supplementary Protocol 'Spin procedure for purifying 2 x 96 PCR samples using the Plate Rotor 2 x 96, a special centrifuge, and the QIAquick 96 PCR Purification Kit.' Here's the link to the protocol.
FAQ ID -293
Do you have a protocol for purifying 2x96 PCR samples simultaneously with the QIAquick 96 PCR Purification Kit?

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Spin procedure for purifying the 2x96 PCR samples using the Plate Rotor 2x96, a special centrifuge and the QIAquick 96 PCR Purification Kit' (QQ01).  Please contact your local QIAGEN Technical Service for this protocol.

The protocol is for use with QIAGEN Centrifuges and the Plate Rotor 2 x 96.

FAQ ID -935
Do I have to remove the oil from my PCR reaction before using the QIAquick or MinElute PCR Purification Kit?
No - mineral oil will not affect the clean-up procedure with the QIAquick or MinElute PCR Purification Kit.
FAQ ID -575
Do you have protocols for multiple extractions of DNA fragments from agarose gels?

Yes, please follow the Supplementary Protocols 'High-throughput gel extractions using the QIAquick 96 PCR Purification Kit' (QQ03).  Please contact your local QIAGEN Technical Service for this protocol.

FAQ ID -944
Why does my DNA sample float out of the slot when loading it onto an agarose gel?

DNA fragments purified with the QIAGEN DNA Cleanup Systems, i.e., the QIAquick PCR Purification Kit, the MinElute Reaction Cleanup Kit, the QIAEX II Gel Extraction Kit etc. may float out of the loading wells of agarose gels due to residual ethanol carried over from the wash step with Buffer PE (despite the addtition of glycerol-containing loading buffer).

Use either of the following options to remove residual ethanol from the eluate:

  • re-purify the sample using a QIAquick-, or MinElute column, or QIAEX II resin
  • incubate the eluate at 56°C for 10 min to evaporate the ethanol
  • dry down the sample in a vacuum centrifuge, and resuspend the pellet in a small volume of sterile water
FAQ ID -205