Calculadora de ligaduras

Esta herramienta determina la masa del inserto necesaria para diversas relaciones molares inserto:vector dentro del rango idóneo para reacciones de ligaduras típicas.

icon_0330_cc_gen_calculator-s Calcular dianasIntroduzca los datos de las dianas que le interesan y reciba cálculos de secuenciación
Conocimientos

 

Masa requerida del ADN del inserto [g] = masa de ADN del vector [g] × {longitud del ADN del inserto / longitud del ADN del vector} × relación molar deseada entre inserto y vector

Notas: La relación deseada es una de este conjunto {1, 2, 3, 5 ,7}

La longitud del inserto debe ser más pequeña que la longitud del vector

Más información

En primer lugar, el ADN del inserto y el vector se digiere mediante endonucleasas de restricción para crear fragmentos de ADN con extremos salientes (o romos). A continuación, los fragmentos de ADN deseados se aíslan y se unen posteriormente mediante tratamiento con ADN ligasa. Por último, el vector intacto resultante se transforma en células E. coli competentes, y los transformantes se identifican mediante métodos de selección genética adecuados.

 

¿Desea obtener más información sobre el proceso paso a paso de la ligadura de ADN y su reacción típica? Más información.

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Productos recomendados

T4 DNA Ligase (Rapid)
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T7 DNA Ligase (900,000 U)
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T7 DNA Ligase (900,000 U)
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CAT NO./ID P7080L
T4 DNA Polymerase (exo) (2000 U)
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CAT NO./ID EN11-250
T4 DNA Ligase MBG (2500 U)
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Klenow Fragment (2500 U)
CAT NO./ID P7060L
Klenow Fragment (2500 U)
2500 U of Klenow Fragment (0.5 mL at 5000 U/mL) and 10x Blue Buffer (1 x 1.5 mL)
Saltonase (5000 U)
CAT NO./ID EN32-050
Saltonase (5000 U)
20 µL x 250 U/µL. Storage temperature: -20°C without a defrost cycle; -80°C for long storage. Stable at -20°C for at least 24 months. No loss in activity was observed after 8 weeks of incubation at 37°C.
End-Repair Mix (low concentration)
CAT NO./ID Y9140-LC-L
End-Repair Mix (low concentration)
For 200 low-concentration DNA reactions. End-Repair Mix 1X (0.20 mL), 10X End-Repair Buffer (1 x 1.5 mL) and 1 mM dNTP solution (0.5 mL).
AllTaq PCR Core Kit (250 U)
CAT NO./ID 203123
AllTaq PCR Core Kit (250 U)
50 µl AllTaq Polymerase (5 U/µl), 1.2 ml AllTaq PCR Buffer (5x), 55 µl dNTP Mix (10 mM each), 200 µl Template Tracer (25x), 50 µl Master Mix Tracer (125x), 2 ml Q-Solution (5x), 1.2 ml MgCl2 (25 mM), 1.9 ml RNase-Free Water
Taq DNA Polymerase (250 U)
CAT NO./ID 201203
Taq DNA Polymerase (250 U)
250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
RNase A (17,500 U)
CAT NO./ID 19101
RNase A (17,500 U)
2.5 ml (100 mg/ml; 7000 units/ml, solution) Unit definition: That amount of enzyme causing the hydrolysis of RNA at a rate such that k (velocity constant) equals unity (Kunitz units) at 25°C and pH 5.0.
HotStarTaq DNA Polymerase (250 U)
CAT NO./ID 203203
HotStarTaq DNA Polymerase (250 U)
250 units HotStarTaq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
Omniscript RT Kit (50)
CAT NO./ID 205111
Omniscript RT Kit (50)
For 50 reverse-transcription reactions: 200 units Omniscript Reverse Transcriptase, 150 µl 10x Buffer RT, 100 µl dNTP Mix (contains 5 mM each dNTP), 1.1 ml RNase-free water
RNase-Free DNase Set (50)
CAT NO./ID 79254
RNase-Free DNase Set (50)
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QIAGEN Protease (7.5 AU)
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QIAGEN Protease (7.5 AU)
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QIAGEN Proteinase K (2 ml)
CAT NO./ID 19131
QIAGEN Proteinase K (2 ml)
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