QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit

Zur automatischen Aufreinigung von genomischer und mitochondrialer DNA aus Vollblut

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QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit (12)

Cat. No. / ID:   965152

Für 12 x 96 DNA-Präparationen: 12 QIAamp 96 Plates, Puffer (Waschpuffer haben Barcodeetiketten), QIAGEN Protease, Elution Microtubes CL, Deckel, S-Blocks, Tape Pad
QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.

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Eigenschaften

  • Schnelle Isolierung von hochwertiger, gebrauchsfertiger DNA
  • Keine organische Extraktion oder Alkoholausfällung
  • Konsistent hohe Ausbeute
  • Entfernung von Verunreinigungen und Inhibitoren

Angaben zum Produkt

Das QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit bietet eine automatisierte DNA-Aufreinigung auf der BioRobot MDx Workstation oder dem BioRobot Universal System unter Einsatz der bewährten QIAamp Silikamembran-Technologie. Das vollautomatisierte Verfahren auf der BioRobot MDx Workstation dauert inklusive Auslesen der Barcodes und vollständiger Prozessdokumentation weniger als 2,5 Stunden und erfordert während des Laufs keine manuellen Interventionen.

Leistung

Das QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit-Verfahren ermöglicht die DNA-Isolierung auf einer 96-Well-Platte mit automatisierter Verarbeitung von 32 bis 96 Proben (200 µl Probenvolumen) in 8er-Gruppen auf dem BioRobot MDx oder dem BioRobot Universal System.  Das vollautomatisierte Verfahren dauert für 96 Proben einschließlich Auslesen der Barcodes, 20-minütigem Beladungscheck und vollständiger Prozessdokumentation weniger als 2,5 Stunden und benötigt keine manuelle Bearbeitungszeit. Die typische Ausbeute liegt bei 3–6 µg pro 200 µl gesundem Vollblut mit einem Elutionsvolumen von 200 µl.

Die resultierende DNA liefert in der nachgelagerten Amplifikation und in Southern-Blotting-Assays gute Ergebnisse (siehe Abbildung „ Keine PCR-Inhibition“ und „ Zuverlässige Real-time PCR“).

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Prinzip

Das QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit vereinfacht die Isolierung von DNA aus Vollblut durch ein schnelles, automatisiertes 96-Well-Platten-Verfahren. Es ist keine Phenol-Chloroform-Extraktion erforderlich. Die DNA bindet spezifisch an die QIAamp Silikagelmembran, während Verunreinigungen durchlaufen. PCR-Inhibitoren wie beispielsweise divalente Kationen und Proteine werden in drei effizienten Waschschritten vollständig entfernt, sodass reine DNA entweder in Wasser oder in einem mit dem Kit gelieferten Puffer eluiert werden kann. Die QIAamp-Technologie liefert genomische und mitochondriale DNA aus Vollblut, die direkt für PCR- und Blotting-Verfahren verwendet werden kann.

Zu den Vorteilen des vollautomatisierten Systems zählen eine hohe Prozesssicherheit und eine "Walkaway-Automatisierung", um ein hocheffizientes System für die DNA-Aufreinigung im Labor zu bieten. Die QIAamp-Probenvorbereitungstechnologie ist vollständig lizenziert.

Verfahren

Optimierte Puffer lysieren die Proben, stabilisieren die Nukleinsäuren und verbessern die selektive Adsorption der Nukleinsäuren an die QIAamp-Membran. Nach Zugabe von Alkohol werden die Lysate auf die QIAamp 96-Well-Platte aufgetragen. Mit Waschpuffern und Ethanol werden Verunreinigungen entfernt, und die reine, gebrauchsfertige DNA wird anschließend mit Wasser oder Puffer mit niedriger Salzkonzentration (siehe Flussdiagramm „ Protokoll“) eluiert.
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Anwendungen

Das QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit bietet ein 96-Well-Format für die Bearbeitung von 32–96 Proben in 8er-Gruppen. Mit dem Kit können Vollblut- oder Buffy Coat-Proben mit gängigen Antikoagulanzien wie Citrat und EDTA bearbeitet werden. Mit dem QIAamp DNA Blood BioRobot MDx Kit können frische oder gefrorene Blut- und Buffy Coat-Proben bearbeitet werden, sofern sie nicht mehr als einmal eingefroren und wieder aufgetaut wurden. Die QIAamp-Technologie liefert genomische und mitochondriale DNA aus Vollblut, die direkt in PCR- und Blotting-Verfahren verwendet werden kann.

Ergänzende Daten und Abbildungen

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsPCR, Blotting
Yield3–6 µg
Elution volume200 µl
TechnologySilika-Technologie
Sample amount200 µl
Format96-Well-Platte
ProcessingAutomatisiert
Main sample typeVollblut, Buffy Coat
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinGenomische DNA, mitochondriale DNA
For automated processingBioRobot MDx
Time per run or per prep< 2,5 Stunden

Ressourcen

Kit Handbooks (2)
For purification of genomic DNA from fresh or frozen whole blood or buffy coat using the BioRobot MDx workstation or BioRobot Universal System
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

What is the difference between QIAGEN Protease and QIAGEN Proteinase K provided in various QIAamp Kits?

QIAGEN Proteinase K is a subtilisin-type protease, which cleaves at the carboxyl side of hydrophobic, aliphatic and aromatic amino acids. It is particularly suitable for short digestion times. It possesses a high specific activity over a wide range of temperatures and pH values with substantially increased activity at higher temperature. Soluble calcium is not essential for enzymatic activity. This means that EDTA, which is used to inhibit Mg2+-dependent enzymes such as nucleases, will not inhibit Proteinase K activity.

QIAGEN Protease is a broad-specificity Serine protease with high activity, cleaving preferentially at neutral and acidic residues. It is an economical alternative to Proteinase K for isolation of native DNA and RNA from a variety of samples.

FAQ ID -761
What can be used as an alternative to the A260 measurement for quantification of small amounts of RNA and DNA?

Small amounts of RNA and DNA may be difficult to measure spectrophotometrically. Fluorometric measurements, or quantitative RT-PCR and PCR are more sensitive and accurate methods to quantify low amounts of RNA or DNA.

Fluorometric measurements are carried out using nucleic acid binding dyes, such as RiboGreen® RNA Quantitation Reagent for RNA, and PicoGreen® DNA Quantitation Reagent for DNA (Molecular Probes, Inc.).

FAQ ID -728
How do I safely inactivate biohazardous flow-through material?

Always dispose of potentially biohazardous solutions according to your institution’s waste-disposal guidelines. Although the lysis and binding buffers in QIAamp, DNeasy, and RNeasy kits contain chaotropic agents that can inactivate some biohazardous material, local regulations dictate the proper way to dispose of biohazards. DO NOT add bleach or acidic solutions directly to the sample-preparation waste. Guanidine hydrochloride in the sample-preparation waste can form highly reactive compounds when combined with bleach.
Please access our Material Safety Data Sheets (MSDS) online for detailed information on the reagents for each respective kit.

FAQ ID -12